【正文】 化合物的反應(yīng)主要以離子交換方式進行，假設(shè)以RA+代表陽離子交換劑，其中 A+為反離子， A+能夠與溶液中的陽離子 B+發(fā)生可逆的交換反應(yīng)，反應(yīng)式為： RA++B+ RB++A+ 疏水作用層析 ：經(jīng)溴化氰活化的瓊脂糖與烷基氨反應(yīng)，生成改性的瓊脂糖，具有新的吸附能力，并且對蛋白質(zhì)還有分辨能力，主要是由于蛋白質(zhì)表面的疏水區(qū)域與載體上烷基殘基的疏水區(qū)域相互作用的結(jié)果，這樣就通過疏水基團的疏水力分離生物大分子。 u 簡述凝膠色譜的工作原理？ 電泳 、動電現(xiàn)象 荷電的膠體粒子在電場中的移動 (當(dāng)電場沿切線方向作用于帶電表面時，雙電層的兩部分分別受到相反方向的作用力，膠粒在分散介質(zhì)中朝著某一電極遷移的現(xiàn)象 ，稱為 “電泳 ) 表面帶電的膠粒與周 圍介質(zhì)（固 液或液 液界面）在外加電場作用下作相對運動而產(chǎn)生的電場現(xiàn)象，主要類型有 電泳、電滲、流動電位與沉降電位 等四種動電現(xiàn)象。 因此 ，在使用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行蛋白質(zhì)分離時，在電泳過程中不僅取決于蛋白質(zhì)的電荷密度，還取決于蛋白質(zhì)的尺寸和形狀 。在蛋白質(zhì)溶解液中，加入 SDS 和疏基乙醇，巰基乙醇可使蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵還原，使多肽分成單個亞單位。 過程：與 PAGE 相似，不同之處在于 3. 電泳條件 (1)瓊脂糖凝膠電泳 操作簡單 ，電泳速度快，樣品不需事先處理就可進行電泳。 (3)瓊脂糖 透 明無紫外吸收 ，電泳過程和結(jié)果可直接用紫外光燈監(jiān)測及定量測定。制成干膜可長期保存。 載體兩性電解質(zhì) pH 梯度等電聚焦是在支持介質(zhì)中加入載體兩性電解質(zhì)，通以直流電后在兩極之間形成穩(wěn)定、連續(xù)和線性的 pH 梯度，當(dāng)帶電的蛋白質(zhì)分子進入該體系時，便會產(chǎn)生移動，并聚集于相當(dāng)于其等電點的位置。（通常采用 IEF及 SDSPAGE） 特點： 被分離物質(zhì)等電點或者分子量相似，或等電點和分子質(zhì)量有互補作用。 凝膠濃度第一向 第二向。電泳過程中，電滲流（ EOF）對物質(zhì)的有效分離起著重要的作用，EOF 是一種流體層遷移現(xiàn)象，它產(chǎn)生的與毛細管內(nèi)壁和溶液界面之間形成的 雙電層有關(guān)。 結(jié)晶 ? ？ ? 固體物質(zhì)以晶體狀態(tài)從蒸氣或溶液中析出的過程 ? ？ ? （ 1）只有同類分子或離子才能排列成晶體，因此結(jié)晶過程有良好的選擇性。 ? （ 3）結(jié)晶過程具有成本低、設(shè)備簡單、操作方便，廣泛應(yīng)用于氨基酸、有機酸、抗生素、維生素、核酸等產(chǎn)品的精制。 C2微小顆粒（晶核）的溶解度 C1正常晶體的溶解度 σ 晶體與溶液間的表面張力；ρ 晶體密度 L1正常晶體的半徑； L2普通晶體半 徑 R氣體常數(shù)； T絕對溫度 M溶質(zhì)的相對分子質(zhì)量 ? ？ ? SS 曲線下方為穩(wěn)定區(qū)，在該區(qū)域任意一點溶液均是穩(wěn)定的；在 SS 曲線和 TT曲線之間的區(qū)域為亞穩(wěn)定區(qū)， ? (1)不采取一定的手段（如加入晶核），溶液可長時間保持穩(wěn)定； ? (2)加入晶核后，溶質(zhì)在晶核周圍聚集、排列，溶質(zhì)濃度降低，并降至 SS 線； ? 