微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)練習(xí)題(學(xué)生)(已修改)
2025-04-19 03:30 本頁面
【正文】 微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)與應(yīng)用練習(xí)題一．解答題（共30小題）（一）微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1．如圖所示是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列．（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以 為唯一，鑒別培養(yǎng)基還需添加 作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成 色；（2）在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為11546178和191．該過程采取的接種方法是 ，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為 108個(gè)，與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較 ?。唬?）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼，終止密碼有UAG、UGA和UAA，突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為 ，突變基因表達(dá)的蛋白含 個(gè)氨基酸．2．牛奶中富含蛋白質(zhì)，長(zhǎng)期飲用有助于增強(qiáng)體質(zhì)，但牛奶同時(shí)也是多種疾病的傳播載體．國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30000個(gè)．以下是牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)．（1）圖中步驟①稱為 消毒法．步驟②是 ?。?）培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供 ?。M(jìn)行步驟③操作時(shí)，應(yīng)選用下列中的哪種工具？ ?。疄榱吮苊怆s菌污染，此步驟應(yīng)在 附近進(jìn)行．（3）將接種后的培養(yǎng)基和作為對(duì)照的 同時(shí)放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)36小時(shí)．取出后統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù)，結(jié)果如表所示．應(yīng)該選擇其中稀釋倍數(shù)為 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，經(jīng)過消毒后的牛奶中，細(xì)菌數(shù)大約是 /mL．牛奶稀釋倍數(shù)10﹣210﹣310﹣4平板1菌落數(shù)87101平板2菌落數(shù)83121平板3菌落數(shù)851003．人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營養(yǎng)價(jià)值，為了增加發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究，請(qǐng)回答下列問題：（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是 ?。ㄌ钚蛱?hào)）①酒精燈 ②培養(yǎng)皿 ③顯微鏡 ④無菌水（2）在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是 ?。?）向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是 ?。?）剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)，研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落（見圖1），圖中降解圈大小與纖維素酶的 有關(guān)，圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是 （填圖中序號(hào)）（5）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見圖2，推測(cè)菌株 更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是 4．回答下列關(guān)于微生物和酶的問題．高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性．研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示．（1）①過程稱為 ，②過程是為了 ?。?）Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基稱為﹣﹣ ?。ò垂δ芊郑?；該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分 ?。? A．瓊脂 B．葡萄糖 C．硝酸銨 D．碳酸氫鈉（3）一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了 ?。诟邷氐矸勖高\(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶的最佳溫度范圍進(jìn)行測(cè)定．圖中的曲線①表示酶在各種溫度下酶活性相對(duì)最高酶活性的百分比．將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線②．（4）根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是 ．A．40℃一50℃B．50℃一60℃C．60℃一70℃D．70℃﹣80℃（5）據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是 ?。瓵．該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性B．曲線②35℃數(shù)據(jù)點(diǎn)是在80℃時(shí)測(cè)得的C．曲線①表明80℃是該酶活性最高的溫度D．曲線②表明該酶的熱穩(wěn)定性在70℃之后急劇下降．5．多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲劑等生產(chǎn)過程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見的污染物之一．如圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲的菌株Q的主要步驟．請(qǐng)回答：（1）步驟①→③的培養(yǎng)過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能 ?。?）步驟④用平板劃線法純化菌株Q過程中，在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，原因是 ?。捎霉腆w平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)的目的是 ?。?）接種環(huán)通過灼燒來滅菌，完成步驟④中劃線操作，共需灼燒接種環(huán) 次（4）為了獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強(qiáng)的菌株，研究人員又對(duì)菌種Q進(jìn)行了誘變處理，得到突變株K．為了進(jìn)一步鑒定菌株K并比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，設(shè)計(jì)了下列實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)補(bǔ)全實(shí)驗(yàn)步驟：①取9只錐形瓶均分成三組，編號(hào)A、B、C②向A、B、C三組錐形瓶中加入 的培養(yǎng)液．③向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入 ．④28℃恒溫培養(yǎng)3天后，測(cè)定 ?。?．【生物﹣﹣選修1生物技術(shù)實(shí)踐專題】從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定．富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，使其群落的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法．（1）接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行 處理．在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)過程中，一定要注意在 條件下進(jìn)行．（2）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化．如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應(yīng)從 環(huán)境中采集．（3）從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制 培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的 ?。?）經(jīng)過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是 ，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生 來篩選纖維素分解菌．某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是 ?。?．某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)．實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)．請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題．（1）培養(yǎng)基中含有蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和 ．除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是 和 ．（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是 ?。?）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于 中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃．要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)
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