【正文】 就對大局部有機磷農(nóng)藥建立了氣相色譜分析方法，我國食品理化檢驗國家標準方法也采用(cǎiy242。ng)了氣相色譜檢測有機磷殺蟲劑。隨著氣相色譜儀的普及，對可能存在有機磷農(nóng)藥殘留的樣品，如食品、果蔬、飼料、水產(chǎn)品、土壤、水體及血液、化裝品等都建立了氣相色譜分析方法。,第二十一頁，共一百零二頁。,(3) HPLC 對氣相色譜不能檢測的高沸點或熱不穩(wěn)定、易裂解變質(zhì)的有機磷農(nóng)藥可以采用HPLC法檢測。AOAC中有近半數(shù)的有機磷農(nóng)藥都建立了HPLC法，研究報道也較多。 當使用GC或HPLC發(fā)現(xiàn)違規(guī)的農(nóng)藥殘留時，必須使用其它方法來確認(qu232。r232。n)。 可以利用GC借助其在兩根或多根極性不同的柱子上的保存時間來確認(qu232。r232。n)，也可以用GC/MS。,第二十二頁，共一百零二頁。,酶抑制法是利用有機磷殺蟲劑的毒理性質(zhì)建立的一種快速檢測方法。 由于有機磷能抑制乙酰膽堿酯酶的活性，使該酶分解乙酰膽堿的速度減慢或停止，再利用一些特定的顏色反響(fǎny236。ng)來反映被抑制程度，從而到達檢測目的。 操作簡單、速度快，不需昂貴儀器，特別適合現(xiàn)場檢測以及大批量樣品的篩選。 靈敏度、重復(fù)性和回收率相對較差。 新方法：酶抑制生物芯片分析法。,第二十三頁，共一百零二頁。,茶葉中多種有機磷農(nóng)藥殘留量測定方法： 提取 稱取0.5g粉碎茶葉于試管中，參加2ml蒸餾水和無水硫酸鈉，在混勻器上混勻，參加2ml乙酸乙酯，混勻，離心(l237。xīn)，取上清液。殘渣用乙酸乙酯和正己烷〔1：1〕混合液再提取一次，合并兩次提取液，過活性炭小柱，用乙酸乙酯：正己烷〔1：1〕混合液洗脫，將洗脫液低溫濃縮至0.5ml，供氣相色譜分析。外標法峰面積定量。,第二十四頁，共一百零二頁。,色譜條件(ti225。oji224。n) 色譜柱：HP1石英毛細管柱，氮磷檢測器，流動相：氮氣、氫氣和空氣。 程序升溫：60℃〔保持0.5min〕，以10℃/min，至250℃〔保持3min〕。 進樣口溫度：250℃。 檢測器溫度：300℃。 不分流進樣：進樣量1uL。,第二十五頁，共一百零二頁。,7.1.5 擬除蟲菊酯的殘留(c225。nli)分析,擬除蟲菊酯〔pyrethroids)是一類(yī l232。i)重要的殺蟲劑，具有高效、廣譜、低毒和生物降解等特性。 擬除蟲菊酯在化學(xué)結(jié)構(gòu)上具有共同的特點之一是分子結(jié)構(gòu)中含有數(shù)個不對稱碳原子，因而包含多個光學(xué)和立體異構(gòu)體。它們具有不同的生物活性，即殺蟲效果也不大相同。,第二十六頁，共一百零二頁。,擬除蟲菊酯的檢測 在植物樣品中擬除蟲菊酯的測定要點： 提取一般采用勻漿提取法，對于色素較深的樣品，可在勻漿時參加活性炭再進行。也有用索氏提取器用乙醚(yǐ m237。)提取的報道。 提取溶劑多用丙酮。 凈化通常采取液液分配加柱層析法，層析柱填料多用氟羅里硅土和硅膠。 檢測儀器一般用氣相色譜帶電子捕獲檢測器，但也有用HPLC/UV的報道。 氣相色譜測定一般采用非極性至弱極性柱。,第二十七頁，共一百零二頁。,除蟲菊酯農(nóng)藥熱穩(wěn)定性較高，使用毛細管色譜柱在高溫區(qū)段〔250280℃〕有利于別離，雜質(zhì)(z225。zh236。)干擾較少，用ECD檢測靈敏度較高，可以滿足食品中擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的測定。 將有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥同時測定，在一般情況下，有機氯如BHC、DDT出峰在前，而擬除蟲菊酯出峰在后。,第二十八頁，共一百零二頁。,水果、蔬菜中擬除蟲菊酯殘留量測定 1.前處理 稱取約20g試樣，至于錐形瓶中，參加適量丙酮，振蕩40min，過濾。用丙酮洗滌殘渣，將濾液收集在100ml容量瓶中，并用丙酮定容。 吸取5ml提取液于具塞離心管中，參加20ml2％硫酸鈉溶液，用正己烷萃取兩次。合并萃取液，并通過無水硫酸鈉柱脫水并以少量正己烷洗滌柱。流出液合并后濃縮至1ml。在微型層析柱的下端填入少量脫脂棉，依次(yīc236。)裝入0.5cm高的無水硫酸鈉、1g硅膠和1cm高的無水硫酸鈉。用5ml正己烷預(yù)淋洗層析柱，棄去流出液。將濃縮液倒入柱內(nèi)，以二氯甲烷淋洗層析柱，收集洗脫液，濃縮至干，再以正己烷定容，供氣相色譜測定。,第二十九頁，共一百零二頁。