【正文】 ）M1粗多糖質(zhì)量 g，C 多糖濃度 ug/ml,V樣品溶液 （500ml ） ，M 2配置樣品溶液稱(chēng)取的粗多糖質(zhì)量(20㎎)，M 3大棗粉質(zhì)量 g 。制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),準(zhǔn)確稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖 20mg 于 500ml 容量瓶中,加水至刻度，分別吸取 、、 及 ,各以水補(bǔ)至 于2～9 號(hào)比色管，然后加入 6%苯酚 及濃硫酸 ，靜置 10min，搖勻，室溫放置 20min 以后，于 490nm 處測(cè)光吸光度，以 水于 1 號(hào)比色管按同樣顯色操作為空白，數(shù)據(jù)如表 。表 葡萄糖吸光度編號(hào) 葡萄糖液 ml 葡萄糖濃度 ug/ml 吸光度 A1 0 0 2 2 3 3 4 4 5 5 6 6 7 7 8 8 9 9 根據(jù)上表 ，以糖濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)如圖%10321?V四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第二章 實(shí)驗(yàn)部分12 圖 葡萄糖吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲圖 由圖 可得線(xiàn)性回歸方程 y=+ ，R 2= 所以本檢測(cè)方法中糖濃度和吸光度有良好的線(xiàn)性關(guān)系。樣品含量的測(cè)定：稱(chēng)取 20mg 粗多糖，配成 500ml 樣品溶液，去 樣品液，按 的步驟操作，測(cè)出吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程計(jì)算出多糖濃度 C，將濃度 C 代入公式（21） ，算出多糖得率。 準(zhǔn)確稱(chēng)取常溫下去核大棗粉 20g→放入具塞圓底燒瓶，加入適量蒸餾水(6:1)并混勻→90℃水浴浸提 8h(過(guò)程中要不時(shí)攪拌)→真空抽濾→保留清液，于 80℃水浴鍋蒸餾濃縮，濃縮 4 倍→濃縮提取液加 4 倍 95%乙醇沉淀多糖→真空抽濾→除去乙醇，得粗多糖→上述粗多糖用水溶解，再用 95%乙醇反復(fù)洗滌沉淀三次→無(wú)水乙醉洗滌沉淀多糖三次→最后將濾出物于 80℃水浴加熱千燥→得褐色大棗粗多糖→用苯酚硫酸法測(cè)定多糖的含量。設(shè)定濃縮液濃縮 4 倍，沉淀液加 4 倍，分別用甲醇，乙醇，丙酮沉淀，可得表 。表 不同有機(jī)溶劑對(duì)大棗多糖得率影響00 2 4 6 8 10濃度（ug/ml）吸光度（A）四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第二章 實(shí)驗(yàn)部分13有機(jī)溶劑 甲醇 乙醇 丙酮多糖得率% 由表 結(jié)果可以看出，不同有機(jī)溶劑對(duì)大棗多糖提取率影響不大，但從成本及食品的安全性考慮，本試驗(yàn)認(rèn)為用乙醇做沉淀劑較好。用乙醇作為沉淀劑，濃縮液濃縮 4 倍，沉淀劑和濃縮液的比例分別為1:2:3:4:5:1，可得表 。表 沉淀劑用量對(duì)大棗多糖得率的影響沉淀劑：濃縮液 (ml:ml) 多糖得率 %1:1 2:1 3..0523:1 4:1 5:1 乙醇與紅棗浸提液的體積比為 1:1 時(shí)，只能沉淀出少量紅棗多糖，當(dāng)體積比為 3:1 時(shí)，紅棗多糖已基本沉淀完全，當(dāng) 4:1 時(shí)達(dá)到最大，故在實(shí)驗(yàn)中選取乙醇與紅棗浸提液的體積比 4:1 為最佳沉淀比例。設(shè)定沉淀劑為乙醇，沉淀劑為濃縮液的 4 倍，濃縮液濃縮倍數(shù)為5，得表 。表 浸提液濃縮倍數(shù)對(duì)紅棗多糖沉淀的影響濃縮倍數(shù) 2 3 4 5多糖的得率% 表 結(jié)果顯示，隨著濃縮倍數(shù)的加大，多糖提取率提高，但所得多糖粗品的顏色也隨之加深，這可能是有些色素在乙醇濃度較大時(shí)，隨著多糖的沉淀而沉淀，但濃縮倍數(shù)小，多糖又不能完全沉淀，且消耗較多乙醇，綜合考慮，選擇最佳浸提液濃縮倍數(shù)為 4 倍。四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第二章 實(shí)驗(yàn)部分14準(zhǔn)確稱(chēng)取常溫下去核大棗粉 20g→放入具塞圓底燒瓶，加入適量蒸餾水(質(zhì)量比為 3:1~9:1)并混勻→ 一定溫度（45~ 95℃）下水浴浸提（1~ 10h）(過(guò)程中要不時(shí)攪拌)，按各種設(shè)定條件(料液比、溫度、時(shí)間)進(jìn)行水浴提取→真空抽濾→保留清液，于 80℃水浴鍋然餾濃縮，濃縮 4 倍→濃縮提取液加 4 倍 95%乙醇沉淀多糖→真空抽濾→除去乙醇，得粗多糖→上述粗多糖用水溶解，再用 95%乙醇反復(fù)洗滌沉淀三次→無(wú)水乙醉洗滌沉淀多糖三次→最后將濾出物于 80℃水浴加熱千燥→得褐色大棗粗多糖→用苯酚硫酸法測(cè)定多糖的含量。