【正文】 就對(duì)大局部有機(jī)磷農(nóng)藥建立了氣相色譜分析方法，我國食品理化檢驗(yàn)國家標(biāo)準(zhǔn)方法也采用(cǎiy242。ng)了氣相色譜檢測(cè)有機(jī)磷殺蟲劑。隨著氣相色譜儀的普及，對(duì)可能存在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的樣品，如食品、果蔬、飼料、水產(chǎn)品、土壤、水體及血液、化裝品等都建立了氣相色譜分析方法。,第二十一頁，共一百零二頁。,(3) HPLC 對(duì)氣相色譜不能檢測(cè)的高沸點(diǎn)或熱不穩(wěn)定、易裂解變質(zhì)的有機(jī)磷農(nóng)藥可以采用HPLC法檢測(cè)。AOAC中有近半數(shù)的有機(jī)磷農(nóng)藥都建立了HPLC法，研究報(bào)道也較多。 當(dāng)使用GC或HPLC發(fā)現(xiàn)違規(guī)的農(nóng)藥殘留時(shí)，必須使用其它方法來確認(rèn)(qu232。r232。n)。 可以利用GC借助其在兩根或多根極性不同的柱子上的保存時(shí)間來確認(rèn)(qu232。r232。n)，也可以用GC/MS。,第二十二頁，共一百零二頁。,酶抑制法是利用有機(jī)磷殺蟲劑的毒理性質(zhì)建立的一種快速檢測(cè)方法。 由于有機(jī)磷能抑制乙酰膽堿酯酶的活性，使該酶分解乙酰膽堿的速度減慢或停止，再利用一些特定的顏色反響(fǎny236。ng)來反映被抑制程度，從而到達(dá)檢測(cè)目的。 操作簡(jiǎn)單、速度快，不需昂貴儀器，特別適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)以及大批量樣品的篩選。 靈敏度、重復(fù)性和回收率相對(duì)較差。 新方法：酶抑制生物芯片分析法。,第二十三頁，共一百零二頁。,茶葉中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定方法： 提取 稱取0.5g粉碎茶葉于試管中，參加2ml蒸餾水和無水硫酸鈉，在混勻器上混勻，參加2ml乙酸乙酯，混勻，離心(l237。xīn)，取上清液。殘?jiān)靡宜嵋阴ズ驼和椤?：1〕混合液再提取一次，合并兩次提取液，過活性炭小柱，用乙酸乙酯：正己烷〔1：1〕混合液洗脫，將洗脫液低溫濃縮至0.5ml，供氣相色譜分析。外標(biāo)法峰面積定量。,第二十四頁，共一百零二頁。,色譜條件(ti225。oji224。n) 色譜柱：HP1石英毛細(xì)管柱，氮磷檢測(cè)器，流動(dòng)相：氮?dú)?、氫氣和空氣?程序升溫：60℃〔保持0.5min〕，以10℃/min，至250℃〔保持3min〕。 進(jìn)樣口溫度：250℃。 檢測(cè)器溫度：300℃。 不分流進(jìn)樣：進(jìn)樣量1uL。,第二十五頁，共一百零二頁。,7.1.5 擬除蟲菊酯的殘留(c225。nli)分析,擬除蟲菊酯〔pyrethroids)是一類(yī l232。i)重要的殺蟲劑，具有高效、廣譜、低毒和生物降解等特性。 擬除蟲菊酯在化學(xué)結(jié)構(gòu)上具有共同的特點(diǎn)之一是分子結(jié)構(gòu)中含有數(shù)個(gè)不對(duì)稱碳原子，因而包含多個(gè)光學(xué)和立體異構(gòu)體。它們具有不同的生物活性，即殺蟲效果也不大相同。,第二十六頁，共一百零二頁。,擬除蟲菊酯的檢測(cè) 在植物樣品中擬除蟲菊酯的測(cè)定要點(diǎn)： 提取一般采用勻漿提取法，對(duì)于色素較深的樣品，可在勻漿時(shí)參加活性炭再進(jìn)行。