【正文】 因是這些油脂中的蠟酯發(fā)生皂化反應(yīng)產(chǎn)生渾濁。結(jié)果表明：皂化法定性檢測食用油脂中礦物油適用于大豆油、花生油、菜籽油、葵花油、棉籽油、芝麻油、棕櫚油、亞麻籽油、葡萄籽油、牛油、豬油、茶籽油、棕櫚仁油、橄欖油、椰子油、海豹油、一級玉米油等油脂。而對于米糠油、沙棘籽油、沙棘果油、小麥胚芽油和毛玉米油等油脂則會誤判。 皂化法檢測礦物油的檢出限表33 皂化法檢測動植物油脂中摻入礦物油的部分檢出限表液體石蠟檢出限（%）已用導(dǎo)熱油檢出限（%）大宗油脂花生油 一級大豆油 四級大豆油 一級菜籽油 濃香葵花籽油 一級棉籽油 小油種芝麻香油 成品芝麻油 椰子油 茶籽油 橄欖油 分提油脂棕櫚液油8℃ 棕櫚硬脂53℃ 動物油脂豬油 牛油 注：“”表示未進行試驗，“已用導(dǎo)熱油”為工廠用過的導(dǎo)熱油。表33給出了部分油脂的檢出限，%%之間。 皂化法的重復(fù)性試驗 選取了幾種油樣做重復(fù)性試驗，試驗結(jié)果如表34所示。表34 皂化法重復(fù)性試驗表油脂種類礦物油種類及含量試驗現(xiàn)象一級大豆油無澄清透明一級大豆油%導(dǎo)熱油微混一級菜籽油無澄清透明一級菜籽油5%液體石蠟渾濁一級米糠油無微混說明皂化法判定礦物油對于不含蠟酯的油脂的效果明顯，重復(fù)性好。 TLCFID（薄層色譜氫火焰離子檢測器）法TLCFID法是根據(jù)吸附劑對待分離組分吸附能力的不同，以及甘三酯、液體石蠟和植物蠟極性的不同，在流動相浸濕色譜柱的過程中，樣品隨著流動相展開，不同的組分隨流動相以不同的速度向前移動，最終保留在色譜柱的不同位置，從而達到分離，然后再用氫火焰使化合物燃燒裂解形成離子碎片和自由電子，再由電極收集它們并產(chǎn)生與化合物量成正比的電流信號，根據(jù)出峰位置和峰面積計算出各組分在樣品溶液中的百分含量。 最佳試驗條件研究了TLCFID法的最佳試驗條件，表明最佳試驗條件如下：點樣濃度：10mg/mL~20mg/mL點樣量：1μL依次展開展開劑：正己烷：無水乙醚：甲酸=50:20:（v/v）二次展開展開劑：正己烷：苯=1:1（v/v）展開溫度：1520℃掃描條件：氫氣流速為90mL/min， TLCFID法試驗結(jié)果試驗表明TLCFID法能很好的應(yīng)用于動植物油脂中的礦物油檢測。純礦物油的色譜圖具有以下特征：峰形對稱、峰頂圓鈍，是一個單一的峰，無雜峰。見圖37，圖38。礦物油峰礦物油峰圖37液體石蠟的TLCFID色譜圖 圖38導(dǎo)熱油的TLCFID色譜圖食用油脂純樣在薄層棒上后主要分出兩個色譜峰，第一個是甘三酯的色譜峰，稱為“甘三酯峰”，出峰時間約為 ，這種峰高且寬，呈刀形，不對稱，其大小根據(jù)動植物油脂組分而定，是主要的色譜峰。第二個是食用油脂中的“脂肪酸峰”，這種峰看起來較平緩，坡度小，見圖39和310。 甘三酯峰 礦物油峰甘三酯峰 脂肪酸峰 圖39四級大豆油的TLCFID色譜圖 %的一級大豆油的TLCFID色譜圖米糠油較為特殊，該油脂純樣有三種特征峰，分別為糠蠟峰、甘三酯峰、脂肪酸峰，且糠蠟最先出峰，峰較小較矮，見圖311。沙棘籽油和玉米油等含蠟酯的油脂采用TLCFID法檢測，會出現(xiàn)與米糠油類似的圖譜。由此可知，含蠟酯的油脂中摻入一定量的礦物油，采用TLCFID法可以將礦物油、植物蠟和甘三酯很好的分開，如圖312所示。蠟酯峰脂肪酸峰甘三酯峰 礦物油峰蠟酯峰甘三酯峰脂肪酸峰 圖311米糠油的TLCFID色譜圖 %的米糠油的TLCFID色譜圖 如果待測油樣在礦物油出峰位置有峰出現(xiàn)（如圖338所示），可以初步判斷該油樣中含有礦物油。然后再與標準色譜圖對比（如圖3312所示），如果色譜峰位置及圖譜特征與標準圖譜一致，則判定待測油樣中有礦物油存在。 