20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—免疫細(xì)胞的分離與檢測(cè)-文庫(kù)吧
2024-11-04 23:07 本頁(yè)面
【正文】 o)。浮懸在分層界面而不形成E花環(huán)的群則富含B細(xì)胞，而沉降在管底的形成E花環(huán)的細(xì)胞用低滲法處理，使圍繞細(xì)胞周?chē)木d羊紅細(xì)胞快速裂解，則獲得純的T細(xì)胞。 可溶性MHC肽四聚體法：mhc肽四聚體復(fù)合物的原理是通過(guò)增強(qiáng)t細(xì)胞受體與mhc肽復(fù)合物親和力，達(dá)到可直接特異性檢測(cè)t細(xì)胞的目的。 作為臨床診斷工具，定量檢測(cè)外周血及組織中抗原特異性CTLs的比率，并進(jìn)行表型及功能分析。 用于過(guò)繼性腫瘤免疫治療 用于疫苗療效的監(jiān)測(cè),第十七頁(yè)，共七十五頁(yè)。,抗原(k224。ngyu225。n)肽MHC分子四聚體技術(shù),第十八頁(yè)，共七十五頁(yè)。,MHC I類(lèi)(左)和Ⅱ類(lèi)(右)分子(fēnzǐ)四聚體結(jié)構(gòu)示意圖,第十九頁(yè)，共七十五頁(yè)。,三、細(xì)胞(x236。bāo)的凍存與復(fù)蘇,細(xì)胞凍存的原理與方法：在不加任何條件下直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶，引起細(xì)胞死亡。向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑，可使冰點(diǎn)降低。在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞。貯存(zh249。cn)在130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。 細(xì)胞復(fù)蘇的原理與方法：細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)速度要快，使之迅速通過(guò)細(xì)胞最易受損的－5～0℃，細(xì)胞仍能生長(zhǎng)，活力受損不大。 目前常用的保護(hù)劑為二甲亞砜（DMSO）和甘油，它們對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性，分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞。,第二十頁(yè)，共七十五頁(yè)。,細(xì)胞(x236。bāo)凍存罐,第二十一頁(yè)，共七十五頁(yè)。,第二節(jié) 免疫細(xì)胞膜分子(fēnzǐ)的檢測(cè),一、免疫細(xì)胞膜分子(fēnzǐ)檢測(cè)的原理與類(lèi)型 二、免疫細(xì)胞膜分子的檢測(cè)方法,第二十二頁(yè)，共七十五頁(yè)。,一、免疫細(xì)胞膜分子檢測(cè)(jiǎn c232。)的原理與類(lèi)型,以抗體識(shí)別(sh237。bi233。)抗原 以配體識(shí)別受體,第二十三頁(yè)，共七十五頁(yè)。,二、免疫(miǎny236。)細(xì)胞膜分子的主要檢測(cè)方法,免疫標(biāo)記檢測(cè)(jiǎn c232。)方法 熒光抗體法 酶免疫檢測(cè)法 免疫金銀染色法 補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒試驗(yàn)（CDC） 花環(huán)形成試驗(yàn),第二十四頁(yè)，共七十五頁(yè)。,SmIg的熒光(y237。ngguāng)抗體檢測(cè)法,第二十五頁(yè)，共七十五頁(yè)。,SmIg的酶免疫檢測(cè)法,,,,,第二十六頁(yè)，共七十五頁(yè)。,,,補(bǔ)體(bǔtǐ)依賴(lài)的細(xì)胞毒試驗(yàn)（CDC）,染料(rǎnli224。o),補(bǔ)體(bǔtǐ),第二十七頁(yè)，共七十五頁(yè)。,E花環(huán)(huā hu225。n)：利用T細(xì)胞膜上的異種動(dòng)物紅細(xì)胞受體,T細(xì)胞(x236。bāo),B細(xì)胞(x236。bāo),花環(huán)形成細(xì)胞,綿羊紅細(xì)胞,第二十八頁(yè)，共七十五頁(yè)。,第二十九頁(yè)，共七十五頁(yè)。,EA花環(huán)：B淋巴細(xì)胞表面有Fc受體，能與免疫球蛋白的Fc段結(jié)合(ji233。h233。)，因此用抗體致敏的紅細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞混合，可見(jiàn)B淋巴細(xì)胞周?chē)掣接屑t細(xì)胞,第三十頁(yè)，共七十五頁(yè)。,EAC花環(huán)：B淋巴細(xì)胞表面有補(bǔ)體(bǔtǐ)受體，在抗體致敏的紅細(xì)胞中加入補(bǔ)體(bǔtǐ)，可形成紅細(xì)胞抗體補(bǔ)體復(fù)合物，再與B淋巴細(xì)胞混合，則可形成EAC玫瑰花環(huán)。,第三十一頁(yè)，共七十五頁(yè)。,第三節(jié) 免疫細(xì)胞(x236。bāo)功能測(cè)定,一、轉(zhuǎn)化、增殖試驗(yàn) 二、細(xì)胞毒試驗(yàn) 三、抗體形成試驗(yàn) 四、細(xì)胞吞噬(tūnsh236。)與殺傷試驗(yàn),第三十二頁(yè)，共七十五頁(yè)。,淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)：刺激物分為非特異性（如植物血凝素、刀豆素A等）和特異性刺激因子（如抗原）；檢測(cè)方法為形態(tài)學(xué)檢測(cè)法和3HTdR摻入法及MTT法等。 混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)：混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(MLC)或稱(chēng)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)常用于器官移植前的組織配型，以測(cè)定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。由于MLC中淋巴細(xì)胞接受同種異型抗原的刺激而發(fā)生活化、增殖，產(chǎn)生種類(lèi)眾多的細(xì)胞因子，促進(jìn)NK、LAK和CTL等殺傷細(xì)胞(x236。bāo)的分化，因此又是免疫調(diào)節(jié)研究中常用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?一、轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。)、增殖試驗(yàn),第三十三頁(yè)，共七十五頁(yè)。,第三十四頁(yè)，共七十五頁(yè)。,放射性測(cè)定(c232。d236。ng),3HTdR,絲裂原（抗原(k224。n
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