阿司匹林聯(lián)合氯吡格雷抑制兔動脈粥樣硬化-畢業(yè)論-文庫吧
2025-05-18 11:55 本頁面
【正文】 lesterol and triglyceride levels,thereby reducing the symptoms of atherosclerosis in rabbits .Reduce macrophage percentage of positive cells ,while the bination of the two drugs inhibit atherosclerosis inceased significantly(P).There was no significant difference between the two drugs（ P） .The experimental results show that the bination of aspirin and clopidogrel has a good effect on inhibiting atherosclerosisi in rabbits. Key words:aspirin、 clopidogrel、 atherosclerosis 5 冠狀動脈發(fā)生粥樣硬化時，斑塊組織破裂，膠原蛋白流出，血小板被激活而聚集粘黏，進而形成血栓 [1]。阿司匹林和氯吡格雷是臨床上常見的抗血小板藥物，是治療缺血性腦卒的常用治療藥物[2]。氯吡格雷作為急性冠脈綜合征支架術(shù)后重要藥物 ,可降低血管壁的厚度，減輕炎癥，降低心血管疾病 [3]。以往臨床上常常采用單藥如阿司匹林或者氯吡格雷等抗血小板藥物治療，有研究報道表明，阿司匹林與氯吡格雷聯(lián)合使用治療缺血性腦血管病比單劑使用某一抗血小板藥的療效要好 [4]。隨著研究的深入，采用兩種不同的抗血小板藥物聯(lián)合使用治療動脈粥樣硬化病癥越來越受到研究者的關(guān)注[5]。本研究旨在研究阿司匹林與氯吡格雷聯(lián)用對抑制兔動脈粥樣硬化的療效。 1 材料 膽固醇（上海晶純實業(yè)有限公司），甘油氯吡格雷（武漢大華偉業(yè)醫(yī)藥化工集團），阿司匹林（無錫阿斯特拉公司），血脂測定試劑盒（上海名典生物工程公司），血清 C反應(yīng)蛋白（ CRP）測定試劑盒（ Sigma 公司），巨噬細(xì)胞單克隆抗體 RAM11（ Denmark 公司），大鼠平滑肌肌動蛋白單克隆抗體 1A4（ sigma 公司），免疫組織化學(xué) Power VisionTMPV6002 試劑盒（ Power Vision,USA） ,牛血清蛋白（中國科學(xué)院新疆化學(xué)所生化試劑廠）。 2 實驗方法 動物分組與建模 49只雄性新西蘭 白兔（約兩個月大，體重約 ,湖北中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供），將兔子分為五組：（ 1）空白對照組（ 9 只），（ 2）模型對照組（ 10 只），（ 3）阿司匹林組（ 10 只， 12mg/(），（ 4）氯吡格雷組（ 10只， 4mg/()）（ 5）聯(lián)合用藥組（ 10 只 ,氯吡格雷 4mg/()和阿司匹林12mg/()）。注意：阿司匹林和氯吡格雷都通過灌胃給藥，第一組和第二組則用等量的蒸餾水灌胃。第一組喂養(yǎng)普通飼料，后四組每只兔子均用高膽固醇飼料 (基礎(chǔ)飼料 +3%甘油 +2%膽固醇 )喂養(yǎng)，每只 100g 連續(xù)喂養(yǎng) 12 周。喂養(yǎng) 2天后，以 240mg/kg 靜脈注射 %的牛血清蛋白，每周一次，注射三次。每周測定一次體重，共測定 12 次。 血清血脂和 CRP 的含量測定 分別在實驗前（第 0周）、處死動物前（第 12 周）經(jīng)兔子耳緣靜脈腹腔取血。用酶學(xué)法分別測定血清總膽固醇（ TC）、甘油三酯（ TG）和高密度蛋白脂膽固醇（ HDLC）的濃度。采用 Friedewald 公式 ”低密度脂蛋白膽固醇LDLC(mmol/L)=TCHDLCTG/” 從而算出 LDLC 的濃度。在第 20 周末，取靜脈血利用固相酶聯(lián)免疫吸附 法測定測定血清 CRP 含量。 6 病理形態(tài)學(xué)觀察 在 12 周末用氣體栓塞法處死兔子，并且在無菌條件下取出動物的主動脈，剝離主動脈外模，用 10%甲醛溶液浸泡固定后用蘇丹 III 染色，用”天地病理、細(xì)胞圖像分析系統(tǒng) ()”測定斑塊面積和內(nèi)膜總面積，計算斑塊 /內(nèi)膜面積比。將動脈粥樣硬化最明顯的部分用常規(guī)石蠟包埋，將主動脈分為 5段，分別制成 5μ m切片，用蘇木素 伊紅（ HE）和 Weigert 氏彈力 Van Gieson 氏（ ET+VG）染色，用相同的圖像分析軟件測定內(nèi)膜厚度、中膜厚度，計算內(nèi)膜 /中膜厚度比。將最后兩段組主動脈組織的數(shù)據(jù)算出平均值，每組隨機取兩個動物主動脈上端組織放入 6%的戊二醛溶液中固定，利用掃描和透視電鏡（日本）觀察主動脈組織的超微結(jié)構(gòu)并判斷出結(jié)構(gòu)的改變。 免疫組織化學(xué)檢查 取主動脈弓遠(yuǎn)端主動脈 5mm 標(biāo)本連續(xù)切片，每個標(biāo)本取切片三張，總厚度為 4μ m，采用 EnVision 法進行免疫組織化學(xué)染色，蘇木精復(fù)染，中性樹膠封片。細(xì)胞類型的鑒定用小鼠抗兔 巨噬細(xì)胞單克隆抗體（ RAM11，稀釋度為 1:25），小鼠平滑肌肌動蛋白 單克隆抗體（ 1A4 稀釋度為 1:300），設(shè) PBS 代替一抗作為陰性對照，用抗 鼠 COX2多克隆抗體（稀釋度 1:400）來檢測 COX2的表達(dá)，棕黃色產(chǎn)物為陽性染色。在 200 倍鏡下隨機取 46 個視野，采用天地病理、細(xì)胞圖像分析系統(tǒng) TD2021(),算出陽性細(xì)胞百分率，重復(fù)操作兩次，最后結(jié)果取平均值。 統(tǒng)計學(xué)處理 采用 軟件包建立數(shù)據(jù)庫進行分析，計量數(shù)據(jù)都以均數(shù) 標(biāo)準(zhǔn)差（ ?x?s）表示，多組間比較用方差分析兩組間比較用 t 檢驗， P 為差異有顯著性意義。 3 結(jié)果 實驗結(jié)束時，去除死亡的動物和其他原因后，每組動物還有 9只 實驗前后各組動物血清 TC、 TG、 LDLC、 HDLC 水平變化（ ?x?s）（表 1） 組別 TC TG HDLC LDLC 空白對照組 第 0周 ? ? ? ? 第 12周 ? ? ? ? 模型對照組 第 0周 ? ? ? ? 第 12周 ? ? ? ? 阿司匹林組 第 0周 ? ? ? ? 第 12周 ? ? ? ? 氯吡格雷組 第 0 周 ? ? ? ? 第 12周 ? ? ? ? 7 兩藥聯(lián)用組 第 0 周 ? ? ? ? 第 12 周 56? ? ? ? Q P
畢業(yè)設(shè)計相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1