牡丹組織培養(yǎng)技術(shù)的研究概述畢業(yè)論文-文庫吧
2025-06-07 16:01 本頁面
【正文】 前言 12 牡丹組織培養(yǎng)技術(shù)各個階段研究 2 牡丹組培技術(shù)研究進展 3 外植體選擇的研究 3 培養(yǎng)基選擇的研究 4 培養(yǎng)條件的研究 4 生根培養(yǎng)與移栽 43 牡丹不同組培方法的研究 5 牡丹愈傷組織培養(yǎng)的研究 5 花粉和花粉培養(yǎng)的研究 6 胚培養(yǎng)與體細胞培養(yǎng)的研究 64 牡丹組織培養(yǎng)過程中常見問題 7 玻璃化現(xiàn)象 7 褐化現(xiàn)象嚴重 8 生根率低以及生根質(zhì)量不高 8 牡丹組培苗移栽成活率低 8 體胚誘導(dǎo)率低且畸形體胚多 95 總結(jié)及展望 9參考文獻 11致 謝 121前言牡丹（Paeonia suffruticosa Andr），別名富貴花、百兩金、木芍藥，為芍藥科芍藥屬植物，為我國的傳統(tǒng)名花。其花朵碩大，雍容華富，作為文明、和諧、繁榮、富強的象征，在國內(nèi)外有廣闊的文化市場需求。牡丹不僅有極高的觀賞價值，還有相當(dāng)重要的藥用價值。牡丹傳統(tǒng)的繁殖方法有有性生殖中的種子繁殖，無性繁殖中的分株、壓條、嫁接繁殖等[1]。然而，這些繁殖方法因受到各種因素的影響，且多種牡丹結(jié)實率低甚至不結(jié)實，且種子發(fā)育不良，用種子繁殖難以獲得優(yōu)良植株，無性繁殖則因受生長季節(jié)的限制、繁殖系數(shù)小、形不成規(guī)模，而無法滿足市場的需求。利用組培技術(shù)繁殖牡丹，有周期短，繁殖系數(shù)高，便于大規(guī)模生產(chǎn)，因此，各種牡丹品種群的組培技術(shù)已經(jīng)成為主要的研究方向。自1984年李玉龍等[4]人報道了牡丹快繁技術(shù)的研究，之后英國、法國、美國、荷蘭、朝鮮及日本等國家也進行了研究。20多年來，中外學(xué)者對牡丹的組織培養(yǎng)進行了大量的工作，均取得了不同程度的進展。目前利用組培方法，已經(jīng)能育成生根的組培苗，但由于組培苗過渡到商品苗還存在許多問題，組培苗的生根、煉苗、出瓶，褐化現(xiàn)象的控制等都需要進一步研究。國內(nèi)組培苗還沒有形成商品苗批量生產(chǎn)。2牡丹組培技術(shù)的研究現(xiàn)狀我國是牡丹第一資源大國，現(xiàn)有四大品種群近千個牡丹品種，但真正用于組培研究的卻非常少，與我國豐富的牡丹資源極不相稱。常見的有洛陽紅、姚黃、鳳凰山牡丹、青龍臥墨池、十八號牡丹、黑花魁、豆綠、金星雪浪、大胡紅、荷花紫、枯枝牡丹等，這在一定程度上反映出目前的牡丹組培研究工作還處于初級階段，研究的廣度有待加強。目前，牡丹組織培養(yǎng)采用的外植體多數(shù)主要有頂芽、腋芽、萌蘗芽、花芽和萌生條等，其中萌蘗芽的效果最好，分化高，花芽最差。不同取材時期對芽的培養(yǎng)也有影響，12月至次年2月份取材，外植體污染率低，成活率高，萌發(fā)時間早，生長迅速，植物健壯，培養(yǎng)效果最好[2]。這是因為冬天溫度低，將土壤以及植株上附著的細菌、病毒等生物凍死，減少了污染源；另外，低溫過程導(dǎo)致植株及芽內(nèi)的激素含量發(fā)生動態(tài)變化，促進萌發(fā)和生長的IAA，GA3增多，抑制萌發(fā)和生長的ABA減少，從而改善了芽外植體的培養(yǎng)效果[3]。牡丹芽體上或芽體內(nèi)的菌類物質(zhì)是外植體消毒困難的主要原因。常用的消毒劑有酒精、升汞（HgCl2）、次氯酸鹽、酒精和升汞混合液等。消毒劑的濃度和處理時間因品種、外植體類型、取材時期不同有一定的差異。植物組培常用的消毒劑如表1[4]，所示常用消毒劑的使用方法及效果消毒劑使用濃度/%消毒時間/min去除的難易消毒效果對植物毒害升汞210較難最好劇毒酒精7075易好有次氯酸鈉2530易很好無漂白粉飽和溶液530易很好低毒過氧化氫1012515最易好無新潔爾滅30易很好很小硝酸銀1530較難好低毒抗菌素/(mgL1)3060中等較好低毒表1目前，比較成熟的滅菌技術(shù)主要包括以下幾步：①用自來水將外植體表面沖洗干凈；②用適量洗滌靈溶液浸泡20min，用毛刷輕輕洗去鱗片包裹的塵土，用流水沖洗10min；③接著在超凈工作臺上進行滅菌；④用無菌水35分鐘以清除殘余消毒劑；⑤剝?nèi)パ客獠堪镊[片即可接種。 尤楊等以牡丹頂芽為外植體，%HgCl2消毒劑，研究了不同消毒處理時間4min、6min、8min、10min、12min對頂芽污染率、褐化率及存活率的影響，實驗結(jié)果表明：%HgCl2處理牡丹頂芽，時間在8min為最理想的消毒處理時間。其中，隨著消毒時間的延長，污染率呈由高到低的趨勢，而褐化率卻呈由低到高的趨勢，存活率則是先升高，再下降[5]。目前，牡丹的組織培養(yǎng)主要采用MS培養(yǎng)基，附加不同的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)。但該培養(yǎng)基無機鹽濃度過高，可能引起酚類外溢物質(zhì)的大量產(chǎn)生而導(dǎo)致褐化，于是人們將MS培養(yǎng)基成分減半，形成
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