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微生物實驗室病原微生物評估報告-閱讀頁

2025-04-22 03:30本頁面
  

【正文】 程、適量、聯(lián)合。我國結(jié)核病防治規(guī)劃指南規(guī)定采用統(tǒng)一標準的化學(xué)治療方案。 下標數(shù)字表示每日用藥次數(shù);其余數(shù)字表示用藥月數(shù),斜線前數(shù)字表示前2個月,斜線后字表示后幾個月。② 初治規(guī)則治療失敗的患者,可用2S3H3Z3E3/6H3R3E3;③ 慢性排菌者可用敏感的一線藥與二線藥聯(lián)用,應(yīng)嚴密觀察藥物不良反應(yīng),療程以6~12個月為宜。對咯血患者,應(yīng)對癥治療,包括休息、止咳、鎮(zhèn)靜以及應(yīng)用止血藥如安絡(luò)血等。WHO將結(jié)核桿菌生物危害等級定為Ⅲ級。(1)安全防護 大多數(shù)實驗室獲得性結(jié)核病是由于處理感染者標本引起——可從痰、尿、組織、大便和其它體液標本中分離到結(jié)核桿菌。因此首先應(yīng)樹立全程防護的觀念,全面加強從事結(jié)核桿菌科研、檢測、試劑和疫苗生產(chǎn)機構(gòu)的生物安全管理。建立健全傳染病病原管理組織;制訂和完善傳染病實驗室生物安全的技術(shù)操作規(guī)范;加強可能暴露于結(jié)核桿菌或潛在感染性材料的相關(guān)業(yè)務(wù)人員生物安全知識培訓(xùn)和風(fēng)險和意識教育;切實落實各項管理制度,預(yù)防和控制實驗室等渠道造成結(jié)核桿菌感染和傳播;加強部門間溝通與合作,加強對高暴露實驗室工作人員的監(jiān)測工作,并保證他們能及時被發(fā)現(xiàn)與治療。為防止實驗過程產(chǎn)生的氣溶膠導(dǎo)致的實驗室感染,所有操作應(yīng)使用三級生物安全防護。病人留取標本應(yīng)在獨立的房間,應(yīng)定時作好房間消毒,保持通風(fēng)。檢驗人員應(yīng)穿戴防護服、口罩、手套等防護裝備,嚴格遵守實驗操作規(guī)程,實驗室空氣、實驗臺面應(yīng)定時消毒。尤其是痰標本進行涂片制作時,在打開標本容器、涂片、加熱固定時容易產(chǎn)生氣溶膠,為防止實驗過程中產(chǎn)生的氣溶膠導(dǎo)致實驗室感染,所有操作應(yīng)在二級生物安全柜中進行,并使用二級生物安全防護。藥物敏感性測定時,在磨菌、滴加菌液、接種培養(yǎng)物、燒灼接種環(huán)等操作過程有產(chǎn)生氣溶膠和意外濺灑的可能,實驗者有可能直接大劑量暴露細菌。并且操作者著二級生物防護用品。實驗過程中:1)如標本或標本的前消化處理液被打翻污染操作臺或地面,應(yīng)以吸滿75%已乙醇溶液的衛(wèi)生紙覆蓋污染區(qū),15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去;2)如污染物濺落到身體表面,或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生,應(yīng)立即停止實驗工作進行緊急處理:更換被污染的實驗服裝,皮膚表面用消毒液清洗,傷口以碘酒及酒精消毒,眼睛用無菌生理鹽水沖洗;3)如果發(fā)生菌液溢出、帶菌的培養(yǎng)管破碎等,造成中、小面積污染。(3)實驗室人員的防護從事結(jié)核桿菌檢測、研究的實驗室工作人員必須在身體狀況良好的情況下,才能進入實驗室工作,出現(xiàn)下列情況,不能進入:身體出現(xiàn)開放性損傷;患發(fā)熱性疾病;感冒、上呼吸道感染、或其他導(dǎo)致抵抗力下降的情況;妊娠、已經(jīng)在實驗室控制區(qū)域內(nèi)連續(xù)工作4h以上,或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。若操作者或其所在實驗室的工作人員在此期間出現(xiàn)與被操作病原微生物導(dǎo)致疾病類似的癥狀或者體征時,例如發(fā)熱、盜汗、咳嗽、咳痰、咯血或痰中帶血等癥狀,則應(yīng)被視為可能發(fā)生實驗室感染。蠟樣芽胞桿菌的生物危害評估報告一、細菌的傳播與致病 蠟樣芽胞桿菌在自然界分布廣泛,常存在于土壤、灰塵和污水中,植物和許多生熟食品中常見。在美國,炒米飯是引發(fā)蠟樣芽胞桿菌嘔吐型食物中毒的主要原因;在歐洲大都由甜點、肉餅、色拉和奶、肉類食品引起;在我國則主要與受污染的米飯或淀粉類制品有關(guān)。