[理學(xué)]第三章酶(已改無錯(cuò)字)
2023-04-22 08:56:47 本頁面
【正文】 Et]=[ES]時(shí)， mVv ? ? ?tm EkV 3?(4) 所以 Km為米氏常數(shù) 一級反應(yīng) 零級反應(yīng) ③米氏常數(shù) Km ? 上式表明 ,米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時(shí)的底物濃度 , 單位為 mol/L。 V= V[S] Km + [S] V 2 ＝ V [S] Km + [S] Km + [S] = 2[S] Km = [S] 若 V＝ V/2 米氏常數(shù) Km的意義 P90 ? Km是酶的特征物理常數(shù)，與酶的性質(zhì)和催化的底物有關(guān) 。 ? Km值表示酶與底物之間的親和力 當(dāng) k k2k3時(shí) ， km=(k2+ k3)/ k1 km≈k 2（ 分離能力） /k1（ 親合能力 ) Km越小，親和力越強(qiáng)，酶的催化活性越高；反之亦然。 ? 同一種酶的不同的底物有不同 Km值，其中 Km值最小的底物為最適底物。 E + S ES P + E k1 k2 k3 Km值與米氏方程的實(shí)際用途 ? 在已知 Km的情況下，應(yīng)用米氏方程可計(jì)算任意 [s]時(shí)的 v， 或任何 v下的[s]。（ 用 Km的倍數(shù)表示） ? 例如：要求 V=99%Vmax， 則 [S]應(yīng)為 ? 99%Vmax＝ Vmax [S] Km + [S] [S]=99Km V= ④ Km的求法 1 V = Km V 1 [S] + 1 V V= V[S] Km + [S] 取倒數(shù) 雙倒數(shù)作圖法(LineweaverBurk Plot) V = Vmax [S] Km + [S] K3 [S] Km + [S] [E] = V與 [E]成正比關(guān)系（ [S]足夠大， V=K3[E]） [E] V [S] Km ? 在一定的 pH下 , 酶具有最大的催化活性 ,通常稱此 pH為最適 pH， 一般酶的最適 pH為 68。 胃蛋白酶 精氨酸酶 唾液淀粉酶 ?酶的最適 pH不是酶的特征常數(shù) pH影響酶促反應(yīng)速度的原因 P91 ? 過酸過堿 導(dǎo)致酶蛋白變性失活； ? 影響底物分子的解離狀態(tài)； ? 影響酶分子的解離狀態(tài)甚至影響其活性中心的構(gòu)象 。 對酶促反應(yīng)速度的影響 ? 一方面溫度升高 ,酶促反應(yīng)速度加快； ? 另一方面 ,溫度升高 ,酶變性失活性。 ? 因此大多數(shù)酶都有一個(gè)最適溫度，在最適溫度條件下 ,反應(yīng)速度最大。 10 20 30 40 50 60 70 80 90020406080100T e m p e r a t u r e OCRelative Activity (%)? 酶若制成干粉，可放置在室溫下保存，而處于溶液狀態(tài)時(shí)必須放在冰箱里保存。 ? 原因何在？ ?實(shí)際應(yīng)用 ——貯存酶制劑 對酶促反應(yīng)速度的影響 凡能提高酶活性的物質(zhì)都稱為激活劑 。 按分子大小分為： ① 金屬離子或其它無機(jī)離子 ② 有機(jī)分子 （ SH酶的還原劑 、 EDTA等 ） ③ 蛋白質(zhì)分子 （ 如腸激酶之對胰蛋白酶 ） 酶分子中的金屬離子 ? 酶的輔助因子 ? 與酶蛋白結(jié)合緊密，在酶促反應(yīng)中傳遞電子，原子或功能團(tuán)，如 Fe2+/ Fe3+ 、 Cu+/Cu3?、Zn2+ 、 Mn2+、 Co2? 等 。 激活劑 ? 與酶的結(jié)合一般較松散，在溶液中，酶與這類 離子結(jié)合而被激活，如 Na+ 、 Mg2+、 Ca2+ 等。 對酶促反應(yīng)速度的影響 ? 酶的失活：因酶蛋白變性而引起酶活力喪失的現(xiàn)象。 ? 酶的抑制作用：因酶蛋白必需基團(tuán)化學(xué)性質(zhì)的改變而引起酶活力下降或喪失的作用。 P93 ? 能夠引起酶的抑制作用的化合物稱為抑制劑。 P93 ? 抑制劑與酶的作用方式有： 不可逆抑制 競爭性抑制 可逆抑制 非競爭性抑制 （ 1）不可逆抑制作用 ?抑制劑與酶反應(yīng)中心的活性基團(tuán)以共價(jià)形式結(jié)合，引起酶的永久性失活；不能用透析等方法除去抑制劑而恢復(fù)酶的活力。 ?常見的不可逆抑制劑 重金屬離子、有機(jī)汞、有機(jī)砷化合物、碘乙酸、碘乙酰胺等 (對 SH酶 )；氰化物 (與Fe2+結(jié)合 )；有機(jī)磷化合物（對含 SerOH的酶）。 二巰基丁二酸鈉 搶救重金屬鹽中毒的藥物 （二異丙基氟磷酸） 乙酰膽堿酯酶 如何緊急救治呢？ 排毒 ? 喝雞蛋清、牛奶 → 洗胃 ? 導(dǎo)泄、利尿 ? 血液灌流（“大換血”） ? 血液透析（清除游離狀態(tài)毒物） 找特效藥 （解 /氯磷定） （ 2）可逆抑制作用 ? 抑制劑與酶蛋白以非共價(jià)方式結(jié)合，引起酶的暫時(shí)性失活；可以用透析等方法除去抑制劑而恢復(fù)酶的活力 P89。 ? 根據(jù)抑制劑與底物的關(guān)系，可逆抑制可分為 2種類型：競爭性抑制、非競爭性抑制 ① 競爭性抑制 ? 這類抑制的抑制劑結(jié)構(gòu)與底物的結(jié)構(gòu)相似，它有同底物競爭與酶的活性部位結(jié)合的作用，因而妨礙底物與酶結(jié)合，減少酶的作用機(jī)會 P89。 ? 競爭性抑制通?？梢酝ㄟ^增大底物濃度，即提高底物的競爭能力來消除。 琥珀酸 延胡索酸 戊二酸 草酰乙酸 丙二酸 動力學(xué)方程式及雙倒數(shù)圖 P9495 ? 加入競爭性抑制劑后， Km變大， Vmax不變 ， 酶促反應(yīng)速度減小。 1 V ＝ （ 1 + ） Km Vmax [S] 1 + Vmax 1 [I] Ki V＝ Vmax[S
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1