【正文】 驗證 方法如下：① 準 備 一 塊 與 設(shè)備 表面材 質(zhì) 相同的板材，如平 整光 潔 的 316L不 銹鋼 板；② 在 鋼 板上劃出 100mm100mm 的區(qū)域；③ 將 5倍限度量的待 檢測 物溶液，定量裝入校 驗 的微量注射器；④ 將其溶液盡量均勻地涂布在 100mm100mm 的區(qū)域內(nèi)；⑤ 自然干燥或用 電 吹 風 溫和地吹干不 銹鋼 板；⑥ 用 選 定的擦拭溶 劑潤 濕擦拭棉 簽 ，按下 圖 所 示 進 行擦拭取 樣 ；⑦ 重復(fù)以上 規(guī) 程 3次；棉 簽 取 樣 方法的 驗證 ：⑧ 將擦拭棉 簽 分 別 放入棉 簽 管中，加入 預(yù) 定溶 劑 5ml，超聲；⑨ 用 經(jīng)驗證 的 檢驗 方法 檢驗 ， 計 算回收率和回收率的RSD。下 圖為 棉 簽 插 試 取 樣 方法：第一步 第二步l通常淋洗法限度 檢查 不需做回收率 驗證 ；定量 檢查應(yīng) 做回收率 驗證 ，可以利用淋洗溶 劑 沖洗已知量（在限度附近）的分析物確定回收率，回收率通常 應(yīng) 不低于 95%。l 淋洗的取 樣 方法 為 根據(jù)淋洗水流 經(jīng)設(shè)備 的 線 路， 選擇 淋洗 線 路相 對 最下游的一個或幾個排水口 為 取 樣 口。分 別 按照微生物 檢驗樣 品和化學(xué) 檢驗樣 品的取 樣規(guī) 程收集清 潔 程序最后一步淋洗即將 結(jié) 束 時 的水 樣 。l 淋洗法 樣 品可 對 沖洗液直接 檢測 也可 對 沖洗液做稀 釋 后檢測 ；無 論 直接 檢測還 是稀 釋檢測 都 應(yīng) 在接到 樣 品后首先將樣 品同空白溶 劑 做 視覺檢查 ，確定是否有 顏 色差異和異物存在；如果有上述 現(xiàn) 象 發(fā) 生，可直接判定 樣 品不合格。淋洗液取 樣 方法的 驗證 ：取 樣 方法和取 樣 點的確 認 通常 設(shè)備 的取 樣 清 潔驗證 中如何確定合適取 樣 方法和取樣 點是 驗證 方案的關(guān) 鍵 內(nèi)容之一，必 須 由合適的理由來確 認取 樣 點，此取 樣 點 應(yīng) 能 夠 代表 設(shè)備 的 “ 最 臟 點 ” 。（ 1） 取 樣 方法的確 認 方法分 為 棉 簽 直接表面擦拭、淋洗液沖洗和安慰 劑 取 樣 。 擦拭取 樣 的 優(yōu) 點是能 對 最 難 清 潔 部位直接取 樣 ，通 過 考察有代表性的最 難 清 潔 部位的殘留物水平 評 價整套生 產(chǎn)設(shè)備的清 潔 狀況。通 過選擇 適當?shù)牟潦萌?劑 、擦拭工具和擦拭方法，可將清洗 過 程中未溶解的，已 “ 干 結(jié) ” 在 設(shè)備 表面或溶解度很小的物 質(zhì) 擦拭下來。 檢驗 的 結(jié) 果能直接反映出各取 樣點的清 潔 狀況。 取 樣 方法和取 樣 點的確 認l擦拭取 樣 的缺點是很多情況下 須 拆卸 設(shè)備 后方能接觸到取 樣 部位， 對 取 樣 工具、溶 劑 、取 樣 人 員 的操作等都有一定的要求，總 的來 說 比 較 復(fù) 雜 。l 淋洗取 樣 法 為 大面 積 取 樣 方法，其 優(yōu) 點是取 樣 面大， 對 不便拆卸或不宜 經(jīng) 常拆卸的 設(shè)備 也能取 樣 。因此其適用于擦拭取 樣不易接觸到的表面，尤其適用于 設(shè)備 表面平坦、管道多且 長 的的生 產(chǎn)設(shè)備 。l 淋洗水 樣 品的缺點是溶解與流體力學(xué)原理，當溶 劑 不能在 設(shè)備 表面形成湍流 進 而有效溶解殘留物 時 ，或者殘留物不溶于水或“ 干 結(jié) ” 在 設(shè)備 表面 時 ，淋洗水就 難 以反映真 實 的情況。l 必 須 由 經(jīng)過 培 訓(xùn) 的人 員進 行取 樣 ，并且必 須 按照批準的 測試方案 進 行。 執(zhí) 行取 樣 的人 員 同 執(zhí) 行清 潔 操作的人 員 不能 為 同一人。取 樣 方法和取 樣 點的確 認 （ 續(xù) ）安慰 劑 取 樣 （ Placebo method）方法也稱模 擬 法取 樣 。l 設(shè)備 清 潔 干燥后，在 該設(shè)備 內(nèi) 進 行模 擬 物料 處 理，然后取一部份 進 行 測試 。l法 規(guī) 部 門 強 力不推薦使用此法，原因如下：l 無人能確保殘留均勻地 遺 留在 設(shè)備 整個表面；l 較 大 顆 粒的殘留不能均勻地分散到模 擬 物料中。