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正文內(nèi)容

[教育學]葉綠素熒光分析技術(shù)與應(yīng)用-文庫吧

2024-12-31 20:20 本頁面


【正文】 此外,該儀器還具有不怕其他強光源干擾的優(yōu)點,甚至可拿到光下現(xiàn)場操作。此類熒光計的代表性產(chǎn)品是西德 Walz公司生產(chǎn)的葉綠素熒光測定系統(tǒng)(PAM)。 (1) pact basic device (2) external rechargeable battery (3)battery charger (4) PC HP200 (5) special fiberoptics (6)leafclip holder permits simultaneous PAR and 176。 C measurements (7) external halogen lamp (8). dark leaf clip (9) distance leafclip (10)separate micro quantum/temperature sensor (11) pact tripod,used to mount basic device, leafclip holder and external halogen lamp (12). transport case Measuring light source: Red LED, 650 nm, standard intensity μmol ms PAR。 modulation frequency or 20 kHz。 Auto 20 kHz function Actinic light sources: Red LEDarray, 665 nm, max. 600 μmol ms PAR and farred LED, 730 nm, max. 15 W m Halogen lamp: 8 V/20 W, blueenriched, 710 nm, max. 8500 μmol ms PAR with continuous actinic illumination, max. 15000 μmol ms PAR during saturation pulses Signal detection: PINphotodiode protected by longpass filter (710 nm)。 selective window amplifier (patented) Measured parameters: Fo, Fm, Fm39。, F, Fo39。, Fv/Fm (max. Yield), F/Fm39。 (Yield), qP, qN, NPQ, PAR and 176。 C (using LeafClip Holder 2030B or Micro Quantum/ 2060M), ETR (. PAR x F/Fm39。) User interface: IBM/IBMpatible PC (80286 upwards) or HP200/P Palmtop PC。 connection via RS 232, 19200 baud。 keyboard operation。 monitor screen display Data acquisition: Via PC using DA2022 software Data output: Display and printout via PC。 analog output 0 to V Power supply: Internal rechargeable battery 12 V/ Ah, providing power for up to 500 yield measurements。 external 12 V battery。 Battery Charger 2020L Dimensions: 20 cm x cm x cm (L x W x H) Weight: 2 kg (incl. battery) 以反應(yīng)常數(shù)表示三種反應(yīng)的速度 kP 光化學反應(yīng) photo reaction kF 發(fā)射熒光 fluorescence kD 熱耗散 Energy dissipation 熒光產(chǎn)額可表示為: ΦF= kF/( kF+kP+kD ) 光合 量子產(chǎn)額可表示為: ΦP= kP/( kF+kP+kD ) 熱耗散產(chǎn)額 可表示為: ΦD= kD/( kF+kP+kD ) PSII作用中心完全開放時, kP最大, kF最低,此時的熒光稱為初始熒光 Fo。 