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流式細(xì)胞術(shù)的原理ppt課件-wenkub.com

2025-01-14 17:47 本頁(yè)面
   

【正文】 7. 避免使用串聯(lián)染料,不穩(wěn)定,可能發(fā)生降解。 3. 盡量選擇應(yīng)用廣、亮度高的熒光素 — 熒光素的強(qiáng)弱用 Stain Index染色指數(shù)來(lái)表示,數(shù)值越大,信噪比越高。 4)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的測(cè)定。在流式試劑日益全面的情況下,越來(lái)越少的客戶選擇這種方式。 多色實(shí)驗(yàn)中,分出陰陽(yáng)性細(xì)胞群分界線 調(diào) 閾值 減少背景信號(hào) 調(diào) 補(bǔ)償 減去干擾信號(hào) 調(diào)節(jié)電壓、閾值、補(bǔ)償 調(diào)整熒光接收器電壓 電壓改變對(duì)數(shù)據(jù)顯示的影響 數(shù)據(jù)存儲(chǔ) List Mode列表模式:每個(gè)細(xì)胞的參數(shù)依次按順序排列存儲(chǔ) FSC SSC FL1 FL2 EVENT 1 30 60 645 895 EVENT 2 100 200 245 40 EVENT 3 300 600 100 700 FITC/PE 雙染樣本 數(shù)據(jù)顯示 ?二維點(diǎn)圖 ( Dot Plot) ?直方圖( Histogram) ?等高線圖 ( Contour Plot) ?密度圖 ( Density) ?三維圖( 3D Plot)等 我們一般標(biāo)注的是吸收波峰,也就是最大吸收波長(zhǎng):ExMax 發(fā)射光譜( Emission, Em): 是指熒光素發(fā)射的一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的熒光。處于激發(fā)態(tài)的熒光分子極不穩(wěn)定,它可以通過(guò)極短時(shí)間(納秒)內(nèi)以發(fā)射一定波長(zhǎng)的光量子的方式釋放所吸收的能量從而返回到基態(tài)。 激光光束成形 透鏡聚焦 光學(xué)系統(tǒng) 收集系統(tǒng) ?如何將混合的熒光區(qū)分開來(lái),分別進(jìn)行收集呢? ?濾光片置于熒光探測(cè)器前,限定其接收的熒光的波長(zhǎng)范圍 光學(xué)系統(tǒng) 電子系統(tǒng) 流式細(xì)胞儀的工作原理 散射光信號(hào) 前向角散射光( FSC, F
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