準(zhǔn)確稱(chēng)取常溫下去核大棗粉 20g→放入微波特制 500 ml 的樣品瓶，加入適量蒸餾水(質(zhì)量比為 4:1~12:1)并混勻→一定的微波功率（160~480W）和一定的時(shí)間（5~50min）下提取 (過(guò)程中要不時(shí)攪拌 )，按各種設(shè)定條件(液料比、功率、時(shí)間)進(jìn)行微波輔助提取→真空抽濾→保留清液，于 80℃水浴鍋然餾濃縮，濃縮 4 倍→濃縮提取液加 4 倍 95%乙醇沉淀多糖→真空抽濾→除去乙醇，得粗多糖→上述粗多糖用水溶解，再用 95%乙醇反復(fù)洗滌沉淀三次→無(wú)水乙醉洗滌沉淀多糖三次→最后將濾出物于 80℃水浴加熱千燥→得褐色大棗粗多糖→用苯酚硫酸法測(cè)定多糖的含量。由于實(shí)驗(yàn)條件的限制，實(shí)驗(yàn)室的超聲波功率是固定的 50W，不可調(diào)控，所以超聲波輔助只對(duì)時(shí)間、液料比進(jìn)行比較選擇最優(yōu)條件。準(zhǔn)確稱(chēng)取常溫下去核大棗粉 20g→放入超聲波特制 500ml 的樣品瓶，加入適量蒸餾水(質(zhì)量比為 3:1~9:1)并混勻→在超聲波功率為 50W 下提取一定的時(shí)間（10~120min） ，按各種設(shè)定條件(液料比、時(shí)間)進(jìn)行超聲波輔助提取→真空抽濾→保留清液，于 80℃水浴鍋蒸餾濃縮，濃縮 4 倍→濃縮提取液加 4 倍 95%乙醇沉淀多糖→真空抽濾→除去乙醇，得粗多糖→上述粗多糖用水溶解，再用95%乙醇反復(fù)洗滌沉淀三次→無(wú)水乙醉洗滌沉淀多糖三次→最后將濾出物于80℃水浴加熱千燥→得褐色大棗粗多糖→用苯酚硫酸法測(cè)定多糖的含量。四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第二章 實(shí)驗(yàn)部分15四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論15第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論設(shè)定液料比(g:g)為 6:1，溫度為 80℃，時(shí)間為10h,分別同時(shí)間依次對(duì)應(yīng)編號(hào)10，確定最佳提取時(shí)間，得表 。表 提取時(shí)間對(duì)多糖得率的影響編號(hào) 時(shí)間 h 得率 % 吸光度 A1 1 2 2 3 3 4 4 5 5 6 6 7 7 8 8 9 9 10 10 根據(jù)表 中的數(shù)據(jù)，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，得率為縱坐標(biāo)，得曲線(xiàn)圖 。四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論1640 2 4 6 8 10 12時(shí)間（h）得率（%）圖 提取時(shí)間對(duì)多糖得率的影響曲線(xiàn)圖從圖 可以看出在液料比(g:g)為 6:1 溫度為 80℃下，在 6h 內(nèi)多糖的得率隨著時(shí)間的增加，明顯增大，6h 后增速変緩，到達(dá) 8h 時(shí)多糖的得率達(dá)到了最大，在 8h 后隨著時(shí)間的增加，多糖得率反而有略微的下降。因此,水浴加熱提取法的最佳時(shí)間為 8h。(g:g)的選擇設(shè)定時(shí)間為 8h，溫度 80℃，液料比(g:g)為3:4:5:6:7:8:9:1，分別同液料比依次對(duì)應(yīng)編號(hào)7，確定最佳液料比。得表 。四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論17表 液料比(g:g)對(duì)多糖得率的影響編號(hào) 液料比 (g:g) 得率 % 吸光度 A1 3:1 2 4:1 3 5:1 4 6:1 5 7:1 6 8:1 7 9:1 根據(jù)表 中的數(shù)據(jù)，以液料比（g:g）為橫坐標(biāo)，多糖得率為縱坐標(biāo)，得曲線(xiàn)圖 40 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10液料比(g:g)得率(%)圖 液料比(g:g)對(duì)多糖得率的影響曲線(xiàn)圖從圖 可以看出在時(shí)間為 8h，溫度 80℃下，液料比(g:g)為 6:1 內(nèi)多糖的得率隨著液料比(g:g)的變大而增加，明顯增大，6:1 后得率有所下降。