蠟樣芽胞桿菌作為一種食源性疾病的報導(dǎo)較多,在各種食品中的檢出率也較高,如1982年犬飼等對日本名古屋所采1641份食品樣品中,有193份檢出了該菌、陽性率為 %;1984年我國有關(guān)單位對南京市所采211份食品樣品中,有81份檢出了該菌,%。引起中毒的食品常于食前由于保存溫度不當,放置時間較長或食品經(jīng)加熱而殘存的芽胞以生長繁殖的條件,因而導(dǎo)致中毒。但也有在可疑食品中找不到蠟樣芽胞桿菌而引起食物中毒的情況,一般認為是由于蠟桿芽胞桿菌產(chǎn)生的熱穩(wěn)定毒素所致。蠟樣芽胞桿菌食物中毒在臨床上可分為嘔吐型和腹瀉型兩類。腹瀉型的潛伏期為615小時,癥狀以水瀉、腹痙攣、腹痛為主,有時會有惡心等癥狀,病程約24小時,這種類型的癥狀類似于產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的食物中毒。 蠟樣芽胞桿菌引起食物中毒是由于該菌可產(chǎn)生腸毒素。致嘔吐型綜合癥的腸毒素至今尚未提純,致腹瀉型綜合癥的腸毒素已提純,103。二、細菌的生物學(xué)特性 蠟樣芽胞桿菌分類為芽胞桿菌屬的第I群,該群有22個種。 蠟樣芽胞桿菌為革蘭氏陽性大桿菌,35μm,需氧或兼性需氧,生長6h即可形成原形芽胞,芽胞位于菌體的中心或次末端不突出菌體,菌體兩端較平整,多數(shù)呈鏈狀排列,與炭疽桿菌相似。它的生長溫度為2537℃,最佳溫度 3035℃。在普通瓊脂上生成的菌落較大,直徑310mm,灰白色、不透明,表面粗糙似毛玻璃狀或融蠟狀,邊緣常呈擴展狀故而得名。在甘露醇、卵黃多粘菌素(MYP)平板上,呈伊紅粉色菌落。此外蠟桿芽胞桿菌耐熱,其食物中毒菌株中的游離芽胞能耐受100℃30分鐘,而干熱滅菌需120℃60分鐘才能殺死。三、細菌的實驗室檢查及其它檢查采集可疑食物或收集糞便和嘔吐物進行直接涂片染色鏡檢和其他操作。加Butterfield磷酸鹽緩沖稀釋液450mL,以高速()均質(zhì) 2min。移取10mL均質(zhì)樣液(1:10稀釋)加到90mL空白液中,從102到106制備一系列稀釋液,充分混勻,并繼續(xù)稀釋直到106為止。將平板置30℃培養(yǎng)24小時,并檢查菌落周圍有沉淀圈者,表示產(chǎn)生卵磷脂酶。如果上述反應(yīng)不清晰,應(yīng)將平板再培養(yǎng)24小時后計數(shù),從MYP平板上挑取典型菌落5個或更多,移種到營養(yǎng)瓊脂斜面上供蠟樣芽胞桿菌證實試驗用。某些不適合用平板計數(shù)法的脫水淀粉類食品也可用此法檢驗。將培養(yǎng)管置30℃培養(yǎng)48177。將陽性管培養(yǎng)物劃線接種于MYP平板,于30℃培養(yǎng)2448小時。將可疑食物置無菌乳缽中,加適量生理鹽水研磨后,劃線接種于普通瓊脂平板或血瓊脂平板,若為嘔吐物可直接劃線接種于上述平板,于37℃培養(yǎng)。:1)動力試驗;2)根狀生長試驗;3)溶菌活性試驗;4)蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗:蠟樣芽胞桿菌有動力、強溶血、不形成根狀菌落,或不產(chǎn)生蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶。通過高溫殺菌或適當?shù)睦洳乜梢钥刂葡灅友堪麠U菌的增殖。四、細菌的防治 蠟樣芽胞桿菌所引起的食物中毒多因食品在食用前保存溫度較高(20℃以上)和放置時間較長,故對中毒的預(yù)防包括:由于蠟樣芽胞桿菌在15℃以下不繁殖,剩飯、剩菜應(yīng)放在低溫保存。因此,剩飯、剩菜在食用前一定要再加熱。若一旦發(fā)生了中毒,則立即停止食用可疑污染的食品,多飲水。腹瀉較重者可到醫(yī)院就診。(1)操作要求實驗時,未經(jīng)實驗室主任同意,限制或禁止進入實驗室。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。對于污染的銳器,必須時刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進行人工處理,要不將之小心放入不會被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。所有的培養(yǎng)物、儲存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進行消毒,如高壓滅菌。