freepeople性欧美熟妇, 色戒完整版无删减158分钟hd, 无码精品国产vα在线观看DVD, 丰满少妇伦精品无码专区在线观看,艾栗栗与纹身男宾馆3p50分钟,国产AV片在线观看,黑人与美女高潮,18岁女RAPPERDISSSUBS,国产手机在机看影片

正文內(nèi)容

09級(jí)細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)(已修改)

2025-04-16 23:01 本頁(yè)面
 

【正文】 1細(xì)胞培養(yǎng)的概念?習(xí)慣上泛指所有的體外培養(yǎng),即器官培養(yǎng),組織培養(yǎng),和細(xì)胞培養(yǎng)的總稱。 在無(wú)菌條件下,從動(dòng)物(植物也可)或在人體中取出組織或細(xì)胞,置于模擬體內(nèi)的生理環(huán)境中(無(wú)菌,適當(dāng)?shù)臏囟群鸵欢ǖ臓I(yíng)養(yǎng)條件)使之生存和增殖生長(zhǎng)的技術(shù)方法。用于研究細(xì)胞、組織的代謝、增殖、分化、形態(tài)和功能變化,各種理化因子對(duì)活細(xì)胞的影響。2體外細(xì)胞的分化特點(diǎn)?細(xì)胞分化:在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中,子代細(xì)胞產(chǎn)生形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能差異的過(guò)程。(細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生化特征、生理功能為細(xì)胞分化的三項(xiàng)指標(biāo)),由于體外培養(yǎng)細(xì)胞失去了神經(jīng)、激素等體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間相互影響,經(jīng)多次傳代增殖,久之則發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象逐漸減弱或不顯,形態(tài)與功能趨于單一化,或傳一定代數(shù)后衰老死亡;發(fā)生轉(zhuǎn)化,獲不死性而成為能無(wú)限傳代的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。 3體外培養(yǎng)細(xì)胞的分型 ?并說(shuō)明各自的形態(tài)特點(diǎn)?分型:1 貼壁型細(xì)胞(上皮細(xì)胞型,成纖維細(xì)胞型,游走細(xì)胞型) 2懸浮型細(xì)胞. :僅形態(tài)上似體內(nèi)上皮細(xì)胞,實(shí)際上不完全等于體內(nèi)同名的細(xì)胞。來(lái)源:來(lái)源于外胚層,內(nèi)胚層細(xì)胞 如:皮膚及其衍生物 ;消化道,乳腺,肺泡 ;上皮性腫瘤形態(tài):類似體內(nèi)的上皮細(xì)胞。扁平,不規(guī)則多角形,中有圓形核。生長(zhǎng)特點(diǎn):易相連成片,相靠—緊密相連—成薄層—鋪路石狀。生長(zhǎng)時(shí)呈膜狀移動(dòng),很少脫離細(xì)胞群而單個(gè)活動(dòng)。:凡在培養(yǎng)中形態(tài)與成纖維細(xì)胞類似的細(xì)胞來(lái)源:由中胚層間質(zhì)組織起源的組織如:真正的成纖維細(xì)胞;心肌,平滑肌,成骨細(xì)胞形態(tài):似體內(nèi)成纖維細(xì)胞的形態(tài) 胞體梭形或不規(guī)則三角形胞質(zhì)向外伸出2—: 排列成放射狀,漩渦狀 并不緊靠連成片, 細(xì)胞—細(xì)胞接觸易斷開(kāi)而單獨(dú)行動(dòng),游離的單獨(dú)的成纖維樣細(xì)胞,(不定型):本型細(xì)胞在支持物上散在生長(zhǎng),一般不連成片。細(xì)胞質(zhì)經(jīng)常伸出偽足或突起,呈活躍的游走或變形運(yùn)動(dòng),.懸浮生長(zhǎng)型細(xì)胞概念::來(lái)自血,脾或骨髓,尤以血中白細(xì) 胞多見(jiàn),癌腫細(xì)胞也可能。特點(diǎn):在懸浮液中生長(zhǎng)良好、細(xì)胞圓形,單個(gè)或小細(xì)胞團(tuán)。