【正文】 7．使用儀器時，應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，對違反操作規(guī)程的因管理不善致使儀器損壞，要追究當(dāng)事者責(zé)任。2．藥品試劑陳列整齊，放置有序、避光、防潮、通風(fēng)干燥，瓶簽完整，劇毒藥品加鎖存放、易燃、揮發(fā)、腐蝕品種單獨(dú)貯存。4．稱取藥品試劑應(yīng)按操作規(guī)范進(jìn)行，用后蓋好，必要時可封口或黑紙包裹，不使用過期或變質(zhì)藥品。2．大型器皿建立賬目，每年清查一次，一般低值易耗器皿損壞后隨時填寫損耗登記清單。4．器皿使用后隨時清洗，染菌后應(yīng)嚴(yán)格高壓滅菌，不得亂棄亂扔。2．在進(jìn)行高壓、干燥、消毒等工作時，工作人員不得擅自離現(xiàn)場，認(rèn)真觀察溫度、時間，蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時，不準(zhǔn)直接加熱，應(yīng)置水浴鍋上進(jìn)行。4．工作完畢，兩手用清水肥皂洗凈，必要時可用新潔爾滅、過氧乙酸泡手，然后用水沖洗，工作服應(yīng)經(jīng)常清洗，保持整潔，必要時高壓消毒。6．每日下班，尤其節(jié)假日前后認(rèn)真檢查水、電和正在使用的儀器設(shè)備，關(guān)好門窗，方可離去。2．實(shí)驗(yàn)室應(yīng)井然有序，不得存放實(shí)驗(yàn)室外及個人物品、儀器等，實(shí)驗(yàn)室用品要擺放合理，并有固定位置。4．實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有優(yōu)良的采光條件和照明設(shè)備。6．實(shí)驗(yàn)室布局要合理，一般實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有準(zhǔn)備間和無菌室，無菌室應(yīng)有良好的通風(fēng)條件，無菌室內(nèi)空氣測試應(yīng)基本達(dá)到無菌。第二節(jié)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)操作要求一、無菌操作要求食品微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員，必須有嚴(yán)格的無菌觀念，許多試驗(yàn)要求在無菌條件下進(jìn)行，主要原因：一是防止試驗(yàn)操作中人為污染樣品，二是保證工作人員安全，防止檢出的致病菌由于操作不當(dāng)造成個人污染。2．進(jìn)行接種食品樣品時，必須穿專用的工作服、帽及鞋子，應(yīng)放在無菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。4．進(jìn)行接種所用的吸管，平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點(diǎn)燃燒灼三次后使用。6．接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作，接種細(xì)菌或樣品時，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。8．吸管吸取菌液或樣品時，應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取，不得直接用口吸。2．無菌間內(nèi)應(yīng)保持清潔，工作后用消毒液消毒，擦拭工作臺面，不得存放與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。4．處理和接種食品標(biāo)本時，進(jìn)入無菌間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。（一）干熱和濕熱高壓蒸氣鍋滅菌方法1．滅菌前準(zhǔn)備（1）所有需要滅菌的物品首先應(yīng)清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴(yán)密，如用金屬筒應(yīng)將上面通氣孔打開。2．裝放（1）干熱滅菌器：裝放物品不可過擠，且不能接觸箱的四壁。3．設(shè)備檢查（1）檢查門的開關(guān)是否靈活，橡皮圈有無損壞，是否平整。（3）對有自動電子程序控制裝置的滅菌器，使用前應(yīng)檢查規(guī)定的程序，是否符合于進(jìn)行滅菌處理的要求。a．器械器皿應(yīng)清洗后再干燥，以防附著在表面的污物炭化。c．滅菌時將箱門關(guān)緊，接上電源，先將排氣孔打開約30min，排除滅菌器中的冷空氣，溫度升至160℃調(diào)節(jié)指示燈， –2h。(2)立式壓力蒸氣滅菌器的使用應(yīng)按下列步驟進(jìn)行：a．立式高壓鍋加水16L（重復(fù)使用時應(yīng)將水量補(bǔ)足，水變混濁需更換）.b．蓋好頂蓋擰緊，勿使漏氣；立式壓力鍋通上電源，并打開頂蓋上的排氣閥放掉冷氣（水沸騰后排氣1015min）。d．達(dá)到規(guī)定時間后，對需干燥的物品，立即打開排氣閥排出蒸氣，待壓力恢復(fù)到零時，自然冷卻至60℃后開蓋取物；如為液體物品，不要打開排氣閥，而應(yīng)立即將鍋去除熱源，待自然冷卻，壓力恢復(fù)至零，溫度降到60℃以下再開蓋取物，以防突然減壓液體劇烈沸騰或容器爆破。