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實驗蛋白質(zhì)的等電點測定和沉淀反應(已修改)

2025-05-29 01:13 本頁面
 

【正文】 實驗一、蛋白質(zhì)等電點測定及沉淀反應 一、實驗目的 了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì) 學習測定蛋白質(zhì)等電點的一種方法 加深對蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定因素的認識 了解沉淀蛋白質(zhì)的幾種方法及其實用意義 了解蛋白質(zhì)變性與沉淀的關系 二、實驗原理 ? 蛋白質(zhì)是 兩性電解質(zhì) 。在蛋白質(zhì)溶液中存在下列平衡: ? 蛋白質(zhì)分子的解離狀態(tài)和解離程度受 溶液的酸堿度 影響。 ? 當溶液的 pH為一定值時,蛋白質(zhì)極性基團解離的正負離子數(shù)相等,凈電荷為 0,此溶液的 pH值為該 蛋白質(zhì)的等電點 。 ? 不同蛋白質(zhì)具有各自特定的等電點,與該蛋白質(zhì)的組成結(jié)構(gòu)有關。 ? 在等電點時,蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)都有變化,可利用性質(zhì)的變化測定各種蛋白質(zhì)的等電點。 ? 常用方法 :測其溶解度最低時的溶液 pH值。 問題:蛋白質(zhì)等電點的測定還有哪些方法 ? ? 本實驗通過 觀察不同 pH溶液中酪蛋白的溶解度來測定其等電點 。 ? 用醋酸與醋酸鈉(醋酸鈉混合在酪蛋白溶液中)配制各種不同 pH值的緩沖液。向各緩沖溶液中加入酪蛋白后, 沉淀出現(xiàn)最多的緩沖液的 pH值即為酪蛋白的等電點 。 ? 在水溶液中,蛋白質(zhì)分子由于表面生成 水化層 和 雙電層 而成為穩(wěn)定的親水膠體。 ? 在一定的理化因素影響下,蛋白質(zhì)顆??梢?失去電荷和脫水 而沉淀。 ? 蛋白質(zhì)的沉淀反應可分為兩類 。
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