優(yōu)點(diǎn):生存空間大,提供數(shù)量大, 傳代方便(不需消化) :觀察不方便 很多細(xì)胞不能懸浮生長(zhǎng)(尤以正常細(xì)胞)4那些培養(yǎng)條件改變時(shí),細(xì)胞形態(tài)可有變化?(見(jiàn)表一)組織和細(xì)胞供體年齡。培養(yǎng)條件。細(xì)胞的粘附。培養(yǎng)技術(shù)方法。促生長(zhǎng)因子。組織和細(xì)胞供體年齡:幼年個(gè)體比老年者易于培養(yǎng),所有動(dòng)物的胚胎組織都是最好的培養(yǎng)對(duì)象。來(lái)自同一個(gè)體的組織,分化低的比分化高的容易培養(yǎng)。培養(yǎng)條件:不同的細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基需求不同,當(dāng)前尚無(wú)一種培養(yǎng)基是萬(wàn)能的,應(yīng)選擇相應(yīng)的培養(yǎng)基。應(yīng)了解所培養(yǎng)細(xì)胞的生物學(xué)形狀和特殊需求成分。血清,Hela:高血清成纖維細(xì)胞樣低血清上皮樣細(xì)胞。pH,Hela:太酸或太堿,成纖維細(xì)胞樣;標(biāo)準(zhǔn)pH,上皮樣細(xì)胞。細(xì)胞密度 3T3:低密度,成纖維細(xì)胞樣,高密度,上皮樣細(xì)胞。生長(zhǎng)狀態(tài)改變:懸浮或貼附:懸浮時(shí)圓形 ,貼附成纖維或上皮樣。轉(zhuǎn)化與否:未轉(zhuǎn)化,成纖維樣,轉(zhuǎn)化后,可成上皮樣。 5簡(jiǎn)述每代貼附生長(zhǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程分哪幾期?游離期 : 細(xì)胞接種后在培養(yǎng)液中呈懸浮 狀態(tài).也稱懸浮期此時(shí)細(xì)胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形。貼壁期:細(xì)胞附著于底物上,游離期 結(jié)束。細(xì)胞株平均在10分鐘~4小時(shí)貼壁。潛伏期此時(shí)細(xì)胞有生長(zhǎng)話動(dòng),而無(wú)細(xì)胞分裂。細(xì)胞株潛伏期一般為6~24小時(shí)。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期:細(xì)胞數(shù)隨時(shí)間變化成倍增長(zhǎng),活力最佳,最適合進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。停止期(平臺(tái)期):細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶壁后,細(xì)胞雖有活力但不再分裂。機(jī)制:接觸抑制、密度依賴性。(接觸抑制:當(dāng)一個(gè)貼壁生長(zhǎng)的體外正常細(xì)胞生長(zhǎng)至與另一個(gè)細(xì)胞的表面相互接觸時(shí),便停止了分裂增殖,相互雖然緊密接觸,但不形成交叉重疊生長(zhǎng),也不進(jìn)入S期。密度抑制(density inhibition):細(xì)胞數(shù)量到一定數(shù)量后引起抑制增殖的現(xiàn)象。 6影響貼壁的因素和促進(jìn)細(xì)胞粘附措施有哪些?1因素:(1)各種細(xì)胞強(qiáng)弱: (附著最強(qiáng))巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞;上皮細(xì)胞、血細(xì)胞(最弱)。(2)生物因素:血清、培養(yǎng)液中的促附著因子。(3)機(jī)械,物理等因素(離心:促進(jìn)附著。流動(dòng):培養(yǎng)液流動(dòng)可阻止細(xì)胞附著。低溫:可抑制附著)2措施:(1)包被:對(duì)分化程度高、生長(zhǎng)能力差的細(xì)胞,可在培養(yǎng)瓶皿表面包被有利于細(xì)胞粘附和生長(zhǎng)的生物活性物質(zhì). 血清內(nèi)含有多種能夠促進(jìn)細(xì)胞粘附的成分,細(xì)胞本身也可能產(chǎn)生一些粘附分子。(2)減少接種時(shí)培養(yǎng)液的量:待細(xì)胞粘附和貼壁之后,再補(bǔ)充足夠的培養(yǎng)液。