【正文】 本課題的研究意義 ............................................................................................ 3 2 正交試驗優(yōu)選大青葉多糖的提取工藝 ................................................. 錯誤 !未定義書簽。 The extraction process which targets for fine polysaccharide is under conditions that 25:1(V/M) and extracting for twice and hours per time at temperature of 85℃ 。以粗糖得率為指標(biāo)優(yōu)選工藝。哈爾濱 2021 年 5 月 大青葉多糖提取工藝研究 I 摘要 大青葉為十字花科植物菘藍的干燥葉，為我國大宗使用藥材，其制劑生產(chǎn)銷售堪稱中藥之最，是清熱解毒藥的代表。本文以大青葉為實驗材料，采用傳統(tǒng)水提醇沉的方法提取大青葉多糖。最佳工藝為提取溫度 85 ℃、提取時間 、提取次數(shù) 2次、液料比 25:1。 This research can provide a theoretical basis for utilization and process improvement of FI. Key words: Folium polysaccharide 。 方法 .......................................................................................................... 4 實驗材料 ....................................................................................................... 4 實驗儀器 ....................................................................................................... 4 ................................................................................................... 4 各因素對多糖得率的影響 ............................................................ 錯誤 !未定義書簽。 提取次數(shù)對大青葉多糖得率的影響 .................................... 錯誤 !未定義書簽。 4 討論 ........................................................................................................................ 10 5 結(jié)論 .................................................................................................. 錯誤 !未定義書簽。完整的葉呈長橢圓形至長圓狀倒披針形，長 4～ 11 厘米，寬 1～ 3 厘米，全緣或微波狀；先端鈍尖，基部漸狹，延成翼狀，上面有時可見點狀突起，下面中脈明顯。以葉大、無柄、色暗灰綠者為佳。靛玉紅及其同系物能夠抑制細胞周期蛋白依賴激酶，因而對慢性粒細胞白血病具有明顯的抑制作用。 苷類：蕓苔葡萄糖硫苷、新蕓苔葡萄糖苷 [6]、腺苷、胞苷、尿苷、鳥苷 [7]。 其他：大青葉中還含有 10Hindolo(3,2b)quinoline[6]、 deoxyvascinone[6]、落葉松脂素 [6]、多種氨基酸 [10]、揮發(fā)性成分 [10]。張連同 [12]用 K— B 紙片擴散法測定大青葉的水煎劑的體外抑菌活性，發(fā)現(xiàn)大青葉在體外對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型鏈球菌、乙型鏈球菌均有明顯抑菌作用。劉盛等 [15]選用雞胚法考察不同性質(zhì)的大青葉對甲型流感病毒 (A1 京防 86— 1)的抑制作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)關(guān)于清熱解毒功效的闡釋目前主要集中于以下兩點：一是抗細菌內(nèi)毒素作用；二是抗病原微生物作用，尤其是抗內(nèi)毒素活性為該類中藥的重要特征 [14]。結(jié)果試驗發(fā)現(xiàn)：大青葉水煎劑對小鼠脾淋巴細胞的增殖反應(yīng)具有上調(diào)作用，同時大青葉與刀豆素 A（ ConA）和細菌脂多糖（ LPS）協(xié)同對小鼠脾淋巴細胞增殖活性有促進作用，并且能促進小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能，推斷大青葉的抗炎、抗病毒作用可能不是直接抑菌、殺菌，而在于調(diào)動機體內(nèi)的其他抗 感染功能 [18]。另有實驗表明：蓼大青的醋酸乙酯萃取部分能夠顯著地抑制 NO的合成，其途徑是通過小鼠腹膜的巨噬細胞誘導(dǎo)干擾素 γ 脂多糖，且這種抑制作用隨藥物的增加而增大，該研究結(jié)果表明蓼大青的萃取物可能對涉及 NO合成的多種疾病具有潛在的治療和調(diào)節(jié)作用 [21]。 抗癌作用：大青葉具有具 有抗腫瘤作用，大青葉中的靛玉紅對動物移殖性腫瘤有較強的抑制作用，對慢性粒細胞白血病有較好的療效。 多糖的提取方法 種類繁多的植物多糖，存在于植物中的不圍不盡相同。多糖是極性大分子化合物，在所有溶劑中，水、乙醇是典型的強極性溶劑，對植物組織的穿透力強，提取效率高，在生產(chǎn)上使用安全。 稀酸提取 有些多糖適合用稀酸提取。 堿提取 有些多糖在堿液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。 超濾法 超濾是一種膜分離技術(shù)，所采用的超濾膜能夠從水和其他液體中分離出很小的膠體和大分子。大青葉和板藍根作為同一植物的不同部位，化學(xué)成分大致相同。新興的提取工藝如超聲波法，酶提取法，微波提取法僅局限于實驗室階段，還未大量應(yīng)用到工業(yè)生產(chǎn)中。將其靜置 24 h 后，離心過濾，將得到的沉淀至于干燥箱內(nèi)，在 60 ℃ 下進行干燥，所得褐色 粘稠 固體即為粗多糖。 