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菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)(已修改)

2025-05-14 13:33 本頁面
 

【正文】 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) 決定發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)水平三要素: 生產(chǎn)菌種性能 ; 發(fā)酵過程的工藝及設(shè)備; 產(chǎn)物提取過程的工藝及設(shè)備 菌種來源 ? 誘變育種 : 誘變是工業(yè)發(fā)酵穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要保證; ? 從自然界分離 : 目前土壤中已分離的微生物約為自然界總數(shù)的 15%,微生物的多樣性仍然是以后若干年的研究重點(diǎn); ? 基因重組 : 基因定向改造技術(shù)大大加快了生物產(chǎn)品開 發(fā)的進(jìn)程。 一、工業(yè)微生物 分離思路 ? 新菌種的分離是要從混雜的各類微生物中依照生產(chǎn)的要求 、 菌種的特性 , 采用各種篩選方法, 快速 、 準(zhǔn)確地把所需要的菌種挑選出來 。 ? 實(shí)驗(yàn)室或生產(chǎn)用菌種若不慎污染了雜菌 , 也必須重新進(jìn)行分離純化 。 從自然界中分離菌種的一般過程 新種分離與篩選的步驟 ? 定方案: 首先要查閱資料 , 了解所需菌種的生長培養(yǎng)特性 。 ? 采樣: 有針對(duì)性地采集樣品 。 ? 增殖: 人為地通過控制養(yǎng)分或培養(yǎng)條件 , 使所需菌種增殖培養(yǎng)后 , 在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì) 。 ? 分離: 利用分離技術(shù)得到純種 。 ? 發(fā)酵性能測(cè)定: 進(jìn)行生產(chǎn)性能測(cè)定 。 這些特性包括 形態(tài) 、 培養(yǎng)特征 、 營養(yǎng)要求 、 生理生化特性 、 發(fā)酵周期 、 產(chǎn)品品種和產(chǎn)量 、 耐受最高溫度 、 生長和發(fā)酵最適溫度 、 最適 pH值 、 提取工藝 等 。 采樣 采樣對(duì)象 以采集土壤為主 。 一般園田土和耕作過的沼澤土中 , 以 細(xì)菌和放線菌 為主;富含碳水化合物的土壤 ( 如一些野果生長區(qū)和果園內(nèi)) 和沼澤地中 , 酵母和霉菌 較多;采樣的對(duì)象也可以是植物或動(dòng)植物殘?bào)w , 腐敗物品 ,霉菌 較多;某些水域 厭氧菌 含量較多 。 ? 采樣季節(jié):以溫度適中 , 雨量不多的 秋初 為好。 ? 采土方式:在選好適當(dāng)?shù)攸c(diǎn)后 , 用小鏟子除去表土 , 取 離地面 515cm處的土 約 10g, 盛入清潔的牛皮紙袋或塑料袋中 , 扎好 , 標(biāo)記 , 記錄采樣時(shí)間 、 地點(diǎn) 、 環(huán)境條件等 , 以備查考 。 采好的樣應(yīng) 及時(shí)處理 , 暫不能處理的也應(yīng)貯存于 4℃ 下 , 但貯存時(shí)間不宜過長 。 增殖培養(yǎng) ? 就是給混合菌群提供一些有利于所需菌株生長或不利于其他菌型生長的條件 , 以促使目標(biāo)菌株大量繁殖 , 從而有利于分離它們 。 ? 例如碳源利用的控制 , 可選定糖 , 淀粉 、 纖維素 , 或者石油等 , 以其中的一種為唯一碳源 ,那么只有利用這一碳源的微生物才能大量正常生長 , 而其它微生物就可能死亡或淘汰 。 這樣對(duì)下階段的純種分離就會(huì)順利得多 。 純種分離 ? 盡管通過增殖培養(yǎng)效果顯著 , 但還是處于微生物的混雜生長狀態(tài) 。 因此還必須分離 , 純化 。 ? 純種分離的方法有劃線分離法 、 稀釋分離法 。 性能測(cè)定 ? 這一步是采用 與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件 ,通過三角瓶的容量進(jìn)行小型發(fā)酵試驗(yàn) , 以求得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種 。 ? 這種直接從自然界分離得到的菌株稱為 野生型菌株, 以區(qū)別于用人工育種方法得到的變異菌株 。 工業(yè)生產(chǎn)常用菌種 ?細(xì)菌 (Bacteria) ?放線菌 (Actinomycetes) ?單細(xì)胞真菌 酵母 (Yeast) ?多細(xì)胞真菌 霉菌 (Molds) 1 細(xì)菌 (Bacteria) ? 形狀和大小 :單細(xì)胞微生物; 有球型、桿型和螺旋型;典型直徑 ~ 1微米,長度~ 10微米; ? 繁殖方式 :裂殖,倍增時(shí)間 25~ 45分鐘。 ? 工業(yè)上重要的細(xì)菌 : G+:枯草芽孢桿菌、乳酸桿菌、北京棒桿菌等。 G: 醋酸桿菌、大腸桿菌。 ? 產(chǎn)品 :淀粉酶制劑,乳酸,乙酸,氨基酸等 2 放線菌 (Actinomycetes) ? 形狀和大?。?細(xì)胞呈長絲狀,菌落呈放線狀,介于細(xì)菌和真菌之間,菌絲直徑 ~ 米,與桿菌接近; ? 生長和繁殖: 低等的 (如諾卡氏菌 )通過菌絲斷裂繁殖; 高等的 (如鏈霉菌 )在孢子絲成熟后分化成許多孢子,孢子在適宜的環(huán)境中吸收水分,膨脹、萌發(fā),成為新的放線菌。 2 放線菌 (Actinomycetes) ? 工業(yè)上重要的放線菌 ? 龜裂鏈霉菌(土霉素) ? 金黃色鏈霉菌(金霉素) ? 灰色鏈霉素(鏈霉素) ? 紅鏈霉菌(紅霉素) ? 紅小單胞菌(慶大霉素) ? 委內(nèi)瑞拉鏈霉菌(氯霉素) ? 卡那鏈霉菌(卡那霉素) 3 單細(xì)胞真菌 酵母 (Yeast) ? 形狀和大
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