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基因工程體外重組(帶動畫)(已修改)

2025-01-15 17:51 本頁面
 

【正文】 第六章 DNA重組的操作 基因工程 生命科學(xué)學(xué)院 外源 DNA 載體 DNA 重組分子 擴增或表達 表達 連接 轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo) 電穿孔或顯微注射 原核細胞 真核細胞 受體細胞 ? 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 限制酶 — 分子剪刀 限制酶 — 分子剪刀 連接酶 — 分子膠水 重組 DNA分子 粘性末端連接效率最高! 生命科學(xué)學(xué)院 黏性末端 黏性末端 粘性末端的連接 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 1. 粘性末端連接 創(chuàng)造互補粘性末端的方法有哪些? 同種酶 同尾酶 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 ( 1)兩端具有相同粘末端的 DNA分子之間的連接 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 堿性磷酸酶 :去掉其 5’末端的磷酸基,以防質(zhì)粒 DNA的自身環(huán)化 。 注意: 目的基因正反向插入; 載體與多個目的基因片段重組。 1 2 3 1 2 3 4 4 3 4 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 ( 2)兩端具有不同粘性末端的 DNA分子之間的連接 兩種不同的限制性內(nèi)切酶 兩端會產(chǎn)生非互補的突出端 定向重組體 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 HindIII EcoRI HindIII EcoRI 對載體酶切 HindIII EcoRI 對基因酶切 質(zhì)粒載體的定向重組 堿性磷酸酶? 避免了目的基因正反向插入 生命科學(xué)學(xué)院 2. 平頭末端連
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