(2)壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時間見表1。（1）將欲滅菌物品置于鍋內(nèi)，蓋上頂蓋，打開排水口，使器內(nèi)余水排盡。（3）滅菌完畢關(guān)閉進(jìn)氣門，取出物品待冷至室溫溫度，放入37℃溫箱過夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可達(dá)到滅菌目的。(1)物品取出，隨即檢查包裝的完整性，若有破壞或棉塞脫掉，不可作為無菌物品使用。(3)培養(yǎng)基或試劑等，應(yīng)檢查是否符合達(dá)到滅菌后的色澤或狀態(tài)，未達(dá)到者應(yīng)廢棄。(5)取出的物品掉落在地或誤放不潔之處，或沾有水液，均視為受到污染，不可作為無菌物品使用。(7)凡屬合格物品，應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限。四、有毒有菌污物處理要求 微生物實(shí)驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實(shí)驗(yàn)室。2．經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物，必須經(jīng)121℃30min高壓滅菌。4．涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中，經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入消毒液中浸泡24 h后，煮沸洗滌。5．打碎的培養(yǎng)物，立即用消毒液噴灑和浸泡被污染部位，浸泡半小時后再擦拭干凈。五、培養(yǎng)基制備要求培養(yǎng)基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長。2．PH測定及調(diào)節(jié)：PH測定要在培養(yǎng)基冷至室溫時進(jìn)行，因在熱或冷的情況下，其PH有一定差異，當(dāng)測定好時，按計算量加入堿或酸混勻后，應(yīng)再測試一次。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高，故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多，以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量，指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入。4．盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器，使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。6．每批培養(yǎng)基制備好后，應(yīng)做無菌生長試驗(yàn)及所檢菌株生長試驗(yàn)。7．目前各種干燥培養(yǎng)基較多，每批需用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行生長試驗(yàn)或生化反應(yīng)觀察，各種培養(yǎng)基用相應(yīng)菌株生長試驗(yàn)良好后方可應(yīng)用，新購進(jìn)的或存放過久的干燥培養(yǎng)基，在配制時也應(yīng)測PH，使用時需根據(jù)產(chǎn)品說明書用量和方法進(jìn)行。六、樣品采集及處理要求1．所采集的檢驗(yàn)樣品一定要具有代表性，采樣時應(yīng)首先對該批食品原料、加工、運(yùn)輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，檢查是否有污染源存在。3．采樣應(yīng)注意無菌操作，容器必須滅菌，避免環(huán)境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌，更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物，以避免殺死樣品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應(yīng)用。5．檢驗(yàn)室收到樣品后，進(jìn)行登記（樣品名稱、送檢單位、數(shù)量、日期、編號等），觀察樣品的外觀，如果發(fā)現(xiàn)有下列情況之一者，可拒絕檢驗(yàn)。(2)瓶、袋裝食品已啟開者，食品已折碎不完整者，即失去原食品形狀者（食物中毒樣品除外）。對送檢符合要求的樣品，檢驗(yàn)室收到后，應(yīng)立即進(jìn)行檢驗(yàn)，如果條件不具備，應(yīng)置4℃冰箱存放，及時準(zhǔn)備創(chuàng)造條件，然后進(jìn)行檢驗(yàn)。(1)液體樣品接種時，應(yīng)充分混合均勻，按量吸取進(jìn)行接種。(3)瓶、袋裝食品應(yīng)用滅菌操作啟開，根據(jù)性狀選擇上述方法處理后接種。2．樣品檢驗(yàn)過程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結(jié)果等均要用文字寫出試驗(yàn)紀(jì)錄，以作為對結(jié)果分析、判定的依據(jù)，記錄要求詳細(xì)、清楚、真實(shí)、客觀、不得涂改