飽和溶解度曲線和過飽和溶解度曲線之間的區(qū)域，可以進一步劃分刺激結(jié)晶區(qū)和養(yǎng)晶區(qū)。實質(zhì)上，在飽和溶液中，晶核是處于一種形成 — 溶解 — 再形成的動態(tài)平衡之中，只有達到一定的過飽和度以后，晶核才能夠穩(wěn) 定存在。溶質(zhì)溶解度與溫度、溶質(zhì)分散度（晶體大小）？ ? ？ ? 1）熱飽和溶液冷卻（等溶劑結(jié)晶） ? 適用于溶解度隨溫度升高而增加的體系；同時，溶解度隨溫度變化的幅度要適中； ? 2）部分溶劑蒸發(fā)法（等溫結(jié)晶法） ? 適用于溶解度隨溫度降低變化不大的體系，或隨溫度升高溶解 度降低的體系； ? 3）真空蒸發(fā)冷卻法 ? 使溶劑在真空下迅速蒸發(fā)，并結(jié)合絕熱冷卻，是結(jié)合冷卻和部分溶劑蒸發(fā) 兩種方法的一種結(jié)晶方法。 ? 6） 冷卻法 ? 不除去溶劑，而是使溶液冷卻降溫成為過飽和溶液 ? 7） 鹽析結(jié)晶法 ? 向物系中加入某種物質(zhì)，從而使溶質(zhì)在溶劑中的溶解度降低，形成過飽和溶液而結(jié)晶析出。 ? ? ？其具體意義何在？ ? 認為晶體生長包括 2 個過程： 1）分子擴散過程，溶質(zhì)從溶液主體相擴散通過一層液膜，竟如晶體表面； 2）表面化學(xué)反應(yīng)，固液界面上溶液中的物質(zhì)與晶體表面上的物質(zhì)結(jié)合或沉積，形成一定大小的規(guī)則晶體。 ? 1）在晶體表面與溶液主體之間始終存在著一層邊界層，即在晶體 便面和溶液之間存在著濃度推動力。 ? 3）由于推動力是粒子在晶體表面沉積，這種沉積成為表面結(jié)合過程，即溶質(zhì)分子和晶核嵌入晶體晶格中。 ? ？ ? （ 1）自然起晶法：溶劑蒸發(fā)進入不穩(wěn)定區(qū)形成晶核、當(dāng)產(chǎn)生一定量的晶種后，加入稀溶液使溶液濃度降至亞穩(wěn)定區(qū)，新的晶種不再產(chǎn)生，溶質(zhì)在晶種表面生長。 ? （ 3）晶種起晶法：將溶液蒸發(fā)后冷卻至亞穩(wěn)定區(qū)的較低濃度，加入一定量和一定大小的晶種，使溶質(zhì)在晶種表面生長 ? ？ ? ? ？ ? （ 1）晶體質(zhì)量包括三個方面的內(nèi)容：晶體大小 、 形狀 、 純度 ? （ 2）影響晶體大小的因素：溫度、晶核質(zhì)量、攪拌等 ? （ 3）影響晶體形狀的因素：改變過飽和度、改變?nèi)軇w系、雜質(zhì) ? （ 4）影響晶體純度的因素：母液中的雜質(zhì)、結(jié)晶速度、晶體粒度及粒度分布 ? ？ ? 利用雜質(zhì)和結(jié)晶物質(zhì)在不同溶劑和不同溫度下的溶解度不同，將晶體用合適的溶劑再次結(jié)晶，以獲得高純度的晶體的操作 干燥 ? ？ ? 用熱能加熱物料，使物料中水分蒸發(fā)或者用冷凍法使水分結(jié)冰后升華而除去的單元操作；通常是生物產(chǎn)品分離的最后一步 。 ? 此時，物料的含水量稱為該空氣狀態(tài)下的平衡水分。因此，又稱為表面汽化控制階段。 降速干燥階段 ： 物料濕含量降至臨界點以后，便進入降速干燥階段。 結(jié)合水的蒸氣壓恒低于同溫下純水的飽和蒸汽壓，傳質(zhì)、傳熱推動力逐漸減小，干燥速率隨之 降低； 干燥空氣的剩余能量被用于加熱物料表面，物料表面溫度逐漸升高，局部干燥。因此，亦稱為內(nèi)部擴散控制階段，與外部條件關(guān)系不大