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細(xì)胞的換液與傳代ppt課件-閱讀頁

2025-05-18 03:42本頁面
  

【正文】 1)確保一個(gè)細(xì)胞 ? 2)輪廓清晰完整,體積適宜健康 ? 3)不需換液 飼養(yǎng)層克隆法 ? 飼養(yǎng)細(xì)胞( feeder cell):也稱滋養(yǎng)細(xì)胞,是一層經(jīng)過射線或絲裂霉素 C處理過的供其它細(xì)胞附著的細(xì)胞層。 ? 注意: 3周內(nèi)飼養(yǎng)細(xì)胞即死亡,要及時(shí)應(yīng)用 飼養(yǎng)層克隆圖解 膠原膜板或血纖維蛋白膜板克隆法: 1)膠原膜板或血纖維蛋白膜板的制備 2)消化、稀釋、接種和培養(yǎng)待克隆細(xì)胞 血纖維蛋白膜板制備 A液: ,100ml培養(yǎng)液 B液 :250mg 牛血纖維蛋白原、 800mg NaCl、25mg 檸檬酸鈉、 1000毫升雙蒸水 A: B=4: 1 瓊脂克隆法: 用于病毒轉(zhuǎn)化細(xì)胞、惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞。 10個(gè) /ml ? 培養(yǎng)液。 ? CO2 適應(yīng)性生長基質(zhì):膠原層,血漿纖維蛋白層,多聚右旋賴氨酸,纖維連接蛋白,瓊脂 (三)克隆的分離 克隆化環(huán)分離法 ? 射線照射分離克隆法 ? 將培養(yǎng)瓶倒置放于 X射線或 鈷 60源下,用 2mm厚的鉛片蓋住選中的
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