酶免疫技術(shù)ppt課件(已修改)
2025-01-17 20:11 本頁面
【正文】 第九章 酶免疫技術(shù) 第一節(jié) 酶免疫技術(shù)的特點 一、酶和酶作用底物 二、酶標記抗體或抗原 三、固相載體 第二節(jié)酶免疫技術(shù)的分類 一、均相酶免疫測定 二、非均相酶免疫測定 第三節(jié) 酶聯(lián)免疫吸附試驗 一、基本原理 二、方法類型及反應(yīng)原理 思考題 小結(jié) 放射免疫技術(shù) 發(fā)光免疫技術(shù) 酶免疫技術(shù) 三大經(jīng)典標記技術(shù) 三大經(jīng)典標記技術(shù) 第一節(jié) 酶免疫技術(shù)的特點 ? 主要試劑 : 酶標記的抗體或抗原 ? 酶標物特點： 免疫學活性 酶對底物的催化活性 抗原抗體反應(yīng)的特異性 + 酶高效催化反應(yīng)的專一性 原理及特點 特點： ?靈敏度高、特異性強、準確性好 ?酶標記試劑能夠較長時間保持穩(wěn)定 ?操作簡便、對環(huán)境沒有污染。 ?易與其它技術(shù)偶聯(lián) 衍生出適用范圍更廣的新方法 。 原理： ?酶標抗體（抗原）與抗原（抗體）的特異性反應(yīng) ?酶對底物的顯色反應(yīng) ?對抗原或抗體進行定位、定性或定量的測定分析 原理及特點 標記酶的要求： 活性高 性質(zhì)穩(wěn)定 專一性強 酶催化底物的顯色信號易于判斷和測量 方法敏感，重復(fù)性好，簡單易行 酶的底物易于配制保存，酶及底物價廉 一、酶和酶作用底物 辣根過氧化物酶（ HRP） 糖蛋白（主酶） 亞鐵血紅素（輔基） 主酶與酶活性無關(guān) 輔基是酶的活性中心 純度用 RZ(純度數(shù) )值：403nm （輔基） 與 275nm（主酶） OD(吸光度 )值之比 RZ值與酶活性無關(guān)，酶活性單位 U比 RZ值更為重要 ELISA中應(yīng)用最為廣泛的標記用酶 常用酶 酶和酶作用底物 優(yōu)點 ? 容易提取 ? 價格低廉 ? 性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱，與抗原抗體偶聯(lián)后活性很少損失 堿性磷酸酶（ AP） 菌源性 AP 腸粘膜 AP β –半乳糖苷酶（ β Gal） 用于均相酶 免
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