實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：黃酮提取(ppt31頁(yè))-wenkub
2023-03-17 15:53:28 本頁(yè)面
【正文】 再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色化合物，用分光光度計(jì)測(cè)出該化合物的吸光度，就可知道反應(yīng)液中亞硝酸鈉含量多少。 《 本草綱目 》 言其“治一切大小癰疽，腫毒惡瘡，消腫，排膿，止痛”。木芙蓉（ Hibiscus mutabilis L.）為錦葵科植物，又名拒霜花、木蓮、醉芙蓉，為落葉灌木或小喬木。植物單寧是植物的次生代謝產(chǎn)物，屬于天然有機(jī)化合物。黃酮類化合物廣泛存在于天然產(chǎn)物中，大多具有明顯的抗炎、抗菌、生物抗氧化性、抗衰老、降血脂、治療心血管疾病等功能。黃酮苷一般易溶于水、乙醇、甲醇等極性強(qiáng)的溶劑中；但難溶于或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中。組成黃酮苷的糖類包括單糖、雙糖、三糖和?；?。植物中由苯丙氨酸產(chǎn)生的肉桂酰輔酶 A，經(jīng)碳鏈延長(zhǎng)環(huán)化生成的查耳酮，再衍生成的各種 α苯基衍生物。 ?2．掌握植物中有效成份的提取及其測(cè)定方法。 ?3．掌握抑制亞硝化反應(yīng)的操作與方法。 OOAB2 苯 基 色 原 酮二、實(shí)驗(yàn)原理與相關(guān)知識(shí) 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中常連接有酚羥基、甲氧基、甲基、異戊烯基等官能團(tuán)。黃酮苷固體為無(wú)定形粉末，其余黃酮類化合物多為結(jié)晶性固體。糖鏈越長(zhǎng)則水溶度越大。其中有些可用于心血管病的治療。常是植物及微生物中產(chǎn)生的酚類次生代謝產(chǎn)物。其花大色艷，花色一日三變，在寒涼的深秋傲霜怒放，觀賞價(jià)值極佳。木芙蓉花、葉中含有多酚、黃酮類化合物。據(jù)此可以通過(guò)測(cè)定相同條件下亞硝酸鈉含量的變化反映總黃酮清除能力的強(qiáng)弱，亞硝酸鈉含量少，總黃酮清除能力就強(qiáng)，反之則弱。在紫外燈照射下，二甲基亞硝胺可分解成二甲基仲胺和亞硝酸根，亞硝酸根與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后，再與 1萘胺偶合生成紅色化合物，用分光光度計(jì)測(cè)出該化合物的吸光度，就可知道上述反應(yīng)液中亞硝胺含量多少。 ? 10% A1(NO3)3溶液。 ? 4 % NaOH 溶液； 1 % NaOH 溶液。 ? 的檸檬酸 磷酸氫二鈉緩沖液 : mol/L磷酸氫二鈉與 mol/L檸檬酸混合即可。 ? 1 % 鹽酸萘乙二胺溶液。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ?二、樣品測(cè)定 ?1. 黃酮測(cè)定 ? 黃酮類物質(zhì)的鑒定方法 ?(1)鹽酸一鎂粉反應(yīng)：取待測(cè)液 mL放在測(cè)試瓶中，加入少許鎂粉振搖，滴加幾滴濃鹽酸，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ? (5)氯化鐵反應(yīng)：在試管中加 1 mL提取物，再加入 mL的 2％ FeCl3，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。 ? (8)與 5％的醋酸鉛反應(yīng)：在 5％的醋酸鉛溶液中滴加數(shù)滴提取物，觀察反應(yīng)現(xiàn)象。分別精密吸取 mL， mL， mL， mL和 mL置于 10mL比色管中，各加 80%乙醇至 5 mL，加 5% NaNO2溶液 mL，搖勻放置 6 min，再加 10 % A1(NO3)3。 四、 實(shí)驗(yàn)步驟 ? ? 福林酚（ FolinCiocalteu）試劑的配制 ?稱取 100 g鎢酸鈉和 25 g鉬酸鈉置于 2L的磨口圓底燒瓶中，用 700 mL蒸餾水溶解，再緩慢加入 50 mL 85 %的磷酸和 100 mL的濃鹽酸，充分混勻，放入數(shù)粒玻璃珠，連接回流冷凝裝置，文火回流10 h。然后分別精密吸取 0、 、 、 、 mL沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液定容于 50 mL容量瓶?jī)?nèi)，配成濃度為 056 mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) % 對(duì)氨基苯磺酸 mL，搖勻靜置 5 min，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) % 鹽酸萘乙二胺 mL，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻靜置 15 min。用移液管吸取 上述溶液加到 7 cm2 培養(yǎng)皿中，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) % Na2CO3 溶液 mL，于紫外分析儀 (254nm 波長(zhǎng) )上輻照 15 min。 ? (2)氨水反應(yīng)：取待測(cè)液 1． 0 mL放在測(cè)試瓶中，滴加幾滴氨水振搖，反應(yīng)完后溶液呈黃色，表明有黃酮類化合物。 ? (5)氯化鐵反應(yīng)：在試管中加 1 mL提取物，再加入 1． 0 mL的 2％FeCl3，若呈藍(lán)綠色或綠色，表明含有酚類化合物。 ? (8)與 5％的醋酸鉛反應(yīng)：在 5％的醋酸鉛溶液中滴加數(shù)滴提取物，有黃色沉淀產(chǎn)生的表示有黃酮類成分。 五、 結(jié)果與分析 ?3. 多酚提取得率按照如下公式計(jì)算 ?式中： Y：提取得率（ %）； ?V：提取多酚液體積（
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