流式細(xì)胞儀的構(gòu)造、工作原理及數(shù)據(jù)分析(已修改)
2025-12-02 22:30 本頁面
【正文】 流式細(xì)胞儀的構(gòu)造、工作原理及數(shù)據(jù)分析 東北師范大學(xué)生物基礎(chǔ)實驗教學(xué)中心 巴雪青 ? 流式細(xì)胞術(shù)（ flow cytometery, FCM）是 20世紀(jì) 70年代發(fā)展起來的一種 可以快速、準(zhǔn)確、客觀，可同時檢測單個微粒（通常是細(xì)胞）的多項特性，并加以定量的技術(shù)，并且可以對特定群體加以分選。 ? 研究對象為生物顆粒，如各種細(xì)胞、微生物及人工合成微球等 ? 研究的微粒特性包括多種物理及生物學(xué)特征，并加以定量。 ? 流式細(xì)胞儀是一種集激光技術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測量技術(shù)、電子計算機(jī)以及細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)為一體的新型高科技儀器。 流式細(xì)胞儀的特點 ? 單個細(xì)胞或微粒分析 ? 同時多參數(shù)分析 ? 速度快： 10000個細(xì)胞 (微粒 )/秒 ? 統(tǒng)計學(xué)意義：提供細(xì)胞群體的均值和分布情況 ? 分選感興趣的細(xì)胞或微粒 ? 其結(jié)構(gòu)一般分為 5部分：流動室及液流驅(qū)動系統(tǒng)；激光光源及光束形成系統(tǒng)；光學(xué)系統(tǒng)；信號檢測、存儲、顯示分析系統(tǒng)；細(xì)胞分選系統(tǒng)。 （一）流動室與液流驅(qū)動系統(tǒng) ? 流動室是儀器核心部件，被測樣品在此與激光相交。流動室由石英玻璃鋼制成，并在石英玻璃中央開一個孔徑為 430μm 180μm的長方形孔，供細(xì)胞單個流過，檢測區(qū)在該孔的中心，這種流動室的光學(xué)特性良好，流速較慢，因而細(xì)胞受照時間長，可收集的細(xì)胞信號光通量大，配上廣角收集透鏡，可獲得很高的檢測靈敏度和測量精度。 ? 流動室內(nèi)充滿了鞘液，鞘液的作用是將樣品流環(huán)包，鞘液流是一種穩(wěn)定的液體流動，鞘液以勻速運(yùn)動流過流動室，在整個系統(tǒng)運(yùn)行中流速是不變的，樣品流在鞘液的環(huán)包下形成流體力學(xué)聚焦，使樣品流不會脫離液流的軸線方向，并且保證每個細(xì)胞通過激光照射區(qū)的時間相等
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