取 樣 方法和取 樣 點的確 認（ 2） 取 樣 點的確 認 通常不可能擦拭 設(shè)備 的全部表面，因此 應(yīng)該選擇設(shè)備 的最差區(qū)域作 為 取 樣 點。 這 些區(qū)域 應(yīng) 在清 潔難 度和殘留水平方面代表著 對 清 潔規(guī) 程最大程度的挑 戰(zhàn) ，例如料斗的底部、 槳 拌 槳槳葉底部和 閥門 的周 圍 。 如果 進 行微生物取 樣 ，取 樣計 劃 應(yīng) 包括微生物的可能最差區(qū)域，例如： 較難 靠近的地方以及可收集水的排水區(qū)域。微生物和化學(xué)取 樣應(yīng) 在不同區(qū)域 進 行， 測試 方案中 應(yīng) 包括 設(shè)備 及其取 樣 點的描述或 圖 表。 分析方法的 驗證 通常清洗分析方法分 為 限度 檢查 和定量 檢查 ，不同的 檢查 方法 驗證 的參數(shù)也不相同。（ 1）回收率 回收率的分析方法 驗證 已在取 樣 方法的 驗證 中 詳細 描述， 不在此 贅 述。（ 2）精密度 精密度系指在 規(guī) 定的條件下，從同一個均勻 樣 品中， 經(jīng)多次取 樣測 定所得 結(jié) 果之 間 的接近程度。通常用相 對標 準偏差 (RSD)來表示。定量 檢查 的 RSD%應(yīng) 不大于 10%。 淋洗法和棉 簽 法用于限度 檢查 通常不需要做精密度 實驗；分析方法的 驗證（ 3） 線 性 /范 圍 線 性系指在 設(shè)計 的范 圍 內(nèi)， 測 定 結(jié) 果與 試樣 中被 測 物 濃度呈正比關(guān)系的程度。 范 圍 系指能達到一定精密度、準確度和 線 性， 測試 方法適用的高低限 濃 度或量的區(qū) 間 。 定量 檢查應(yīng) 至少 測試 5個 濃 度范 圍 并且包含清 潔 的最低限和最高限度， 線 性的相關(guān)系數(shù) 應(yīng) 不低于 ； 濃 度范 圍應(yīng) 達到殘留物限度的 50％～ 150％。 淋洗法和棉 簽 法用于限度 檢查時 不需做 線 性 /范 圍驗證 。分析方法的 驗證（ 4） 檢測 限和定量限 檢測 限系指在確定的 試驗 條件下， 試樣 中被 測 物能被 檢測 出的最小量；定量限系指在確定的 試驗 條件下， 試樣 中被測 物能被準確 測 定的最小量，其 測 定 結(jié) 果 應(yīng) 具有一定準確度和精密度。 淋洗法和棉 簽 法用于限度 檢查 只需做 檢測 限 實驗 。 通常 檢測 限是指信噪比 為 3:1時 被分析物的 濃 度，定量限是指信噪比 為 10:1時 被分析物的 濃 度。分析方法的 驗證（ 5） 專 屬性 專 屬性系指在其他成分 (如： 雜質(zhì) 、降解 產(chǎn) 物、相似物等 )存在下，分析方法能準確 測 出被 測 物的特性。 評 價空白溶 劑 、分析系 統(tǒng) 、棉 簽 本身是否有干 擾 ； 通常采用的 驗證 方法 為 ： 進針 空白溶 劑評 價溶 劑 干 擾、 進樣 量 為 0評 價系 統(tǒng) 干 擾 、 進針 棉 簽 浸泡的溶 劑評 價棉 簽干 擾 。 （ 6） 樣 品溶液 穩(wěn) 定性 通常 樣 品室溫或 5℃ 冰箱冷藏放置 2472小 時 ， 測 定 結(jié) 果應(yīng) 不低于初始 值 的 90%。分析方法的 驗證（ 7）系 統(tǒng) 適用性 定量 檢查測 定 時 ， 應(yīng) 制 備 2份 對 照品， 對 照品一致性 檢查應(yīng)為 不超 過 5%； 對 照品的 RSD%不 應(yīng) 超 過 10%。 （ 8）限度 檢查時 溶液的 進樣順 序 限度 檢查測 定 時測 定 順 序依次 為 空白溶 劑 、 樣 品、對 照品。限度 檢查 和定量 檢查時 所需 驗證 的參數(shù)：限度 檢查 法 定量 檢查 法專 屬性 √ √精密度 X √線 性 /范 圍 X √回收率 √ √檢測 限和定量限 檢測 限 驗證 * 定量限 驗證 *樣 品溶液的 穩(wěn) 定性 √ √系 統(tǒng) 適 應(yīng) 性 √ (一份 標 準品 ) √ (兩份 標 準品 )檢查方法參數(shù)制定驗證方案 1? 驗證方案的關(guān)鍵點? 選定清潔的參照物（最難清潔的物質(zhì)）? 最難清潔部位和最難取樣部位? 殘留物允許限度和相應(yīng)的檢測方法? （合格標準和檢測方法）制定驗證方案 2v確定最難清潔的物質(zhì)（參照物）藥品一般由活性成份 +輔料組成單組份產(chǎn)品：組份 =參照物 多種成份：藥效最強、溶解度最差的成