【正文】 41. 基因重組可使基因再激活表現(xiàn)為：交叉復活和多重復活。42. 粘附素是細菌表面的蛋白質(zhì)有菌毛和非菌毛。進入宿主：黏附，定植，侵入，轉歸。毒力有侵襲力和毒素。：菌體表面結構，菌毛，侵襲性酶（凝固酶，透明質(zhì)酸酶，鏈激酶，膠原酶等）。是指病原突破宿主機體的防御功能，并能在體內(nèi)定居、繁殖和擴散的能力。，前一字為屬名，名詞，后一為種名，形容詞。目前國際上普遍采用伯杰分類系統(tǒng)，也有用CDC（USA）。目前以細菌細胞壁的結構特點作最高一級分類依據(jù)將原核界分為薄，堅，軟，疵壁四門?？?，屬，種分類主要依靠生化特性和抗原結構。46. 顯微鏡的分辯率為波長一半。熒光顯微鏡的光源為超高壓汞燈（50—200W）。普通光學顯微鏡不能觀察細胞和細菌的亞結構。相差顯微鏡特殊裝置—環(huán)狀光闌、相板，利用光干涉現(xiàn)象。適用于對活體細胞生活狀態(tài)下的生長、運動、增殖情況、及細微結構的觀察。用綠色濾光片。48. 不能立刻接種的血應用SPS（氯化鈉溶液）抗凝。懷疑細菌性心內(nèi)膜炎時血培養(yǎng)不少于三次。 49. 腸桿菌科的強選擇（SS瓊脂）弱選擇（EMB，麥康凱）。50. 直接鏡檢2h報告，最后鑒定和藥敏一般不過3天，除血外，必須在24h內(nèi)預報53. α溶血是草綠色，β溶血是透明環(huán)，γ溶血紅細胞不溶解，雙環(huán)。54. 細菌數(shù)量達106~107CFU/ml時培養(yǎng)肉湯才見混濁。55. 血培養(yǎng)中有105菌落形成單位（CFU）/ML時才能通過革蘭氏染色檢出細菌。56. AMS系統(tǒng)是目前微生物鑒定中最常用的自動化儀器。57. 突變種純系動物：實驗動物正常染色體中某個基因發(fā)生了變異的具有各種遺傳缺陷的突變品系動物。58. 純***動物：無計劃隨意交配的動物。近交系動物：采用兄妹交配（或親子交配）繁殖20代以上的純品系動物。無菌動物：體表腸道內(nèi)無菌、體內(nèi)無抗體。悉生動物：給出無菌動物引入已知的5～ 17種正常腸道菌的動物。59. 小白鼠對肺鏈，破傷外毒素敏感，豚鼠對結核白喉易感，貓對金葡萄菌腸毒敏感。測定病原體的感染性最好選用無菌動物或悉生動物。60. 菌種保存：“凍干”保存—穩(wěn)定劑（脫脂乳、蔗糖）。凍干菌種只能使用一次，凍干菌種打開后需要以傳代保存形式保留工作菌種。凍干菌種在使用時須“復蘇”且須傳代才能恢復原生長特性。低溫保存：20℃或80℃+甘油作穩(wěn)定劑。菌種取出須置于干冰或預冷的鉛質(zhì)容器內(nèi)，用完立即放回不可菌種解凍。冷凍干燥保存法是最有效的方法，利用各種斜面和半固體加石蠟油是最常用和最簡便的方法，一般不含糖，不用液體。61. 在細菌生長到足夠量時加入抑制蛋白質(zhì)合成的抗生素，在細菌停止繁殖后質(zhì)粒還在復制，可以提高質(zhì)粒的收獲量。62. 糞便嘔吐物應接種高鹽卵黃或高鹽甘露醇瓊脂，觸酶陽性，凝固酶陽性玻片法篩選，試管法確證。必須做苯唑西林的敏感試驗。63. 