葡聚糖凝膠測蛋白質(zhì)分子量-文庫吧
2024-10-31 05:37 本頁面
【正文】 Vi、外水體積V0 和凝膠本身的體積Vg 。內(nèi)水容積Vi是凝膠孔隙所占的體積，即凝膠顆粒內(nèi)部所含水相的體積，它可從干凝膠顆粒重量和吸水后的重量求得。外水體積V0指凝膠顆粒間的自由空間所占的體積，即存在于柱床內(nèi)凝膠顆粒外面空隙之間的水相體積。利用有顏色以便于觀察的蛋白質(zhì)，分子量約200萬的藍(lán)色葡聚糖2000通過實際(sh237。j236。)測量求出 。 當(dāng)樣品流經(jīng)凝膠柱時，大于孔隙的大分子完全不滲入到凝膠內(nèi)部，只需V0體積的洗脫液便可將其由一端洗脫到另一端；相反，如果樣品體積小于孔隙，那么需要V0＋Vi體積的洗脫液，才能將它們由一端洗脫到另一端。中等分子〔分子大小在上述兩種極限之間〕所需洗脫液體積介于兩者之間，Ve＝V0＋KdVi〔0Kd1〕， Kd為分配系數(shù)，它表示一種物質(zhì)在孔隙內(nèi)的滲透程度，相當(dāng)于這種物質(zhì)在孔隙內(nèi)所占體積和孔隙總體積的比值。,第五頁，共十頁。,對某一凝膠介質(zhì)，如果兩種分子全排出(p225。i chū)，即Kd都等于零，雖然分子大小有差異，但沒有別離效果。同樣兩種分子如都能進(jìn)入內(nèi)部空隙，即Kd都等于1，它們雖然分子大小有不同，但也沒有別離效果。因此不同型號的凝膠介質(zhì)，有它一定的使用范圍。 實際工作時，有時Kd＞1，表示凝膠對組分有吸附作用，此時Ve＞Vo
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