固定化酶ppt課件(已修改)
2025-01-17 09:06 本頁面
【正文】 固定化酶 深圳大學(xué) 吳海強 生物催化劑 細胞 酶 非生長 生長 可溶 固定化 懸浮 固定化 連續(xù) 間歇 吸附 包埋 交聯(lián) 化學(xué)連續(xù) 材料 膜固定 酶液 凝膠 吸附 化學(xué)連接物 固定化 再循環(huán)系統(tǒng) 凝膠 吸附 連續(xù) 半連續(xù) 分批 間歇 連續(xù) 活塞模式 攪拌連續(xù)反應(yīng)器 間歇 連續(xù) 活塞模式 攪拌連續(xù)反應(yīng)器 一、概述 生物催化劑作用方式示意 固定化酶的發(fā)展史 什么是固定化酶？ 水溶性酶 水不溶性載體 酶自身載體 水不溶性酶 （固定化酶） 固定化技術(shù) 化學(xué)偶聯(lián) 酶 固定化 間歇 可溶 交聯(lián) 包埋 吸附 間歇 連續(xù) 酶的固定化技術(shù)和固定化酶 固定化酶的優(yōu)缺點 ? 可重復(fù)使用 ? 可以裝塔連續(xù)反應(yīng) ? 優(yōu)點： 純化簡單，易與產(chǎn)物分離 ? 提高產(chǎn)物質(zhì)量 ? 應(yīng)用范圍廣 ? 固定化過程中酶易失活 ? 缺點： 首次投入成本高 ? 大分子底物較困難 二、固定化酶的性質(zhì)及其影響因素 （一）固定化酶的性質(zhì) （二）固定化酶性質(zhì)改變的原因 （三）評價固定化酶的指標(biāo) （四）固定化酶的活力測定方法 （一） 固定化酶的性質(zhì) ? 1． 固定化對酶活性的影響： 酶活性 下降 ，反應(yīng)速度 下降。 ? 原因： 酶結(jié)構(gòu)的變化 空間位阻 2． 固定化對酶穩(wěn)定性的影響 ? （ 1） 操作穩(wěn)定性 提高； ? （ 2） 貯存穩(wěn)定性比游離酶大多數(shù)提高； ? （ 3） 對熱穩(wěn)定性，大多數(shù)升高，有些反而降低； ? （ 4） 對分解酶的穩(wěn)定性提高； ? （ 5） 對變性劑的耐受力升高。 固定化酶穩(wěn)定性提高的原因： ? a. 固定化后酶分子與載體多點連接。 ? ，提高了酶穩(wěn)定性。 ? 。 3． 最適 pH的變化 pH對酶活性的影響： ?（ 1） 改變酶的空間構(gòu)象 ?（ 2）影響酶的催化基團的解離 ?（ 3）影響酶的結(jié)合基團的解離 ?（ 4）改變底物的解離狀態(tài)，酶與底物不能結(jié)合或結(jié)合后不能生成產(chǎn)物。 載體對固定化酶體系 pH的影響 ? 載體帶負電荷， pH向堿性方向移動。 微環(huán)境 是指在固定化酶附近的局部環(huán)境，而把主體溶液稱為 宏觀環(huán)境。 ?載體帶正電荷， pH向酸性方向移動。 產(chǎn)物性質(zhì)對固定化酶體系 pH的影響 ? 催化反應(yīng)的產(chǎn)物為酸性時，固定化酶的 pH值比游離酶的 pH值高；反之則低 4． 最適溫度變化 ? 一般與游離酶差不多，但有些會有較明顯的變化。 5． 底物特異性變化 ? 作用于低分子底物的酶特異性沒有明顯變化 ? 既可作用于低分子底物又可作用于大分子低物的酶 特異性往往會變化。 6．米氏常數(shù) Km的變化 Km值隨載體性質(zhì)的變化而變化 ? 載體與底物帶相同電荷，靜電排斥，固定化酶降低了酶的親和力， Km’Km 。 ? 載體與底物電荷相反，靜電吸引，固定化酶增加了酶的親和力， Km‘Km 。 （二） 固定化酶性質(zhì)改變的原因 1．
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