真菌，霍亂，銅綠及糞堿需在室溫保存，而腦膜炎，淋球，初次分離的流感嗜血菌保存于37℃。每轉種三代要鑒定一次。65. 葡萄球菌：產(chǎn)生脂溶性色素，多數(shù)分解甘露醇產(chǎn)酸液化明膠和產(chǎn)生血漿凝固酶。蛋白抗原（A蛋白）種屬特異無型特異，多糖抗原（A，B，C）是半抗原，有型特異。是抵抗力最強的無芽胞菌。 66. 布魯司菌：無鞭無芽G呈散沙狀，S型有莢膜，專性需氧，抵抗力強，37 ℃，～，血液、血清、肝浸液可促進生長，48小時形成微小，無色透明光滑凸起菌落。6個種19個生物型，對人致病是羊、牛、豬種。血清凝集試驗（SAT）是常用診斷實驗，虎紅平板凝集試驗（RBPT），補體結合試驗（CFT）、免疫熒光試驗（IFT）等。靜脈血3—5毫升。用肝浸液瓊脂培養(yǎng)基、蛋白胨、土豆浸液瓊脂等。動物分離—豚鼠。生化特征：分解尿素、產(chǎn)生硫化氫。診斷標準：血清試管凝集試驗（SAT）1：100++以上，補體結合試驗（CFT）：1；10++67. 萊姆病原：伯道疏螺旋體引起萊姆病，細胞結構：原生質(zhì)柱、表層、外膜、鞭毛。微嗜氧G，能自身合成類脂化合物、主要脂肪酸，并將嘌呤堿結合到核酸中，但不能合成長鏈脂肪酸，發(fā)展酵代謝產(chǎn)物乳酸。蜱傳播媒介，鼠主要宿主動物，標本在 20—4℃運送。標本制成懸液，暗視野顯微鏡2010或4010下檢查。病原分離：接種BSK培養(yǎng)基33℃培養(yǎng)。用兔抗B31特異性多克隆抗體進行間接免疫熒光抗體試驗（IFA），或ELISA、WB最終確診方法。68. 鉤端螺旋體：原核細胞型微生物，雙股DNA。需氧或微需氧，是致病性螺旋體中唯一能人工培養(yǎng)的。其中鼠類和豬為主要的傳染源和儲存宿主，通過人的皮膚黏膜侵入。常用柯夫培養(yǎng)基或EMJH培養(yǎng)基，需加入10%兔血清或牛血清，培養(yǎng)液透明有輕度乳光，搖動時有云霧狀混濁。GFontana鍍銀染色成棕色。對酸堿敏感，～，，最適溫28～30℃，12h分裂一次。電鏡下基要本結構：柱形原生質(zhì)體、內(nèi)鞭毛、外膜標本：血液、腦脊液在發(fā)病后10天內(nèi)，出現(xiàn)發(fā)熱但未用藥前，不能即時送檢，血液用不含枸櫞酸鈉抗凝520℃保存，1周內(nèi)接種。2周取尿液則用1%牛血清白蛋白保存，用磷酸鹽緩沖液稀釋取50微升接種到5毫升培養(yǎng)基中每個稀釋度2管，每管中先加入30微克新霉素濾紙片或每毫升培養(yǎng)基加5氟尿嘧啶200400微克。暗視野顯微鏡檢查每周1次連5周，陰則每月2次連4月。病原鑒定：血清群用顯微凝集試驗（MAT），血清型用交叉凝集吸收試驗，分子生物學技術。69. 致病性鏈球菌：沉淀生長（肺鏈為混濁），在含腹水的培養(yǎng)物上生長良好，溶血株呈絮狀或顆粒狀生長，不溶血株呈均勻混濁生長。（一）化膿性鏈球菌：標本1天內(nèi)送，不超過2天。THB增菌肉湯、5%脫纖維羊血的胰酶消化大豆瓊脂培養(yǎng)基，血液和腦脊液應先增菌后接種平板，膿液、咽拭子直接種于血平板。