也有用索氏提取器用乙醚(yǐ m237。)提取的報(bào)道。 提取溶劑多用丙酮。 凈化通常采取液液分配加柱層析法，層析柱填料多用氟羅里硅土和硅膠。 檢測(cè)儀器一般用氣相色譜帶電子捕獲檢測(cè)器，但也有用HPLC/UV的報(bào)道。 氣相色譜測(cè)定一般采用非極性至弱極性柱。,第二十七頁，共一百零二頁。,除蟲菊酯農(nóng)藥熱穩(wěn)定性較高，使用毛細(xì)管色譜柱在高溫區(qū)段〔250280℃〕有利于別離，雜質(zhì)(z225。zh236。)干擾較少，用ECD檢測(cè)靈敏度較高，可以滿足食品中擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定。 將有機(jī)氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥同時(shí)測(cè)定，在一般情況下，有機(jī)氯如BHC、DDT出峰在前，而擬除蟲菊酯出峰在后。,第二十八頁，共一百零二頁。,水果、蔬菜中擬除蟲菊酯殘留量測(cè)定 1.前處理 稱取約20g試樣，至于錐形瓶中，參加適量丙酮，振蕩40min，過濾。用丙酮洗滌殘?jiān)?，將濾液收集在100ml容量瓶中，并用丙酮定容。 吸取5ml提取液于具塞離心管中，參加20ml2％硫酸鈉溶液，用正己烷萃取兩次。合并萃取液，并通過無水硫酸鈉柱脫水并以少量正己烷洗滌柱。流出液合并后濃縮至1ml。在微型層析柱的下端填入少量脫脂棉，依次(yīc236。)裝入0.5cm高的無水硫酸鈉、1g硅膠和1cm高的無水硫酸鈉。用5ml正己烷預(yù)淋洗層析柱，棄去流出液。將濃縮液倒入柱內(nèi)，以二氯甲烷淋洗層析柱，收集洗脫液，濃縮至干，再以正己烷定容，供氣相色譜測(cè)定。,第二十九頁，共一百零二頁。,2. 色譜條件(ti225。oji224。n) 色譜柱：HP5MS石英毛細(xì)管柱 氮?dú)猓?ml/min 柱溫：60℃〔保持0.5min〕，以10℃/min，至280℃〔保持20min〕 進(jìn)樣口溫度：260℃ 檢測(cè)器ECD溫度：280℃ 進(jìn)樣方式：不分流,第三十頁，共一百零二頁。,7.1.6 多種類(zhǒngl232。i)農(nóng)藥殘留量測(cè)定方法,目前國際上通常是使用一個(gè)(yī ɡ232。)前處理方法，用不同的儀器系列測(cè)定，同時(shí)測(cè)定多達(dá)上百種的農(nóng)藥，特別是GC/MS方法的使用使得在色譜上難以別離的化合物用選擇離子的方式進(jìn)行分別測(cè)定，可在一次進(jìn)樣中測(cè)定200多種農(nóng)藥。 例：茶葉中多雜環(huán)類農(nóng)藥殘留測(cè)定 用GC/ECD檢測(cè)疑心含有的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，再以GC/MSMS進(jìn)行確認(rèn)及定量分析。,第三十一頁，共一百零二頁。,水果(shuǐguǒ)、蔬菜和牛奶中農(nóng)藥殘留的氣質(zhì)聯(lián)機(jī)分析 1.提取 取50g切碎的樣品〔或牛奶〕于搗碎器中，參加100ml乙腈－乙醇〔95：5〕混合液，搗碎5min。參加15g氯化鈉，繼續(xù)搗碎5min。轉(zhuǎn)移40ml上層有機(jī)相于200ml離心瓶中，參加15g無水硫酸鈉充分振蕩，高速離心5min。定量移取30m至濃縮管中，通N2在35℃下濃縮至5ml。在固相萃取柱中加2cm無水硫酸鈉，用5ml甲苯淋洗。將75ml淋洗液儲(chǔ)藏管、EnviCarb固相萃取柱、SAX固相萃取柱和PSA固相萃取柱從上至下，按順序相連，用乙腈甲苯〔3：1〕預(yù)淋。