基因工程練習(已修改)
2025-01-15 17:43 本頁面
【正文】 專題１ 基因工程 (一 ) 1．基因工程的誕生。 2．基因工程的原理及技術。 3． DNA的粗提取與鑒定。 課程標準 考點 一 基因工程的基本工具 一、與 DNA分子相關的 酶 種類 項目 限制酶 DNA連 接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 DNA分子 DNA分子片段 脫氧核苷酸 DNA分子 作用部位 磷酸二酯鍵 磷酸二酯鍵 磷酸二酯鍵 堿基對間的氫鍵 作用結果 形成黏性末端或平末端 形成重組 DNA分子 形成新的 DNA分子 形成單鏈DNA分子 二、載體 1．作用 (1)作為運載工具，將目的基因轉移到宿主細胞內。 (2)利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量復制。 2．具備的條件 (1)能在宿主細胞內穩(wěn)定保存并大量復制。 (2)有多個限制酶切割位點，以便與外源基因連接。 (3)具有某些遺傳標記基因，以便進行篩選。 3．種類 (1)質粒：一種裸露的、結構簡單、獨立于細菌擬核 DNA之外，能夠自我復制的很小的雙鏈環(huán)狀 DNA分子。 (2)λ 噬菌體的衍生物。 (3)動植物病毒。 【 案例 1】 (2023 福建理綜 )轉基因抗病香蕉的培育過程 如圖所示。質粒上有 PstⅠ 、 SmaⅠ 、 EcoRⅠ 、 ApaⅠ 等四種限制酶切割位點。請回答： (1)構建含抗病基因的表達載體 A時，應選用限制酶 _____，對 ____________進行切割。 (2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使基因表達載體 A中含有 _______ _____，作為標記基因。 Pst Ⅰ EcoR Ⅰ 含抗病基因的 DNA、質粒 (3)香蕉組織細胞具有 ________，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術將導入抗病基因的香蕉組織細胞培育成植株。圖中 ①② 依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的 _________________。 全能性 脫分化、再分化 【 即時鞏固 1】 (2023 江蘇 )下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖 圖 2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題： 限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 識別序列及 切割位點 G↓ GATC C C CTAG↑ G A↓ AGCT T T TCGA↑ A G↓ AATT C C TTAA↑G CCC↓ GGG GGG↑ CCC (1)一個圖 1所示的質粒分子經(jīng) SmaⅠ 切割前后，分別含有________個游離的磷酸基團。 (2)若對圖中質粒進行改造，插入的 SmaⅠ 酶切位點越多，質粒的熱穩(wěn)定性越 ________。 (3)用圖中的質粒和外源 DNA構建重組質粒，不能使用 SmaⅠ切割，原因是 ______________________________________。 (4)與只使用 EcoRⅠ 相比較，使用 BamHⅠ 和 HindⅢ 兩種限制酶同時處理質粒、外源 DNA的優(yōu)點在于可以防止 ______________。 0、 2 高 SmaⅠ 會破壞質粒的抗性基因、外源 DNA中的目的基因 質粒和含目的基因的外源 DNA片段自身環(huán)化 (5)為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入 ________酶。 (6)重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了 __________。 (7)為了從 cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉運蛋白基因，將重組質粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在 ______的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。 DNA連接 鑒別和篩選含有目的基因的細胞 蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質 考點二 基因工程基本操作程序分析 一、目的基因的獲取途徑 1．直接分離：從自然界已有的物種中分離，如從基因組文庫中獲取。 2．人工合成目的基因 常用的方法有： (1)已知核苷酸序列的較小基因，直接利用 DNA合成儀用化
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1