因此，水浴加熱提取法的最佳液料比(g:g)為 6:1四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論18設(shè)定液料比(g:g)為 6:1，時(shí)間 8h，溫度為450、560、670、780、890、95，分別同溫度依次編號(hào)11，確定最佳溫度。得表 。 表 提取溫度對(duì)多糖得率的影響編號(hào) 溫度 ℃ 得率 % 吸光度 A1 45 2 50 3 55 4 60 5 65 6 70 7 75 8 80 9 85 10 90 11 95 根據(jù)表 中的數(shù)據(jù)，以溫度為橫坐標(biāo)，多糖得率為縱坐標(biāo)，得曲線(xiàn)圖 。40 20 40 60 80 100溫度℃得率%圖 提取溫度對(duì)多糖得率的影響曲線(xiàn)圖四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論19由圖 可知在液料比(g:g)為 6:1 時(shí)間 8h 下，隨著著溫度的升高，多糖的提取率隨之提高，90℃時(shí)提取率最大。由于熱水浸提本身?xiàng)l件的限制，溫度不宜再升高，所以水提加熱法選取溫度為 90℃為宜。由上面的可知水浴浸提時(shí)間為 8h,液料比(g:g)為 6:1,溫度為 90℃，是最佳條件。 設(shè)定功率為 400W，液料比(g:g)8:1,時(shí)間為123450min，分別同時(shí)間依次編號(hào)為10，確定最佳時(shí)間。得表 。表 提取時(shí)間對(duì)多糖得率的影響編號(hào) 時(shí)間 min 得率 % 吸光度 A1 5 2 10 3 15 4 20 5 25 6 30 7 35 8 40 9 45 10 50 根據(jù)表 中的數(shù)據(jù)，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，多糖得率為縱坐標(biāo)，得曲線(xiàn)圖。四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論2040 10 20 30 40 50 60時(shí)間 min得率圖 提取時(shí)間對(duì)多糖得率的影響曲線(xiàn)圖由圖 34 可知在功率為 400W 液料比(g:g)為 8:1 時(shí)，隨著提取時(shí)間的增長(zhǎng)，前 25min 之內(nèi)多糖的提取率隨之增加，井且增加的比較明顯，在 25min 后，多糖提取率隨時(shí)間而增加的趨勢(shì)變緩，當(dāng)提取 30min 后基本不變，30min 時(shí)多糖已基本提取出來(lái)。因此，可選擇提取時(shí)間為 30min 。(g:g)對(duì)多糖得率的影響設(shè)定功率為 400W，時(shí)間為 30min ，液料比(g:g)為4:5:6:7:8:9:10:11:12:1，分別同液料比依次對(duì)應(yīng)編號(hào) 、9，確定液料比。得表 。 %四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論21表 液料比(g:g)對(duì)多糖得率的影響編號(hào) 液料比（ g:g） 得率 % 吸光度 A1 4:1 2 5:1 3 6:1 4 7:1 5 8:1 6 9:1 7 10:1 8 11:1 9 12:1 根據(jù)表 中的數(shù)據(jù)，以液料比（g:g）為橫坐標(biāo)，多糖得率為縱坐標(biāo)，得曲線(xiàn)圖 。40 2 4 6 8 10 12 14液料比(g:g)%得率圖 液料比(g:g)對(duì)多糖得率的影響曲線(xiàn)圖四川理工學(xué)院畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論22由圖 可知在功率為 400W 時(shí)間為 30min 時(shí)，液料比(g:g)在 7:1 前曲線(xiàn)變化明顯，在這之后增長(zhǎng)緩慢，在 10:1 時(shí)達(dá)到了最大，因此最佳的液料比(g:g)為10:1。設(shè)定時(shí)間為 30min 液料比(g:g)為 10:1，微波功率為160、23400、480W，分別同功率依次編號(hào)為 5，確定微波功率。得表 。表 微波功率對(duì)多糖得率的影響編號(hào) 功率 W 得率 % 吸光度 A1 160 2 240 3 320 4 400 5 480 根據(jù)表 中的數(shù)據(jù)，以微波功率為橫坐標(biāo)，多糖得率為縱坐標(biāo)，得曲線(xiàn)圖。40 100 200 300 400