A群鏈對桿菌肽敏感青霉素G為首選，抑環(huán)＞10cm敏感。(90%對人致病)B群鏈CAMP試驗陽性（鑒定指標35℃卵育），馬尿酸鈉水解試驗陽性D群鏈七葉甘水解試驗變黑色為陽性，%氯化鈉生長試驗(黃色)快速檢測:酶標免疫測定法、PCR（A群鏈致熱外毒素A，B，C基團speA，speB，speC各溶血素O基團slo）?？谷苎豋抗體溶血法、膠乳凝集法。（二）肺炎鏈球菌：℃pH —, 在含3%～5%的兔血清中生長良，血平板上草綠色a溶血環(huán)。如G+具有矛頭狀雙球菌可初步診斷。培養(yǎng)時間過長會自溶管底澄清，以奧普托欣試驗、分解菊糖，膽汁溶菌陽性區(qū)別于甲型溶血性鏈球菌。主要抗原有：蛋白質(zhì)抗原、多糖抗原、核蛋白抗原。+ 2%的脫氧膽酸3537℃培養(yǎng)2小時，管液清澈或濁度消失為陽性。氨基糖苷類合用，β溶鏈致病性最強，α溶鏈為條件致病菌。幾乎所有的肺鏈對Optochin敏感。（三）豬鏈球菌：人感染致?。耗X膜炎、心內(nèi)膜炎、敗血癥、中毒性休克。35個血清型。2型致病其屬于R群，屬特異基團tuf、種特異基團16SrRNA70. 腸球菌屬：能在高鹽（% NaCl）高堿（pH ）40%膽汁培養(yǎng)基上和10～45℃生長，是G+菌中僅次于葡萄球菌的重要院內(nèi)感染病菌。臨床上分離最高的是糞腸球菌，可分慶霉素高耐藥和低耐藥，一般用β內(nèi)酰胺類和氨基糖苷類聯(lián)合。71. 腦膜炎奈瑟菌：腦液中位于中性細胞內(nèi)，大多能分解葡萄糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，具有氧化酶和觸酶。能產(chǎn)生自溶菌不宜冰箱應立即保溫送檢，冬末春初為流行高峰，青霉素G為首選。依據(jù)莢膜分13個血清型，主要是ABC三個血清型及W13Y。通常采3管腦脊液（化學、微生物、細胞學）含添加劑的巧克力平板（CAP）和血瓊脂平板（BAP），如不能立即接種，則接種至預熱35℃的轉運—分離（TI）培養(yǎng)基中保溫通氣，可保存7天，血液采集后1分鐘內(nèi)注入肉湯中。鏡檢：腦脊液2000r/min離心20分鐘，沉淀物鏡檢腦膜炎雙球菌常在多核白細胞內(nèi)或細胞外。病原鑒定：Kovac氧化酶實驗10秒內(nèi)呈紫色陽性反應?？焖贆z測：乳膠凝集試驗測抗原。上清液可—20度凍存長時間。72. 淋球奈瑟菌：G人類是唯一天然宿主和傳染源。不耐干燥，35—36℃，—5%CO2生長,，對糖類生化最低只能發(fā)酵葡萄糖，主要有菌毛蛋白，脂多糖，外膜蛋白抗原。細菌培養(yǎng)是目前世衛(wèi)推薦的唯一方法，用培養(yǎng)法查女病人宮頸口表面分泌物。培養(yǎng)基中應含萬古霉素、多粘菌素B。標本接種在巧克力血瓊脂平板或TM培養(yǎng)基。急性期淋病菌常在白細胞內(nèi)，慢性期淋病菌常在白細胞外，在中性粒細胞內(nèi)有G性雙球菌具有診斷價值。：菌體形似彈簧，運動活潑，兩端尖直，有細胞壁和膜，原生質(zhì)圓柱體且有34根周漿鞭毛，G抵抗力極弱，對青霉素、四環(huán)素、紅霉素、砷劑敏感。