離開該系統(tǒng)進行消毒的物料,在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝,其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。進行適當?shù)尼t(yī)學(xué)評估、觀察、治療,保留書面記錄。污染的設(shè)備在送去修理、維護前,要按照相關(guān)的規(guī)定消毒;在離開設(shè)施轉(zhuǎn)移前,要按照相關(guān)的規(guī)定打包運輸。確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。當必須在生物安全柜外處理標本時,需采取面部保護措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。人員到非實驗室區(qū)域時,防護服必須留在實驗室內(nèi)??赡芙佑|潛在傳染源、被污染的表面或設(shè)備時,要戴手套。要備有帶滑石粉的乳膠手套。假結(jié)核棒狀桿菌的生物危害評估報告一、細菌的傳播與致病 假結(jié)核棒狀桿菌廣泛分布于自然界的水和土壤中,是一種條件致病菌。二、細菌的生物學(xué)特性 假結(jié)核棒狀桿菌屬于棒狀桿菌屬,是一種兼性厭氧,沒有芽胞、沒有莢膜,抗酸陰性的革蘭陽性桿菌。有時菌體染色不均勻呈柵欄狀排列。 所使用的培養(yǎng)基包括血和亞碲酸鉀,比如Hoyle 亞碲酸鹽培養(yǎng)基是一種很好的選擇性鑒別培養(yǎng)基。三、細菌的實驗室檢查及其它檢查:革蘭染色呈革蘭陽性桿菌、多型性、錐形或棒狀的細菌末端略有彎曲。有些菌體染色微弱或不均勻,呈珠狀。:硝酸鹽 陰性;尿素 陽性;4. PCR 是一種快速的試驗,可以在接受到菌株后34 小時內(nèi)完成檢測。,需要結(jié)合臨床癥狀考慮結(jié)果。實驗室在處理過程中可能會產(chǎn)生氣溶膠,所以懷疑假結(jié)核棒狀桿菌的菌株必須在生物安全柜內(nèi)處理。在運送時還應(yīng)當遵守郵政局的危險品運送手冊,如果以上的初步試驗提示該菌株是假結(jié)核棒狀桿菌,需立即通知上級相關(guān)單位,并根據(jù)實驗室安全手冊進行隔離。本屬細菌分布于全世界,是炎癥性痢疾的典型病原菌,很多地區(qū)5%~10%的腹瀉性疾病是由該菌屬所致。在英國臨床實驗室,大多數(shù)感染者為微生物學(xué)工作者。蒼蠅可作為機械性媒介,水源性傳播不常見?;謴?fù)期和亞臨床帶菌者是重要傳染源,但真正的長期帶菌者罕見。志賀菌可穿入低位腸段的粘膜,引起粘液分泌,充血,白細胞浸潤,水腫,并常有表淺粘膜潰瘍。由志賀菌感染所導(dǎo)致的癥狀包括:(1)急性細菌性痢疾 經(jīng)潛伏期1~4日,幼兒的起病突然,表現(xiàn)為發(fā)熱,煩躁不安,嗜睡,厭食,惡心或嘔吐,腹瀉,腹痛和腹脹以及里急后重。若不治療,患兒可在12日內(nèi)死亡;若患兒存活,非粘液性腹瀉,急于排便,系軟便或含有粘液,膿及常有血液的水瀉。成人患病??勺杂狠p者4~8日,重者3~6周。除此以外,還可發(fā)生繼發(fā)性細菌感染,特別是衰弱和脫水的病人。小兒志賀菌病可并發(fā)溶血性尿毒癥綜合征。但有HLAB27基因型的病人在志賀菌病后常常比較容易發(fā)生關(guān)節(jié)炎或明顯的Reiter綜合征。它們均為革蘭氏陰性桿菌,菌體短小、無芽胞無鞭毛,有菌毛,在胞質(zhì)中存在著大小兩種質(zhì)粒,與該菌的侵襲性和耐藥性有關(guān)。它們最適的生長溫度為37℃,~,對營養(yǎng)的要求不高,可在普通培養(yǎng)基上生長。志賀菌屬沒有H抗原,但有O抗原以及部分菌種的K抗原。正是依據(jù)O抗原的不同以及生化反應(yīng)的結(jié)果將志賀菌分成了4個血清群和32個血清型;而K抗原存在于A群和C群的全部菌型以及B群種的部分菌種中,不耐熱,對分類無意義,但它的存在將阻斷O抗原與相應(yīng)抗血清的凝集作用,故可先以100℃60min破壞之。 A亞單位鏈為毒性部分能抑制蛋白質(zhì)的合成 。ST和內(nèi)毒素的持續(xù)存在的聯(lián)合作用可能與志賀菌感染的溶血性尿毒綜合征等并發(fā)癥有關(guān)。急性期有發(fā)熱、腹痛、腹瀉、里急后重及黏液膿血便,左下腹明顯壓痛。確診則依賴于糞便培養(yǎng)出痢疾桿菌。這些拭子及大便標本均應(yīng)立即鏡檢及培養(yǎng),標本接種于腸道桿菌選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基上,℃培養(yǎng)1824h,取可疑菌落進行生化反應(yīng)和血清鑒定,以確定菌群和菌型;如不能立即培養(yǎng),可放于30%甘油緩沖鹽水保存液中。