將濃縮液轉(zhuǎn)到儲(chǔ)藏管中，通氮?dú)鈱悠吠迫隕nviCarb柱中。每次用10ml乙腈甲苯〔3：1〕淋洗，共淋洗4次，收集淋洗液于濃縮瓶中，并濃縮至1ml。參加約10ml丙酮再濃縮至2ml。,第三十二頁，共一百零二頁。,2. 儀器條件 GC/MSMS條件 離子阱溫度(wēnd249。)200℃ 進(jìn)樣口溫度：升溫程序?yàn)槌跏紲囟?3℃，初始時(shí)間0.3min，升溫速率300℃/min，最終溫度250℃。 柱壓：10psi〔1psi＝6894.76Pa〕 分流閥：初始條件，翻開；0.45min，關(guān)閉；2min，翻開；流比：100 進(jìn)樣量：5ul GC條件 初始溫度55℃，保持2min，以10℃/min升至230℃，保持10min，以20℃/min升至275℃，保持19min。,第三十三頁，共一百零二頁。,7.2 獸藥,在食用動(dòng)物飼養(yǎng)過程中廣泛使用藥物，會(huì)造成藥物殘留在可食用產(chǎn)品中。動(dòng)物性食品的藥物殘留會(huì)對(duì)人類健康產(chǎn)生影響。 獸藥的檢測(cè)方法包括：篩查，檢測(cè)和確認(rèn)。 篩查方法是就某種基質(zhì)中一定濃度的某種藥物做出陽性或陰性反響的試驗(yàn)方法：微生物抑制試驗(yàn)〔用于對(duì)大批量樣品進(jìn)行抗生素篩查〕、放射和酶免疫(miǎny236。)快速測(cè)試盒〔對(duì)指定藥物的篩查〕。只能分類，不能確認(rèn)是某種具體的化合物。 如果樣品中確實(shí)存在違規(guī)的藥物殘留，就需要使用其它的分析方法來確認(rèn)：薄層色譜法、GC、HPLC、GC/MS和HPLC/MS。,第三十四頁，共一百零二頁。,7.2.1 β興奮劑的殘留(c225。nli)分析,β沖動(dòng)劑，在化學(xué)上屬苯乙醇胺，為兒茶酚胺、腎上腺素和去甲腎上腺素的化學(xué)類似物。一般可分為含取代(qǔd224。i)基的苯胺型〔如克倫特羅〕和苯酚型〔如沙丁胺醇〕兩大類。 它能與肌體絕大多數(shù)組織細(xì)胞膜上β受體發(fā)生作用。 某些合成的β沖動(dòng)劑，當(dāng)以高劑量飼養(yǎng)動(dòng)物時(shí)，會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從脂肪組織向肌肉組織的轉(zhuǎn)移，使畜禽瘦肉增加。由于這種用法造成的可是用組織中的藥物殘留在毒理學(xué)等方面的種種問題，致使許多國家禁止在使用動(dòng)物中使用該類藥物。,第三十五頁，共一百零二頁。,測(cè)定方法,檢測(cè)β興奮劑的樣品種類(zhǒngl232。i)很多，有飼料、尿、血漿、內(nèi)臟〔肝、腎〕、肌肉、毛發(fā)、視網(wǎng)膜等。其中最能積累β興奮劑的是內(nèi)臟、視網(wǎng)膜。所以，在上述樣品中，檢測(cè)是否違法使用β興奮劑作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑的適宜樣品是肝臟。另外，尿樣本前處理較簡(jiǎn)單，可實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)。,第三十六頁，共一百零二頁。,樣品的前處理 樣品的前處理包括樣品提取、酶解〔酸解〕、凈化，如果采用GC檢測(cè)，還增加衍生化步驟。 β興奮劑檢測(cè)進(jìn)行酸解、酶解的必要性：因?yàn)棣屡d奮劑在樣品中往往會(huì)與其它成分形成結(jié)合物，如在葡糖苷酸酶、硫酸(li