標本：Ⅰ期梅毒取下疳滲出液（20分鐘內(nèi)查）；Ⅱ梅毒取梅毒疹滲出液或局部淋巴結抽出液；先天性梅毒取臍血；神經(jīng)梅毒取腦脊液。鏡檢：新鮮標本加蓋片暗視野顯微鏡下檢查，漿液不能含有紅細胞、微生物、組織碎片。熒光標記、ELISA普光下查，鍍銀染色螺旋體染成棕褐色光鏡下查。病原分離：人工培養(yǎng)基上不易生長，接種兔睪丸或眼前房內(nèi)繁殖，并能保持毒力。3435℃，分裂為3033小時。抗體檢測：產(chǎn)生特異性抗體、反應素抗體（表面脂質(zhì)引起），有非密螺和密螺抗原試驗。初篩試驗和療效觀察非密螺抗原試驗，正常牛心肌心脂質(zhì)為抗原測患者血清中反應素，判斷是否復發(fā)及再感染。最常用VDRE、RPR試驗。VDRE以膽固醇為載體。玻片凝集可定性和半定量，低倍觀察。RPR用未處理活性炭顆粒吸附VDRE抗原。專用紙片圈內(nèi)（18mm）可定性和半定量。密螺抗原試驗（證實試驗）FTAABS作為診斷梅毒“金標準”試驗。它是間接熒光抗體檢測方法，75. 腸產(chǎn)毒型（ETEC）：作用小腸，霍亂樣腸毒腹瀉，是5歲以下嬰幼兒和旅游者腹瀉的重要病原菌；腸毒素有耐熱和不耐熱，LTⅠ是引起人類主要的致病物質(zhì)，對熱不穩(wěn)定，65℃30分鐘被破壞，A亞單位是毒素的活動部位。耐熱腸毒素（ST）是通過激活腸黏膜細胞上的鳥甘環(huán)化酶，使胞內(nèi)CGMP量增多而導致腹瀉。腸致病型（EPEC）：作用小腸，水樣腹瀉，是嬰兒腹瀉主要病原菌。腸侵襲性型（EIEC）：作用大腸，志賀樣腹瀉，很像菌痢，發(fā)熱腹痛膿血便及里急后重。腸出血型（EHEC）：其中O157：H7可引起出血性腹瀉和溶血性尿毒癥，是4歲以下兒童急性腎功能衰的主要病原，8三月最高，北美多見。毒力因子：志賀樣毒素、溶血素、LEE毒力島、Vero毒素。腸集聚型（EAggEC）：嬰兒和旅游者腹瀉持續(xù)性水樣腹瀉。76. 志賀氏菌分：痢疾（A群），福氏（B群），鮑氏（C群）（半透明、光滑型菌落），宋內(nèi)（D群）（扁平粗糙型菌落）四群，我國以福氏和宋內(nèi)常見，無莢無芽無鞭，KIA：K/A，產(chǎn)氣＋/－，H2S－，MIU－＋/――，最后可用診斷血清作群型鑒定群血清型葡萄糖乳糖甘露醇鳥氨酸脫羧酶痢疾志賀菌A110+福氏B16++鮑氏C118++宋內(nèi)D1+++只有一個血清型，Ⅰ相和Ⅱ相加熱60℃10分鐘殺死，有強烈的內(nèi)毒素，作用于腸黏膜，使其通透性增高。糞口傳播，只局限于腸道，一般不進侵入血，發(fā)熱、腹痛、水樣腹瀉，后轉為膿血黏液便，伴有里急后重、下腹部疼痛。急性中毒性痢疾多見小兒。糞便不能即時送檢，需保存在30%甘油緩沖鹽水中。志賀菌表達黏附、穿透上皮細胞、胞內(nèi)繁殖、及擴散等活性的基因存在于大質(zhì)粒上。測志賀菌的侵襲力用Sereny試驗，接種于豚鼠眼結膜囊內(nèi)?？焖僭\斷：免疫染色法免疫熒光菌法協(xié)同凝集試驗膠乳凝集試驗分子生物學方法77. 