PSII作用中心完全關(guān)閉時, kP=0, kF最大,此時的熒光稱為最大熒光 Fm。 Fm 與 Fo之差( FmFo=Fv)是因為光化學反應(yīng)進行而猝滅的熒光,稱為可變熒光 Fv. 顯然,光化學反應(yīng)的最大潛能可表示為: ΦP = (ΦFm ΦFo) / ΦFm = (Fm Fo)/Fm = Fv/Fm Fv/Fm 是反映光合效率的重要指標 分析: Fm 下降、 Fv/Fm下降、 Fo上升的原因 葉綠素熒光動力學的生物學意義 信號記錄 飽和光 光化光 測量光 遠紅光 光電檢測器 反應(yīng)杯 信號擴大器 長波截止濾光片 λ< 670 nm 短波截止濾光片 λ> 700 nm 光導纖維 PAM結(jié)構(gòu)示意圖 光合 作用 光化學 RC LHC 熱 MR Fo 光合 作用 光化學 RC LHC 熱 MR Fm SR 打斷! 光合 作用 光化學 RC LHC 熱 MR F AR 光合 作用 光化學 RC LHC 熱 MR Fm’ SR 打斷! AR 1 2 3 4 葉綠素熒光誘導動力學曲線 origin inflection(intermediate) peak dip peak quasisteady state a maximum terminal steady state PAM測量的熒光曲線 —— 飽和脈沖法 SP 葉綠素熒光術(shù)語 術(shù) 語 意 義 Fo 初始熒光 ,也稱基礎(chǔ)熒光,是在暗適應(yīng)狀態(tài)下當 PS II的所有反應(yīng)中心處于完全開放狀態(tài)( qP=1)并且所有的非光化學過程處于最小時(qN=0)的熒光產(chǎn)量 Fm 最大熒光 ,是在暗適應(yīng)狀態(tài)下當 PS II的所有反應(yīng)中心處于完全關(guān)閉狀態(tài) (qP=0)并且所有的非光化學過程處于最小時 (qN=0)的熒光產(chǎn)量 Fv 暗適應(yīng)狀態(tài)下當所有的非光化學過程處于最小時的 最大可變熒光 ,F(xiàn)v=FmFo Fp 暗適應(yīng)狀態(tài)下打開光化光后的最大熒光產(chǎn)量( Kautsky曲線中的 P點 ) Fm’ 在光適應(yīng)狀態(tài)下當 PS II的所有反應(yīng)中心處于關(guān)閉態(tài)( qP=0)并且所有的非光化學過程處于最優(yōu)態(tài)時( qN> 0)的熒光產(chǎn)量 Fo’ 在光適應(yīng)狀態(tài)下當 PS II的所有反應(yīng)中心處于開放態(tài)( qP=1)并且所有的非光化學過程處于最優(yōu)態(tài)時( qN> 0)的熒光產(chǎn)量。 Fv’ 任意光適應(yīng)狀態(tài)下的最大可變熒光, Fv’=Fm’Fo’ Fs 穩(wěn)態(tài)熒光產(chǎn)量,當外界條件保持恒定時,照射光化光后達穩(wěn)定值時的熒光產(chǎn)量( qP> 0, qN> 0) ? Fv/Fm: PS II的最大光化學量子產(chǎn)量 (Maximum quantum yield of PS II photochemistry),又叫原初光化學的最大產(chǎn)量, PS II光化學反應(yīng)的潛在產(chǎn)量, PS II潛在最大量子產(chǎn)量等 。反映了當所有的 PS II反應(yīng)中心均處于開放態(tài)時的量子產(chǎn)量 。 Fv/Fm=(FmFo)/Fm 。 0< Fv/Fm< 1 高等植物 ≈ 177。 。 藻類稍低 葉綠素熒光參數(shù) 當植物或藻類受到脅迫( Stress)時, Fv/Fm顯著下降 ! Fv/Fm, qP, qN, NPQ, Fv’/Fm’, ΦPS II, ETR等 ? qP:光化學淬滅( Photochemical quenching ) 即激發(fā)能被開放的反應(yīng)中心捕獲并轉(zhuǎn)化為化學能而導致的熒光淬滅,反映了光適應(yīng)狀態(tài)下 PS II進行光化學反應(yīng)的能力。 qP=(Fm’Fs)/Fv’=1(FsFo’)/(Fm’Fo’) 。 0≤qP< 1 葉綠素熒光參數(shù) ? qN: 可變 Chl熒光的非光化學淬滅 qN=(FvFv’)/Fv=1(Fm’Fo’)/(FmFo)。 0≤qN≤1 ? NPQ: Chl熒光的非光化學淬滅 NPQ=(FmFm’)/Fm’=Fm/Fm’1。 