鏡檢有大量膿細胞或白細胞及紅細胞,如有巨噬細胞有助于診斷。糞便免疫學(xué)檢查與細菌培養(yǎng)比較具有早期快速診斷的優(yōu)點,但由于糞便中抗原成分復(fù)雜,易出現(xiàn)假陽性,故目前臨床上尚未廣泛應(yīng)用。:將受試菌 37℃1824h 制備菌液(109/ml) 接種豚鼠結(jié)膜:發(fā)生炎癥,則Senery試驗陽性,說明受試菌有毒力,在顯微鏡觀察有無凝集現(xiàn)象。,測定病人糞便中或增菌培養(yǎng)液中細菌及其可溶性抗原。、細菌性胃腸型食物中毒、其它病原菌引起的腸道感染、急性壞死性出血性腸炎及腸套疊相鑒別。臟衣和床單應(yīng)放在帶蓋的桶內(nèi)用肥皂水浸泡然后再煮沸消毒。對病人和帶菌者應(yīng)采取相應(yīng)的隔離措施(特別是對糞便的隔離)。Sd株口服后,因腸道無鏈霉素它不生長也不立即死亡,而產(chǎn)生SIgA,但只對同型菌的再感染有保護作用,故使用此菌苗時應(yīng)考慮到當?shù)爻R娏餍芯?。在治療方面: 腹瀉常引起等張性脫水(鹽和水的丟失相等)。過早地應(yīng)用高滲性液體(牛奶,鼻飼、自制電解質(zhì)混合液)可引起高張性損害,包括抽搐。此外,早期用適當?shù)目晌盏目咕幬镏委?可明顯減輕癥狀和減少志賀菌的排出:對兒童,TMPSMX中的TMP成分4mg/kg每12小時1次為首選方案;對成人,用雙倍加強片(TMP320mg)每12小時1次。很多志賀菌株可能對氨芐青霉素和四環(huán)素耐藥。四、細菌的生物安全防護根據(jù)《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關(guān)規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)志賀菌屬于三類、BSL2。不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。所有的操作過程應(yīng)盡量細心,避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。注射和吸取感染材料時,只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中,轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前,應(yīng)按照相關(guān)的規(guī)定進行消毒。轉(zhuǎn)移到就近實驗室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi),密封運出實驗室。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時,要立即向?qū)嶒炇抑魅螆蟾?。按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后,實驗室設(shè)備和工作臺面應(yīng)當使用有效的消毒劑消毒。(2)安全設(shè)備正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設(shè)施、或物理遏制裝置。涉及高濃度或大體積的傳染源時,若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機,若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開,則可在開放實驗室內(nèi)離心。在實驗室內(nèi),必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。防護服可以在實驗室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用,不能用于接觸“潔凈”的表面(鍵盤、電話等),也不應(yīng)當戴著到實驗室外。脫掉手套后,要洗手。它是存在于人和動物腸道內(nèi)的條件致病菌,易致泌尿道和呼吸道感染,它也可發(fā)生傷口感染、菌血癥和敗血癥,尤其易發(fā)于下列危險因素的患者:如長期住院(特別是在ICU)、患嚴重疾病、長期應(yīng)用廣譜抗生素、進行侵襲性操作、應(yīng)用放療或化療及免疫抵制劑等患者。二、細菌的生物學(xué)特性陰溝腸桿菌屬于腸桿
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