【正文】 漏密閉的容器中儲運。 樣品離心使用密封的離心杯，以防濺出。 當傳染性標本溢出或濺出后，應有專業(yè)人員立即消毒和清理。 離開實驗室前，必須按有關規(guī)定消毒雙手。 實驗器材的分類消毒：將使用后的銳器方入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內，121℃高壓消毒 30 分鐘。處理時應避免皮膚損傷。 個人防護用品消毒：實驗結束，將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等 121℃高壓消毒30 分鐘。 手的消毒：用典伏或 75％的乙醇擦拭，作用 13 分鐘。 這張消毒：應用 80ml/m3 福爾馬林，密閉熏蒸消毒 6 小時后方可帶出。 廢棄物的處理：實驗的廢棄物應放入適當?shù)娜萜鲀龋偷?121℃高壓消毒 30 分鐘，消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。 按照操作規(guī)程使用高壓鍋 接通電源，合上高壓滅菌器左側總電源開關。 設定滅菌溫度，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調節(jié)到滅菌所需溫度，然后按“實行”鍵，把所設溫度存進程序。 按“實行”鍵執(zhí)行滅菌程序，此時“滅菌”燈閃爍。 在確認壓力表的 顯示壓力降到 0 刻度時，打開高壓滅菌器頂蓋，取出滅菌樣品。每 1 年保養(yǎng)一次，每月檢測一次消毒效果。放好被消毒滅菌的物品后，高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。 高壓滅菌安全操作步驟 在滅菌前將雙層的高壓滅菌帶包好，廢物在滅菌袋中的體積不能超過袋子體積的 3/4，滅菌袋用橡皮帶捆好，但不能扎得太死，否則蒸汽不能進入所料袋內影響滅菌效果。如果滅菌器正在使用或優(yōu)于其它原因不能馬上使用，則廢物必須放在滅菌袋內捆好并放在實驗室內，在存放期間確保袋子無損壞。 當開始滅菌時必須確信滅菌國內水量合適，高壓溫度和時間設置正確。 十二、 實驗室應急處置預案 1．目的 規(guī)范緊急情況的 處理工作。 3．職責 遇有緊急情況所有工作人員嚴格按此規(guī)程處理。例如實驗過程中，由于標本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等，應立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，等消毒液徹底浸泡 30 分鐘后，對污染的物品進行處理。并填寫生物安全二級實驗室意外情況登記與處理記錄表，實驗室負責人應指導這些處理行動，并檢查處理效果。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損的皮膚表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器反復沖洗。受到傷害的人員應立即就醫(yī)，并將受傷原因及接觸微生物的情況通報負責人。在其身體狀況未恢復之前，不得重新進入實驗室工作。 傷害事故可 能導致被強毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途徑接觸到感染性液體，首先進行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂或清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。暴露的粘膜應盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。 實驗室事故可能造成氣溶 膠污染，如壓力容器或管道破裂等，立即關閉實驗室，疏散現(xiàn)場的所有人員，對所有暴露人員提出相應的醫(yī)學建議。至少在 1小時內，任何人員不得進入現(xiàn)場，以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。在生物安全員的監(jiān)督下進行消毒、凈化處理；執(zhí)行這項工作時應當穿戴合適的防護服及呼吸防護用具。 培養(yǎng)物等傳染性物質的破碎 被傳染性物質物質污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時，用布或紙巾覆蓋，爾 后將消毒劑傾倒其上，放置 30 分鐘。污染區(qū)域應當用消毒劑清洗。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把，放入污染廢棄物容器中。 如果實驗室的紀錄表格、其他印刷品或書面材料遭到污染，在妥善轉抄后或烤后，應當將其棄入污染廢棄物容器。如果懷疑發(fā)生了破損，應當將其蓋子擰松；爾后，將整個離心杯高壓滅 菌。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報告實驗室負責人及生物安全員，視破壞種類按照上述方法進行處理，并詳細填寫意外情況登記與處理記錄表。 15 艾滋病病毒抗體 ELISA實驗。采血時注意安全，用一次性注射器謹慎操作，防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。同時做好記錄。