植株生理生長指標(biāo)的測定-文庫吧
2025-03-23 23:15 本頁面
【正文】 ml和少量石英砂一起在研缽內(nèi)磨碎，以提出甲月替。紅色提取液移入試管，并用少量乙酸乙酯把殘渣洗滌二、三次，皆移入試管，最后加乙酸乙酯使總量為10ml，用分光光度計在波長485nm下比色，以空白試驗作參比測出吸光度，查標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可求出四氮唑還原量。四、結(jié)果計算單位質(zhì)量鮮根的四氮唑還原強度mg/g?h=CWtC—從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出的四氮唑還原量（mg）；W—樣品質(zhì)量（g）；t —反應(yīng)時間（h）。 植物體內(nèi)硝酸還原酶活力的測定硝酸還原酶（nitrate reductase, NR），是植物氮素同化的關(guān)鍵酶，它催化植物體內(nèi)的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽（NO3ˉ+NADH+H＋→NO2ˉ+NAD＋+H2O）。產(chǎn)生的亞硝酸鹽與對–氨基苯磺酸（或?qū)ΘC氨基苯磺酰胺）及α萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性條件下定量生成紅色偶氮化合物。生成的紅色偶氮化合物在540 nm有最大吸收峰，可用分光光度法測定。硝酸還原酶活性可由產(chǎn)生的亞硝態(tài)氮的量表示。一般單位鮮重以μg氮/（gh）為單位。 NR 的測定可分為活體法和離體法?；铙w法步驟簡單，適合快速、多組測定；離體法復(fù)雜，但重復(fù)性較好。Ⅰ離體法一、實驗材料、試劑與儀器設(shè)備（一）實驗材料 水稻、小麥或其他植物葉片、幼穗等。 （二）試劑 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取分析純NaNO2 ，然后再吸取5mL定容至1000mL，即為含亞硝態(tài)氮的1μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。 ：Na2HPO412H2O 2H2O 。 1％磺胺溶液：（25mL濃鹽酸加水定容至100mL即為3mol/L HCl）。 ％萘基乙烯胺溶液： mL無離子水中，貯于棕色瓶中。 mol/L KNO3溶液： mol/L 。 mol/L ： Na2HPO412H2O， K2HPO43H2O溶于1000mL無離子水中。 提取緩沖液：、 EDTA溶于100mL mol/L 。 2mg/mL NADH溶液：2mg mol/L （臨用前配制）。 （三）儀器設(shè)備 冷凍離心機，分光光度計，天平（感量 mg ），冰箱，恒溫水浴，研缽，剪刀，離心管，具塞試管，移液管，洗耳球。 二、實驗步驟 （一）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 取7支潔凈烘干的15mL刻度試管按表1順序加入試劑，配成0～ 的系列標(biāo)準(zhǔn)亞硝態(tài)氮溶液。搖勻后在25℃下保溫30min，然后在540nm下比色測定。以亞硝態(tài)氮（μg）為橫坐標(biāo)（X），吸光度值為縱坐標(biāo)（Y）建立回歸方程。表1 配制標(biāo)準(zhǔn)溶液時各物質(zhì)加入量試劑/mL管 號1234567亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液0蒸餾水
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1