20xx年醫(yī)學專題—免疫細胞的分離與檢測-文庫吧
2025-10-21 23:07 本頁面
【正文】 o)。浮懸在分層界面而不形成E花環(huán)的群則富含B細胞，而沉降在管底的形成E花環(huán)的細胞用低滲法處理，使圍繞細胞周圍的綿羊紅細胞快速裂解，則獲得純的T細胞。 可溶性MHC肽四聚體法：mhc肽四聚體復合物的原理是通過增強t細胞受體與mhc肽復合物親和力，達到可直接特異性檢測t細胞的目的。 作為臨床診斷工具，定量檢測外周血及組織中抗原特異性CTLs的比率，并進行表型及功能分析。 用于過繼性腫瘤免疫治療 用于疫苗療效的監(jiān)測,第十七頁，共七十五頁。,抗原(k224。ngyu225。n)肽MHC分子四聚體技術,第十八頁，共七十五頁。,MHC I類(左)和Ⅱ類(右)分子(fēnzǐ)四聚體結構示意圖,第十九頁，共七十五頁。,三、細胞(x236。bāo)的凍存與復蘇,細胞凍存的原理與方法：在不加任何條件下直接凍存細胞時，細胞內和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，引起細胞死亡。向培養(yǎng)液加入保護劑，可使冰點降低。在緩慢的凍結條件下，能使細胞內水份在凍結前透出細胞。貯存(zh249。cn)在130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。 細胞復蘇的原理與方法：細胞復蘇時速度要快，使之迅速通過細胞最易受損的－5～0℃，細胞仍能生長，活力受損不大。 目前常用的保護劑為二甲亞砜（DMSO）和甘油，它們對細胞無毒性，分子量小，溶解度大，易穿透細胞。,第二十頁，共七十五頁。,細胞(x236。bāo)凍存罐,第二十一頁，共七十五頁。,第二節(jié) 免疫細胞膜分子(fēnzǐ)的檢測,一、免疫細胞膜分子(fēnzǐ)檢測的原理與類型 二、免疫細胞膜分子的檢測方法,第二十二頁，共七十五頁。,一、免疫細胞膜分子檢測(jiǎn c232。)的原理與類型,以抗體識別(sh237。bi233。)抗原 以配體識別受體,第二十三頁，共七十五頁。,二、免疫(miǎny236。)細胞膜分子的主要檢測方法,免疫標記檢測(jiǎn c232。)方法 熒光抗體法 酶免疫檢測法 免疫金銀染色法 補體依賴的細胞毒試驗（CDC） 花環(huán)形成試驗,第二十四頁，共七十五頁。,SmIg的熒光(y237。ngguāng)抗體檢測法,第二十五頁，共七十五頁。,SmIg的酶免疫檢測法,,,,,第二十六頁，共七十五頁。,,,補體(bǔtǐ)依賴的細胞毒試驗（CDC）,染料(rǎnli224。o),補體(bǔtǐ),第二十七頁，共七十五頁。,E花環(huán)(huā hu225。n)：利用T細胞膜上的異種動物紅細胞受體,T細胞(x236。bāo),B細胞(x236。bāo),花環(huán)形成細胞,綿羊紅細胞,第二十八頁，共七十五頁。,第二十九頁，共七十五頁。,EA花環(huán)：B淋巴細胞表面有Fc受體，能與免疫球蛋白的Fc段結合(ji233。h233。)，因此用抗體致敏的紅細胞與B淋巴細胞混合，可見B淋巴細胞周圍粘附有紅細胞,第三十頁，共七十五頁。,EAC花環(huán)：B淋巴細胞表面有補體(bǔtǐ)受體，在抗體致敏的紅細胞中加入補體(bǔtǐ)，可形成紅細胞抗體補體復合物，再與B淋巴細胞混合，則可形成EAC玫瑰花環(huán)。,第三十一頁，共七十五頁。,第三節(jié) 免疫細胞(x236。bāo)功能測定,一、轉化、增殖試驗 二、細胞毒試驗 三、抗體形成試驗 四、細胞吞噬(tūnsh236。)與殺傷試驗,第三十二頁，共七十五頁。,淋巴細胞轉化試驗：刺激物分為非特異性（如植物血凝素、刀豆素A等）和特異性刺激因子（如抗原）；檢測方法為形態(tài)學檢測法和3HTdR摻入法及MTT法等。 混合淋巴細胞培養(yǎng)：混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)或稱混合淋巴細胞反應(MLR)常用于器官移植前的組織配型，以測定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。由于MLC中淋巴細胞接受同種異型抗原的刺激而發(fā)生活化、增殖，產生種類眾多的細胞因子，促進NK、LAK和CTL等殺傷細胞(x236。bāo)的分化，因此又是免疫調節(jié)研究中常用的實驗模型。,一、轉化(zhuǎnhu224。)、增殖試驗,第三十三頁，共七十五頁。,第三十四頁，共七十五頁。,放射性測定(c232。d236。ng),3HTdR,絲裂原（抗原(k224。n
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