(3)減少培養(yǎng)液中血清的含量,使培養(yǎng)液黏度降低。(4)培養(yǎng)液中離子成分及其濃度。如,培養(yǎng)液中的Ca2+含量過(guò)低時(shí)不利于細(xì)胞的粘附、貼壁和鋪展。(5)培養(yǎng)液的溫度: 低溫會(huì)減低細(xì)胞的活動(dòng),妨礙黏附和貼壁 。7原代培養(yǎng)的概念:取自體內(nèi)新鮮組織并置于體外條件下生長(zhǎng)的細(xì)胞在傳代之前稱為原代培養(yǎng) 。原代培養(yǎng)與體內(nèi)原組織很相似,具異質(zhì)性,相互依存性強(qiáng),細(xì)胞克隆形成率低。此期一般持續(xù)1~4周。8簡(jiǎn)述體外培養(yǎng)細(xì)胞的分期?⑴原代培養(yǎng)期:取自體內(nèi)新鮮組織并置于體外條件下生長(zhǎng)的細(xì)胞在傳代之前稱為原代培養(yǎng) 原代培養(yǎng)與體內(nèi)原組織很相似,具異質(zhì)性,相互依存性強(qiáng),細(xì)胞克隆形成率低。此期一般持續(xù)1~4周。⑵傳代期:細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中生長(zhǎng)一定時(shí)間后,被分開(kāi)接種到新的培養(yǎng)器皿中(不論稀釋與否)。持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng),其特 點(diǎn)是細(xì)胞增殖旺盛,并能維持二倍體核型。⑶衰退期:此期細(xì)胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖,細(xì)胞形態(tài)輪廓增強(qiáng),最后衰退凋亡。9舉例說(shuō)明細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的制作方法?⑴計(jì)算細(xì)胞濃度2次,得出細(xì)胞濃度平均值。然后,將細(xì)胞懸液等量加入培養(yǎng)板的每個(gè)孔中,培養(yǎng)時(shí)間7天。⑵每隔24小時(shí)吸去3個(gè)孔的培養(yǎng)板,加入消化液,混懸細(xì)胞,計(jì)算細(xì)胞數(shù)目。每個(gè)孔計(jì)數(shù)2次,得出細(xì)胞濃度平均值。⑶繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,橫坐標(biāo)為培養(yǎng)時(shí)間,縱坐標(biāo)為細(xì)胞濃度。10. 體外培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的條件(1) 細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需要:氨基酸、單糖、維生素、無(wú)機(jī)離 子、微量元素、激素、生長(zhǎng)因子等。(2) 細(xì)胞的生存環(huán)境:溫度: 37 ℃、O2 、CO2: 5% CO2 +H2O ← →H2CO3 ← →H+ + HCOpH: 、滲透壓。(3) 無(wú)污染。 (4) 無(wú)毒11. 選擇血清需注意事項(xiàng)有哪些?注意事項(xiàng):①血清質(zhì)量好壞是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。②常用血清有胎牛血清(剖腹產(chǎn))、新生牛血清(小于24h)、小牛血清(10~30D)、兔血清、馬血清等,其中以胎牛血清質(zhì)量最好。③優(yōu)質(zhì)血清的標(biāo)準(zhǔn):透明,淡黃色,無(wú)沉淀物,無(wú)細(xì)菌、支原體、病毒污染。④血清的滅活(消除補(bǔ)體活性):56 ℃ ,30 分鐘。⑤血清的消毒:過(guò)濾除菌⑥一般說(shuō)來(lái).含5%小牛血清的培養(yǎng)基對(duì)大多數(shù)細(xì)胞可以維持細(xì)胞不死.但支持細(xì)胞生長(zhǎng)一般
點(diǎn)擊復(fù)制文檔內(nèi)容
化學(xué)相關(guān)推薦
文庫(kù)吧 www.dybbs8.com
公安備案圖鄂ICP備17016276號(hào)-1