各因素對多糖提取效果的影響 本文選取與工業(yè)生產(chǎn)密切相關(guān)且容易控制的影響因素：料液比（ m/v)，提取時間，提取次數(shù)，提取溫度做為單因素考察對象。 提取時間對多糖提取效果的影響 提取溫度 100 ℃ ，提取次數(shù) 1 次，料液比 1:45，醇沉比為 1:3，提取時間分別為 1 h、2 h、 3 h，考察提取時間對大青葉多糖提取效果的影響。 大青葉多糖提取工藝研究 5 提取次數(shù)對多糖提取效果的影響 控制提取時間 1 h，提取溫度 100 ℃ ，料液比 1:20，醇沉比為 1:3，提取次數(shù)分別為 1次、 2 次、 3 次，考察提取時間對多糖提取效果的影響。 表 1 正交試驗因素水平表 水 平 因 素 提取溫度 A（ ℃ ） 提取時間 B（ h） 料液比 C 提取次數(shù) D 1 85 15 1 2 90 25 2 3 100 35 3 3 結(jié)果與分析 單因素實驗結(jié)果與分析 提取溫度對多糖得率的影響 提取溫度在中獸藥的實際生產(chǎn)中影響較大，一方面影響有效成分的提 取率和穩(wěn)定性，另一方面又影響提取企業(yè)的能耗，車間溫度，以及工人的生產(chǎn)環(huán)境福利等因素。 大青葉多糖提取工藝研究 6 圖 1 提取溫度對多糖得率的影響 提取時間對多糖得率的影響 圖 2 提取時間對多糖得率影響 由圖 2可看出，提取時間粗糖得率隨著提取時間的增長先增大后減小，在 5 h時達到最大。 大青葉多糖提取工藝研究 7 料液比對多糖得率的影響 圖 3 料液比對多糖得率的影響 由圖 3 可知，隨著料液比的增加，多糖得率先增加后減小，拐點在 1:30 附近。 大青葉多糖提取工藝研究 8 表 2 大青葉粗糖提取工藝正交試驗設(shè)計表及結(jié)果 序號 (serial number) A B C D 粗糖得率 % 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 K1 K2 K3 R 直觀分析結(jié)果來源于極差， 由表 2 中直觀分析結(jié)果 顯示 各因素的影響大小順序為 D C B A，即提取次數(shù)對大青粗糖得率的影響 料液比 提取時間 提取溫度， 大青葉粗糖最佳提取方案為 A1B3C3D2，將上述結(jié)果進行方差分析，結(jié)果如 表 3。表明該最優(yōu)工藝在實驗室條件下較穩(wěn)定可靠。目前還未見以多糖成分作為評價指標(biāo)評價板藍根和大青葉質(zhì)量的研究，因此對二者多糖的含量，結(jié)構(gòu)，藥理作用研究具有一定的現(xiàn)實意義。再者張氏使用的大青葉未注明來源，中藥具有道地性，也有可能是選用的藥材多糖本身含量不同的原因。 大青葉多糖提取工藝研究 11 參考文獻 [1]李園園，方建國，王文清，等 .大青葉歷史考證及現(xiàn)代研究進展 .中草藥雜志， 2021，第 36卷第 5 期 . [2]段治榮 .大青葉的臨床應(yīng)用 .四川畜牧獸醫(yī)雜志 .1982 年第 3 期 . [3]魏恒，大青葉中生物堿 4（ 3H）喹唑酮的提取和純化工藝研究 .甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)。Takanori O。Kanso I?，F(xiàn)在的我，成熟、從容，這一切，都該感謝這四年間幫助過我的老師和同學(xué)，謝謝你們讓我這個異鄉(xiāng)人感覺到了家人的溫暖！ 本課題從試驗設(shè)計到論文的撰寫都是在石廣亮老師的悉心指導(dǎo)與幫助下完成的。s Zhangye city during their journey to Kazakhstan, May 5, 2021. The caravan, consisting of more than 100 camels, three horsedrawn carriages and four support vehicles, started the trip from Jingyang county in Shaanxi on Sept 19, 2021. It will pass through Gansu province and Xinjiang Uygur autonomous region, and finally arrive in Almaty, formerly known as AlmaAta, the largest city in Kazakhstan, and Dungan in Zhambyl province. The trip will cover about 15,000 kilometers and take the caravan more than one year to plete. The caravan is expected to return to Jingyang in March 2021. Then they will e back, carrying specialty products from Kazakhstan A small art troupe founded six decades ago has grown into a household name in the Inner Mongolia autonomous region. In the 1950s, Ulan Muqir Art Troupe was created by nine young musicians, who toured remote villages on horses and performed traditional Mongolian music and dances for nomadic families. The 54yearold was born in Tongliao, in eastern Inner Mongolia and joined the troupe in says there are 74 branch troupes across Inner Mongolia and actors give around 100 shows every year to local nomadic people. I can still recall the days when I toured with the troupe in the early 39。t just about sharing art with nomadic families but also about gaining inspiration for the music and dance. Ulan Muqir literally translates as red burgeon, and today39。s president, who is also a renowned tenor, tells China Dai