TLCFID法檢出限最低檢測濃度采用試驗的方式確定。，采用不同稀釋倍數(shù)的低濃度標液進行試驗，以基線噪聲10倍的濃度為最低檢測濃度，最終得出的最底檢出限為：，%的礦物油。%。基線噪聲如圖313所示，基線噪聲信號的10倍如圖314所示。礦物油峰圖313 基線噪聲圖 圖314 基線噪聲10倍信號圖 TLCFID法重復(fù)性用含導(dǎo)熱油5%的米糠油，按照標準方法操作，所得圖譜如315所示：礦物油、植物蠟和甘三酯可以很好地分開，重復(fù)性極好。脂肪酸峰甘三酯峰植物蠟峰礦物油峰%的米糠油的TLCFID色譜圖由以上結(jié)果可知：TLCFID法靈敏度高，檢出限低，適用油脂范圍廣。但是，該法對操作人員要求較高，儀器昂貴依賴進口，棒狀色譜棒價格較高。2012年4月貴陽標準會議上專家組提出該方法不易普及和推廣，建議采用薄層色譜法（TLC）進行研究。雖然前期我們對于該方法做了大量的研究工作，但鑒于以上缺點國標不將該法作為礦物油檢測的方法。 氧化鋁薄層色譜法 原理根據(jù)食用油脂與礦物油的極性不同將二者分離，在流動相浸濕薄層色譜板的過程中，樣品隨著流動相被展開，不同的組分隨流動相以不同的速度向前移動，最終保留在薄層色譜板上的不同位置，從而達到分離的目的。 氧化鋁層析試驗條件確立關(guān)于氧化鋁薄層色譜板的制備進行了大量的試驗，試驗結(jié)果表明：羧甲基纖維素鈉加入量過少薄層色譜板易粉不易儲存，加入量過多薄層色譜板硬度過高，不利于油樣的分離；活化時間短則薄層色譜板硬度低易損壞，活化時間過長會導(dǎo)致能源和時間的浪費；活化溫度低影響薄層色譜板的活性，溫度過高薄層色譜板會變黃；氧化鋁用量過多薄層色譜板太厚展開速度慢，過少則薄層色譜板太薄影響分離效果。試驗最終確定了氧化鋁薄層色譜板的制備條件為：200300目中性氧化鋁(薄層用)：48177。2g/板。羧甲基纖維素鈉：。活化溫度：103177。2℃?；罨瘯r間：24h。對氧化鋁薄層色譜板的展開條件做了大量研究。首先研究了展開劑，所選展開劑見表35，采用不同極性的展開劑時甘三酯、蠟酯、礦物油有不同的比移值。以油脂中展開最前沿譜帶——。結(jié)合表35和圖316可知隨著展開劑極性的減小，甘三酯、蠟酯和礦物油的比移值均減小，這與乙醚中的醚鍵直接相關(guān)。但蠟酯和甘三酯比移值減小的速率大于導(dǎo)熱油。Ⅲ時，已經(jīng)達到設(shè)定目標，（見圖316）三者能夠被很好的分離。選展開劑Ⅰ、Ⅱ時蠟酯與礦物油的比移值相差太小。選Ⅳ時甘三酯與蠟酯的比移值相差太小，不利于觀察到蠟酯帶子，故綜合考慮選定展開劑Ⅲ為最佳展開劑正己烷：無水乙醚=80:5（v/v）。表35 展開劑極性匯總表展開劑序號　展開劑比例（v/v）展開劑極性Ⅰ正己烷：無水乙醚：冰乙酸= 80:10:2Ⅱ正己烷：無水乙醚=80:10Ⅲ正己烷：無水乙醚=80:5Ⅳ正己烷：無水乙醚=80:2Ⅴ正己烷注：極性計算公式： P=VAPA+VBPB+… P表示：展開劑總極性；VA: A組分體積分數(shù)；PA:A組分極性大小VB:B組分體積分數(shù)；PB:B組分極性大小。圖316不同展開劑條件下的甘三酯、蠟酯、礦物油比移值變化規(guī)律圖注：展開溫度：25177。1℃。圖中未給出蠟酯在Ⅴ為展開劑時的比移值，但不影響整體的趨勢，在展開劑為Ⅳ時，蠟酯與礦物油已經(jīng)能夠分開。其次研究了展開溫度。不同溫度下甘三酯、蠟酯、導(dǎo)熱油的比移值見表36。表36 不同溫度下甘三酯和蠟酯的比移值表　溫度甘三酯蠟酯導(dǎo)熱油30177。1℃25177。1℃20177。1℃注：展開劑為正己烷：無水乙醚=80:10。(溫度梯度實驗在展開劑實驗之前做的)由表36可知，；，蠟酯的比移值變化也不大。試驗說明在20℃30℃區(qū)間，溫度變化對甘三酯、蠟酯、導(dǎo)熱油的比移值影響