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流式細(xì)胞儀的構(gòu)造、工作原理及數(shù)據(jù)分析(留存版)

  

【正文】 長(zhǎng)通濾片 (longpass filter, LP)、短通濾片 (shortpass filtr, SP)及帶通濾片(bandpass filter, BP)。 流式細(xì)胞儀的特點(diǎn) ? 單個(gè)細(xì)胞或微粒分析 ? 同時(shí)多參數(shù)分析 ? 速度快: 10000個(gè)細(xì)胞 (微粒 )/秒 ? 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:提供細(xì)胞群體的均值和分布情況 ? 分選感興趣的細(xì)胞或微粒 ? 其結(jié)構(gòu)一般分為 5部分:流動(dòng)室及液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng);激光光源及光束形成系統(tǒng);光學(xué)系統(tǒng);信號(hào)檢測(cè)、存儲(chǔ)、顯示分析系統(tǒng);細(xì)胞分選系統(tǒng)。 方向的散射光信號(hào),側(cè)向散射光對(duì)細(xì)胞膜、胞質(zhì)、核膜的折射率更為敏感,可提供有關(guān)細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒性質(zhì)的信息。從雙參數(shù)圖形中可以將各細(xì)胞亞群區(qū)分開(kāi),同時(shí)可獲得細(xì)胞相關(guān)的重要信息。以上兩種信號(hào)都是來(lái)自激光的原光束,其波長(zhǎng)與激光的波長(zhǎng)相同。流式細(xì)胞儀的構(gòu)造、工作原理及數(shù)據(jù)分析 東北師范大學(xué)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心 巴雪青 ? 流式細(xì)胞術(shù)( flow cytometery, FCM)是 20世紀(jì) 70年代發(fā)展起來(lái)的一種 可以快速、準(zhǔn)確、客觀,可同時(shí)檢測(cè)單個(gè)微粒(通常是細(xì)胞)的多項(xiàng)特性,并加以定量的技術(shù),并且可以對(duì)特定群體加以分選。 ? 前向角散射光( FSC, Forward Scatter) 細(xì)胞相對(duì)大小及其表面積 ? 側(cè)向角散射( SSC, Side Scatter) ? 細(xì)胞粒度及細(xì)胞內(nèi)相對(duì)復(fù)雜性 ? (1)前向角散射:前向角散射與被測(cè)細(xì)胞的大小有關(guān),確切地說(shuō),它與細(xì)胞直徑的平方值密切相關(guān)。 外周全血細(xì)胞散射光雙參數(shù)點(diǎn)圖 (紅細(xì)胞溶解后) 雙色熒光標(biāo)記細(xì)胞散點(diǎn)圖 ? 等高圖和密度圖分析 數(shù)據(jù)分析 ? 三維圖分析 流式細(xì)胞儀的科研應(yīng)用
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