0≤NPQ< +∞ 不需測定 Fo’,適合野外調(diào)查 葉綠素熒光參數(shù) ?非光化學淬滅( Nonphotochemical quenching ): qN or NPQ ? Fv’/Fm’: PS II光化學的有效量子產(chǎn)量 ( Effective quantum yield of PS II photochemistry) ? Fv’/Fm’ =(Fm’Fo’)/Fm’ =1Fo’/Fm’ 。 0< Fv’/Fm’ < 1 ? 由于在光適應(yīng)狀態(tài)下非光化學過程得到活化,因此 Fv’/Fm’往往小于 Fv/Fm 葉綠素熒光參數(shù) 葉綠素熒光參數(shù) ? ΦPS II: PS II光化學能量轉(zhuǎn)換的有效量子產(chǎn)量 ( Effective quantum yield of photochemical energy conversion in PS II) 也叫 PS II(線性)電子傳遞的實際量子產(chǎn)量, PS II復合體吸收的每個光量子引起電子傳遞的效率, PS II光化學能量轉(zhuǎn)換的總量子產(chǎn)量, PS II能量轉(zhuǎn)換的實際效率, PS II光化學的量子效率,用于 PS II光化學的能量占 PS II天線系統(tǒng)吸收的總光能的比例,以及 PS II有效光化學量子產(chǎn)量 ? ΦPS II=(Fm’Fs)/Fm’=ΔF/Fm’=qPFv’/Fm’ 。 0≤ΦPS II < 1 ? 不需暗適應(yīng),不需測定 Fo’,適合野外調(diào)查 ? rETR: 相對電子傳遞速率 ( relative electron transport rate) ? ETR=PARΦPS II ? ETR隨 PAR的變化圖即為光響應(yīng)曲線 葉綠素熒光參數(shù) 熒光參數(shù)的意義 Fv/Fm 最大光化學效率 ΦPSII= (Fm’- Fs)/Fm’ PSⅡ 實際光化學效率 Fv’/Fm’ PSⅡ 最大天線轉(zhuǎn)化效率 P=ΦPSII PFD 光化學反應(yīng)速度 NPQ= Fm/Fm’- 1 非光化學猝滅 qp=(Fm’- F)/(Fm’- F0) 光化學猝滅系數(shù) qN=(Fm’- F0’)/(Fm- F0) 非光化學猝滅系數(shù) D=1- Fv’/Fm’ 吸收光能通過熱耗散消耗的部分 Fo: 固定熒光,初始熒光 (minimal fluorescence) 。也稱基礎(chǔ)熒光, 0水平熒光,是光系統(tǒng) II(PSII)反應(yīng)中心處于完全開放時的熒光產(chǎn)量,它與葉片葉綠素濃度有關(guān)。 Fm:最大熒光產(chǎn)量 (maximal fluorescence),是 PSII反應(yīng)中心處于完全關(guān)閉時的熒光產(chǎn)量??煞从惩ㄟ^ PSII的電子傳遞情況。通常葉片經(jīng)暗適應(yīng) 20min后測得。 F: 任意時間實際熒光產(chǎn)量 (actual flourescence at any time) Fs: 穩(wěn)態(tài)熒光產(chǎn)量 (fluorescence in stable state)。 Fm/Fo :用來反應(yīng) PSII的電子傳遞情況。 Fv= FmFo:為可變熒光 (variable fluorescence),反映了 QA的還原情況。 Fv/Fm:PSII最大光化學量子產(chǎn)量 (optimal/maximal photochemical efficiency of PSII in the dark)或 (optimal/maximal quantum yield of PSII),反映 PSII反應(yīng)中心內(nèi)稟光能轉(zhuǎn)換效率 (intrinsic PSII efficiency)或稱最大 PSII的光能轉(zhuǎn)換效率(optimal/maximal PSII efficiency),葉暗適應(yīng) 20min后測得。非脅迫條件下該參數(shù)的變化極小,不受物種和生長條件的影響,脅迫條件下該參數(shù)明顯下降。 Pv’/Fm’: PSII有效光化學量子產(chǎn)量 (photochemical efficiency of PSII in the dark),它反映開
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