實(shí)驗(yàn)一還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)、dnarna鑒定(已修改)
2025-05-31 01:43 本頁面
【正文】 實(shí)驗(yàn)一 生物組中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)、 DNA、 RNA的鑒定 一、實(shí)驗(yàn)原理 生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多，有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內(nèi)都含有游離的具還原性的半縮醛羥基，因此叫做還原糖；蔗糖分子內(nèi)沒有，為非還原糖。實(shí)驗(yàn)中所用的本尼迪特試劑，只能鑒定生物組織中可溶性還原糖，而不能鑒定可溶性非還原糖及不能溶解的糖。葡萄糖溶液在加入 本尼迪特試劑 ，在加熱條件下被還原為紅黃色的 Cu2O沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式為 : CHO+Cu(OH)2 COOH+Cu2O↓ 紅黃色 蘇丹 Ⅲ( 蘇丹 Ⅳ) 為一種脂肪染色劑(易溶解于酒精，不溶解于水 )。蘇丹 Ⅲ染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為橘黃色，蘇丹Ⅳ 染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為紅色。其反應(yīng)式為 : 脂肪 蘇丹 Ⅲ （蘇丹 Ⅳ ） 橙黃色 （ 紅色 ） 將尿素加熱，兩分子尿素放出一分子氨而縮合成雙縮脲。反應(yīng)式為 : 雙縮脲在堿性環(huán)境中能和硫酸銅結(jié)合成紅紫色的絡(luò)化物。蛋白質(zhì)分子中含有的肽鍵結(jié)構(gòu)與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)： CO – NH （類似雙縮尿 H2NOC NH CONH2結(jié)構(gòu)）堿性條件下與 Cu2+作用形成 紫色絡(luò)合物 ——雙縮尿反應(yīng) 選材：含糖量較高的 白色或近于白色 ，蘋果、梨最好 。 二、實(shí)驗(yàn)步驟與現(xiàn)象 制備組織樣液： 制漿：去皮、切塊、研磨 過濾：（用單層紗布） 取液： （２ mL） 顯色反應(yīng) 現(xiàn)象： 取材：花生種子（浸泡３ ~４ h），去皮，將子葉削成薄片 制片： 選取最薄的薄片移至載玻片中央 在薄片上滴加蘇丹 Ⅲ 染液 2~3滴，染色２ ~
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