,2. 色譜條件(ti225。oji224。n) 色譜柱：HP5MS石英毛細管柱 氮氣：1ml/min 柱溫：60℃〔保持0.5min〕，以10℃/min，至280℃〔保持20min〕 進樣口溫度：260℃ 檢測器ECD溫度：280℃ 進樣方式：不分流,第三十頁，共一百零二頁。,7.1.6 多種類(zhǒngl232。i)農(nóng)藥殘留量測定方法,目前國際上通常是使用一個(yī ɡ232。)前處理方法，用不同的儀器系列測定，同時測定多達上百種的農(nóng)藥，特別是GC/MS方法的使用使得在色譜上難以別離的化合物用選擇離子的方式進行分別測定，可在一次進樣中測定200多種農(nóng)藥。 例：茶葉中多雜環(huán)類農(nóng)藥殘留測定 用GC/ECD檢測疑心含有的有機氯農(nóng)藥殘留，再以GC/MSMS進行確認及定量分析。,第三十一頁，共一百零二頁。,水果(shuǐguǒ)、蔬菜和牛奶中農(nóng)藥殘留的氣質(zhì)聯(lián)機分析 1.提取 取50g切碎的樣品〔或牛奶〕于搗碎器中，參加100ml乙腈－乙醇〔95：5〕混合液，搗碎5min。參加15g氯化鈉，繼續(xù)搗碎5min。轉(zhuǎn)移40ml上層有機相于200ml離心瓶中，參加15g無水硫酸鈉充分振蕩，高速離心5min。定量移取30m至濃縮管中，通N2在35℃下濃縮至5ml。在固相萃取柱中加2cm無水硫酸鈉，用5ml甲苯淋洗。將75ml淋洗液儲藏管、EnviCarb固相萃取柱、SAX固相萃取柱和PSA固相萃取柱從上至下，按順序相連，用乙腈甲苯〔3：1〕預(yù)淋。將濃縮液轉(zhuǎn)到儲藏管中，通氮氣將樣品推入EnviCarb柱中。每次用10ml乙腈甲苯〔3：1〕淋洗，共淋洗4次，收集淋洗液于濃縮瓶中，并濃縮至1ml。參加約10ml丙酮再濃縮至2ml。,第三十二頁，共一百零二頁。,2. 儀器條件 GC/MSMS條件 離子阱溫度(wēnd249。)200℃ 進樣口溫度：升溫程序為初始溫度53℃，初始時間0.3min，升溫速率300℃/min，最終溫度250℃。 柱壓：10psi〔1psi＝6894.76Pa〕 分流閥：初始條件，翻開；0.45min，關(guān)閉；2min，翻開；流比：100 進樣量：5ul GC條件 初始溫度55℃，保持2min，以10℃/min升至230℃，保持10min，以20℃/min升至275℃，保持19min。,第三十三頁，共一百零二頁。,7.2 獸藥,在食用動物飼養(yǎng)過程中廣泛使用藥物，會造成藥物殘留在可食用產(chǎn)品中。動物性食品的藥物殘留會對人類健康產(chǎn)生影響。 獸藥的檢測方法包括：篩查，檢測和確認。 篩查方法是就某種基質(zhì)中一定濃度的某種藥物做出陽性或陰性反響的試驗方法：微生物抑制試驗〔用于對大批量樣品進行抗生素篩查〕、放射和酶免疫(miǎny236。)快速測試盒〔對指定藥物的篩查〕。只能分類，不能確認是某種具體的化合物。 如果樣品中確實存在違規(guī)的藥物殘留，就需要使用其它的分析方法來確認：薄層色譜法、GC、HPLC、GC/MS和HPLC/MS。,第三十四頁，共一百零二頁。,7.2.1 β興奮劑的殘留(c225。nli)分析,β沖動劑，在化學(xué)上屬苯乙醇胺，為兒茶酚胺、腎上腺素和去甲腎上腺素的化學(xué)類似物。一般可分為含取代(qǔd224。i)基的苯胺型〔如克倫特羅〕和苯酚型〔如沙丁胺醇〕兩大類。 它能與肌體絕大多數(shù)組織細胞膜上β受體發(fā)生作用。 某些合成的β沖動劑，當以高劑量飼養(yǎng)動物時，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)從脂肪組織向肌肉組織的轉(zhuǎn)移，使畜禽瘦肉增加。由于這種用法造成的可是用組織中的藥物殘留在毒理學(xué)等方面的種種問題，致使許多國家禁止在使用動物中使用該類藥物。,第三十五頁，共一百零二頁。,測定方法,檢測β興奮劑的樣品種類(zhǒngl232。i)很多，有飼料、尿、血漿、內(nèi)臟〔肝、腎〕、肌肉、毛發(fā)、視網(wǎng)膜等。其中最能積累β興奮劑的是內(nèi)臟、視網(wǎng)膜。所以，在上述樣品中，檢測是否違法使用β興奮劑作為生長促進劑的適宜樣品是肝臟。另外，尿樣本前處理較簡單，可實現(xiàn)快速檢測。,第三十六頁，共一百零二頁。,樣品的前處理 樣品的前處理包括樣品提取、酶解〔酸解〕、凈化，如果采用GC檢測，還增加衍生化步驟。 β興奮劑檢測進行酸解、酶解的必要性：因為β興奮劑在樣品中往往會與其它成分形成結(jié)合物，如在葡糖苷酸酶、硫酸(li