《細(xì)胞的換液與傳代》ppt課件-文庫吧
2025-04-18 03:42 本頁面
【正文】 散酶（ )或蛋白酶 ( 1mg/ml) : 倒出舊液 PBS洗滌 胰蛋白酶消化 吸出消化液 加入培養(yǎng)液 吹散細(xì)胞 計數(shù) 稀釋 培養(yǎng) 離心法：離心后去上清，加培養(yǎng)液，吹 打，傳代。 直接傳代法：將細(xì)胞慢慢沉淀，將上清吸去1/22/3，加培養(yǎng)基，傳代。 懸浮細(xì)胞的傳代培養(yǎng) (二 ) 傳代培養(yǎng)的注意事項 傳代時機與傳代培養(yǎng)的細(xì)胞密度：細(xì)胞沒生長到足以覆蓋的瓶底壁的大部分表面前，不要急于傳代。 傳代數(shù)或代數(shù)：指對培養(yǎng)物傳代的次數(shù)。 盡量少傳代，避免轉(zhuǎn)化。 二、細(xì)胞系的建立 正常細(xì)胞系建立的程序包括： 原代培養(yǎng) 第一次傳代 常規(guī)傳代和凍存、 復(fù)蘇等階段。 細(xì)胞系的維持 細(xì)胞系檔案要記錄好：組織來源、培養(yǎng)基要求、傳代時間等； 傳代換液有規(guī)律，否則會引起生物學(xué)特性改變； 多種細(xì)胞維持傳代，要防止交叉污染； 要有充足的凍存儲備，防止因污染造成絕種；另外，細(xì)胞暫時不用，最好凍存，以免老化或性狀改變。 ? 證明細(xì)胞系的種系。染色體分析、同工酶分析、 DNA指紋技術(shù)。 ?
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