實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：黃酮提取(ppt31頁(yè))-文庫(kù)吧
2025-02-16 15:53 本頁(yè)面
【正文】 溫度 37℃ )，可適宜地生成二甲基亞硝胺。當(dāng)往樣品溶液中依次加入二甲胺與亞硝酸鈉時(shí)，樣品溶液優(yōu)先同亞硝酸鈉作用，使得二甲胺不能與亞硝酸鈉反應(yīng)，達(dá)到阻止亞硝胺生成的目的。據(jù)此可以通過(guò)比較相同條件下生成亞硝胺量的多少反映總黃酮阻斷能力的強(qiáng)弱，生成亞硝胺量少，總黃酮的阻斷能力就強(qiáng)，反之則弱。在紫外燈照射下，二甲基亞硝胺可分解成二甲基仲胺和亞硝酸根，亞硝酸根與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后，再與 1萘胺偶合生成紅色化合物，用分光光度計(jì)測(cè)出該化合物的吸光度，就可知道上述反應(yīng)液中亞硝胺含量多少。 三、儀器與試劑 ?（一）實(shí)驗(yàn)室提供下列儀器和試劑 ? 儀器： ?電子分析天平；粉碎機(jī)；數(shù)顯恒溫水浴鍋；三用紫外儀；真空泵；分光光度計(jì)；電熱套；比色管；常用玻璃儀器。 ? 試劑： ?木芙蓉花采自湖北師范學(xué)院校區(qū)；蘆丁（上海展云化工有限公司）；對(duì)氨基苯磺酸（分析純）；檸檬酸（分析純）；磷酸氫二鈉（分析純）；鹽酸萘乙二胺（分析純）；二甲胺（分析純）； 1萘胺（分析純）；鎢酸鈉（分析純）；鉬酸鈉（分析純）；沒(méi)食子酸（分析純）；（分析純）；乙醇（分析純）； A1(NO3)3（分析純）；鹽酸（分析純）；NaOH（分析純）；濃 H2SO4（分析純）；磷酸（分析純）。 三、儀器與試劑 ? （二）學(xué)生自配及標(biāo)定試劑 ? 乙醇溶液： 60 %、 80 %乙醇溶液。 ? 10% A1(NO3)3溶液。 ? 1 %三氯化鋁溶液。 ? 2％ FeCl3溶液。 ? 5 % NaNO2溶液。 ? 4 % NaOH 溶液； 1 % NaOH 溶液。 ? 5％的醋酸鉛溶液。 ? 1％ KMnO4溶液。 ? 10 % 、 % Na2CO3溶液。 ? 的檸檬酸 磷酸氫二鈉緩沖液 : mol/L磷酸氫二鈉與 mol/L檸檬酸混合即可。 ? 1 1 mmol/L 的二甲胺溶液。 ? 1 1% 、 %對(duì)氨基苯磺酸溶液。 ? 1 % 1萘胺溶液。 ? 1 % 鹽酸萘乙二胺溶液。 ? 1 % 對(duì)氨基苯磺酸溶液。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ?一、 樣品的處理及提取 ?1. 處理：新鮮木芙蓉花水洗后，于 60℃ 烘干，粉碎機(jī)粉碎，過(guò)篩備用。 ?2. 提?。壕芊Q(chēng)取干燥、粉碎的木芙蓉花粉末 g置于錐形瓶中，加入 60 %乙醇溶液30mL，于 60℃ 浸提 2 h，濾去殘?jiān)?，殘?jiān)礈?23次，定容至 100 mL，即得提取液。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ?二、樣品測(cè)定 ?1. 黃酮測(cè)定 ? 黃酮類(lèi)物質(zhì)的鑒定方法 ?(1)鹽酸一鎂粉反應(yīng)：取待測(cè)液 mL放在測(cè)試瓶中，加入少許鎂粉振搖，滴加幾滴濃鹽酸，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ?(2)氨水反應(yīng)：取待測(cè)液 mL放在測(cè)試瓶中，滴加幾滴氨水振搖，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ?(3)硝酸鋁反應(yīng)：取待測(cè)液 mL放在測(cè)試瓶中，滴加幾滴硝酸鋁振搖，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ?(4)三氯化鋁反應(yīng)：取待測(cè)液 mL放在測(cè)試瓶中，滴加幾滴 1 %三氯化鋁振搖，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ? (5)氯化鐵反應(yīng)：在試管中加 1 mL提取物，再加入 mL的 2％ FeCl3，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ? (6)濃硫酸反應(yīng) : 在樣品液中滴加少量濃 H2SO4溶液，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ? (7)堿性試劑顯色反應(yīng)在樣品液中加入 5 % NaNO2溶液 。 搖勻，旋轉(zhuǎn) 6 min 后，加入等體積 10% A1(NO3)3溶液， 6 min 后再加入 4 % NaOH 溶液，混勻，用 60 %乙醇稀釋?zhuān)^察反應(yīng)現(xiàn)象。 ? (8)與 5％的醋酸鉛反應(yīng)：在 5％的醋酸鉛溶液中滴加數(shù)滴提取物，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ? (9)與 1％高錳酸鉀溶液反應(yīng)：在試管中加 1． 0 mL 1％KMnO4，滴入 3～ 4滴提取物，觀察 KMnO4溶液是否褪色。 ? (10)與堿性試劑 (1％ NaOH)反應(yīng)：在 1 mL提取物中加入0． 5 mL的 1％ NaOH，觀察顏色變化。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 黃酮類(lèi)物質(zhì)定量測(cè)定 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備 ?精密稱(chēng)取蘆丁對(duì)照品 10 mg，置 50 mL量瓶中，加80%乙醇溶解至刻度，搖勻即得對(duì)照品溶液。分別精密吸取 mL， mL， mL，
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