試管上標明姓名、時間、編號，將試管放入專門帶蓋的容器內，容器的材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質，以免碰碎，容器外標有HIV檢測專用字樣和生物危害標志。這樣同時附送檢單。 對從其他實驗室送來的樣品，檢查并注明送檢單與標本記錄的符合、樣品管破損、溢漏等情況。檢查并記錄樣品的質量有無嚴重溶血、細菌污染、血脂過多以及黃疸等情況。 實驗準備 將試劑從冰箱中取出，按試劑盒要求時間恢復室溫。 按照試劑盒要求準備實驗原始記錄表，標明空白、陰性對照、陽性對照、外部質控血清以及檢測樣本的位置：登記日期和實驗起止時間，記錄環(huán)境條件及試劑盒廠家、批號、效期：整個實驗過程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細登記。 加樣和稀釋 根據(jù)樣品數(shù)量將合適數(shù)量的酶標板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機，每道上的酶標板條必須保持完整 {不足部分可用廢棄的微孔添充 }，檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符，按照 原始記錄表表明的位置加入各種質控品和檢測樣品，注意：空白只加標本稀釋液。加樣要準確，小心不要使吸頭碰著酶標板空上是包被抗原。 溫育 貼好封板膜，按照試劑盒要求的溫度和時間進行溫育，最好選擇濕育方法。按照試劑盒的要求，選擇、修改洗扳方式、洗滌次數(shù)和浸泡時間， 根據(jù)所用酶標板的條數(shù)確定洗板道數(shù)，根據(jù)酶標板的位置調節(jié)洗頭的位置，然后開始洗板，洗板結束后用蒸餾水沖洗管道。 加底物洗好板后應立即加底物，需加自配的底物應現(xiàn)配現(xiàn)用。 酶標儀讀物 按照試劑盒的要求選擇濾光片，確定空白孔位置，選擇合適達的打印報告 16 格式，讀數(shù)并打印結果。 結果判斷計算 根據(jù)試劑盒說明書要求的陰陽對照 OD值范圍判斷實驗的準確性，陰陽性對照 OD 值在范圍之內，試驗方可成立，超出范圍，試驗失敗，整個實驗重做。 以上兩個條件俊被接受后，根據(jù)試劑盒要求計算 cutoff 值。 10%的標本為灰色帶反應。 結果登記和報告 將試驗結果登記在級路標和標本試 劑表上，將 OD 值打印結果貼在原始記錄表上，檢查原始記錄表是否填寫完整，操作者，復核者簽字。 標本留存轉送 陰性標本收集血清冷凍保存一年。 4. 支持性文件 全國艾滋病監(jiān)測工作規(guī)范 艾滋病實驗室安全操作及防護措施 （二）、結核桿菌實驗室生物安全規(guī)程 （ 1）實驗室入口處必須貼上生物危險標志，注明危險因子，生物安全級別，試驗室負責人和相關負責 人姓名和電話。 （ 3）無論進入實驗室時間長短，必須填寫工作日志。 （ 4）進行結核菌操作時，需有兩名工作人員同時進入實驗室，盡量避免單獨工作。 （ 6）試驗室人員應做結核菌素試驗，試驗結果為陰性時，應接種卡介苗，并做好登記記錄。 （ 1） 標本采集人員的防護：痰標本有病人自行留取，采集咽拭子等特殊標本，采集人員應穿防護服，戴一次性口罩，帽子，戴醫(yī)用手術手套。 痰標本需留置在特制的痰盒內（直徑 4cm，高 2cm的光口蓋密閉的塑料盒），并放置在專用的痰標本運送箱內 ,運送過程中切勿倒置 ,嚴防痰液外溢。 驗操作安全要求 （ 1）結核病細菌學實驗室要求 結核病細菌學實驗室應為生物安全Ⅲ級實驗室 ,用于臨床診斷 ,教學 ,屬中度危險 .應具備安全設備 ,緩沖間實驗室條件應滿足工作任務的要求 ,有完善的試驗設施 ,試驗室的環(huán)境應清潔 ,衛(wèi)生 ,安靜 ,無污染 ,試驗室內的管線 17 設置應整齊 ,要有安全管理措施和報警 ,應積及急救設施 ,房間數(shù)量不少于七間 ,包括實驗室準備室 ,培養(yǎng)機制備室 ,顯微鏡檢查室 ,圖片檢查室 ,接種室 ,培養(yǎng)室高壓消毒室等。 （ 2）實驗室儀器設備及功能的要求 結核菌素檢查時必須在二級生物安全柜內進行 ,無菌操作內禁放雜物 , 并應制定地面 ,門窗 ,墻壁 ,設施等的定期清潔 ,滅菌規(guī)程 ,操作間沒有紫外線燈 。一起使用人應經(jīng)考核合格后方可操作儀器。 （ 4）進入實驗室的規(guī)章制度 。 ,需有兩名工作人員同時進入實驗室。 ,檢查各實驗室水 ,電 ,防火設備 ,打開防盜報警裝置。如出現(xiàn)身體不適現(xiàn)象 ,應在實驗室所在地進行醫(yī)學觀察 .因工作原因必須離開時 ,用口服抗結核藥物預防。 ,如污染物濺落在身體表面 ,或有割傷 ,燒傷 ,燙傷 ,感染動物咬傷等情況 ,應立即進行緊急處理 :皮膚表 面用消毒液清洗 ,傷口以碘酒究竟消毒 ,眼睛用無菌生理鹽水沖洗。 ,如發(fā)生氣溶膠污染 ,應立即關閉實驗室 ,用消毒液噴霧和紫外線照射污染的區(qū)域 ,24 小時后再進行終末消毒。 （ 6）污染物處理及消毒 ,吸管及其他器械 ,需裝載加蓋不漏的容器內 ,經(jīng)高壓滅菌后 ,拿出實驗室。 :先用消毒液浸泡手套 5 分鐘 ,依次除去口罩 ,眼鏡 ,防護服 ,三角頭巾 ,鞋 ,在浸泡手套后脫去手套。 ,未經(jīng)消毒的污水禁止直接排入公共排水系統(tǒng) .以消毒的污物集中倒入專用污物坑(污物坑的深度 23 米 ),不許混入居民生活垃圾。應在 4℃專用冰箱內保存 ,并要求雙人雙鎖 ,有嚴格的菌株領取和銷