傷寒與副傷寒菌：無芽無莢有鞭毛（除雞沙門）多數(shù)有菌毛，H2S可陽性，傷寒菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，菌體抗原有58種，鞭毛抗原有兩相即特異性和共同，表面抗原有Vi，M，5三種，變異有：SR，HO，vw，相位。傷寒沙門菌、甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌、希氏沙門菌。所致疾病4類型：（1）、腸熱癥：第一次菌血癥，發(fā)熱、不適、全身痛，與菌的感染劑量有關，通常潛伏期為2周，第二次菌血癥，高熱710天，緩脈、肝脾腫大，皮膚出現(xiàn)玫瑰疹，外周白細胞明顯下降，嚴重者有出血或腸穿孔等并發(fā)癥。（2）、胃腸炎（食物中毒）：由攝入大量＞108被鼠傷寒沙門菌(常引起食物中毒)、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌污染的食物引起。致病機制：細菌釋放的內(nèi)毒素。發(fā)熱、惡寒、嘔吐、腹痛、水樣腹瀉。（3）、敗血癥：無癥狀帶菌者：標本：第12周采血，接種于室溫＞20℃平衡血培養(yǎng)瓶，不能超過2小時送樣，不能即時送樣放在室溫，切勿放冰箱；第34周取糞便；第3周起還可取尿液；整病程均可取骨髓液。病原分離：血液和骨髓須按1：10加入血液需氧培養(yǎng)瓶或膽鹽葡萄糖肉湯增菌后接種于血瓊脂平板或營養(yǎng)瓊脂平板，SS—雙糖或三糖鐵（TSI）培養(yǎng)基。糞便接種麥康凱（MaC）/DHL、SS平板上，或SF增菌。病原鑒定：凡符合克氏雙糖鐵（KIA）斜面或三糖鐵（TSI）：不發(fā)酵乳糖、蔗糖，發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖甘露醇，產(chǎn)氣＋/－，H2S＋，吲哚尿素VP均－，硝酸鹽還原陽性，多價血清陽性的為沙門屬。尿素酶試驗與變形桿菌區(qū)別。胞內(nèi)寄生菌，臨床上主要為不明原因持續(xù)發(fā)熱。尿素半固體（MIU）。AF群沙門菌（O）多價血清作玻片凝集，陽性則選用O O O O9因子定群。血清學診斷：肥達試驗，一般傷寒沙門菌O凝集效價＞1：80、H＞1：160，副傷寒H＞1：160具有診斷意義。新一代疫苗：傷寒Vi莢膜多糖疫苗。78. 變形桿菌屬：普通，奇異，產(chǎn)黏。普羅威登斯屬有：產(chǎn)堿，斯氏，雷極，摩根菌只有摩氏摩根菌。有明顯多形性，呈球狀或絲狀，生長于10～43℃，在固體培養(yǎng)基上普通和奇異呈遷徙生長現(xiàn)象，三屬氧化酶陰性，苯丙氨酸脫氨酶陽性G桿菌，加入1%石炭酸或苯乙醇使終濃度為1g/%可抑制變形菌遷徒樣生長。能迅速分解尿素以區(qū)別沙門菌，外斐試驗輔助診斷立克次體79. 耶爾森氏菌（鼠疫）：有7種，鼠疫，假結核，小腸與致病有關。帶有3種質(zhì)粒，主要的致病決定基因由質(zhì)粒和染色體上的毒力島編碼。鼠疫耶爾森：有莢無芽無鞭，兩極濃染，28～30℃，～，液體中培養(yǎng)好，底部可有鐘乳石樣，常用1%溶血的