實驗52高效毛細(xì)管電泳電導(dǎo)檢測法分離檢測水中陰離子-閱讀頁
2025-04-28 23:28本頁面
【正文】 通用性強，靈敏度比直接法低 1－ 2個數(shù)量級 高效毛細(xì)管電泳儀 high performance capillary electrophoresis apparatus HPCE的儀器系統(tǒng) 1. 儀器主要部件 ? 高壓電源： 0～ 30kV； ? 毛細(xì)管分離柱 ? 紫外 、 激光誘導(dǎo)熒光 、 電導(dǎo) 、 安培檢測器等 。理想的毛細(xì)管必須是電絕緣、紫外 /可見光透明且富有彈性的，目前可以使用的有玻璃、熔融石英或聚四氟乙烯塑料等。 紫外檢測器的核心部件 電導(dǎo)檢測器的核心部件 毛細(xì)管電泳數(shù)據(jù)工作站 教學(xué)型 CES2022毛細(xì)管電泳儀實物圖 高壓電源 進(jìn)樣端 檢測池 電導(dǎo)檢測器 數(shù)據(jù)工作站 HPCE應(yīng)用示例 一、離子分析 analysis of ion 陽離子分析 遷移方向和電滲流方向一致； 24種金屬離子； 陽極進(jìn)樣，陰極檢測； 具有很高的靈敏度； 陰離子分析 陰離子電泳方向和電滲流方向相反、速度接近，分析時間長、效率低； 質(zhì)量小、電荷密度大的離子如：SO4 Cl、 F等，電泳速率大于電滲流，陽極端流出，在陰極端無法檢測； 加入電滲流改性劑，十六烷基三甲基溴化胺等，使電泳方向和電滲流方向一致，可在 36種陰離子；陰極進(jìn)樣，陽極檢測； 離子價態(tài)及存在形態(tài)分析； 二、藥物分析 analysis of pharmaceutics 檢測體液或細(xì)胞中某些代謝產(chǎn)物的分析； 尿液中的氨基酸含量作為臨床診斷糖尿病的輔助手段； 采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳方式，在 11min內(nèi)分離17種藥物； 采用 MEKC模式，鑒定違禁藥物；效果優(yōu)于 HPLC法 三、手性化合物分析 analysis of chiral pounds 合成獲得單一手性化合物相當(dāng)困難； 528種手性合成藥物， 61中以單一對映體形式銷售，其他為外消旋體；檢測分析也相當(dāng)困難；研究熱點； R反應(yīng)停是安眠藥， S式致胎兒畸形； HPCE分離分析手性化合物的方法：加入手性選擇劑； 形成配合物的穩(wěn)定常數(shù)有差異，結(jié)合 HPCE的高效率； 常用手性選擇劑：環(huán)糊精及其衍生物；手性冠醚；手性表面活性劑（氨基酸衍生物、膽酸鈉、?；敲撗跄懰峒捌溻c鹽、低聚糖等天然手性表面活性劑） 四、氨基酸與蛋白質(zhì)分析 analysis of amino acids 采用 MEKC模式，在 25分鐘內(nèi)分離了 23種丹?；被?； HPCE可取代傳統(tǒng)的氨基酸分析儀； 問題：吸附和檢測； 五、核酸分析及 DNA排序 analysis of nucleic acids and sequence of DNA 重要分析手段； 右圖：酶解的雙螺旋DNA限制性片段的分離； ● 學(xué)習(xí)高效毛細(xì)管電泳儀（ HPCE）的操作使用。 ● 掌握飲用水中 Cl、 NO SO42的毛細(xì)管電泳分離 /電導(dǎo)檢測的測定原理和技術(shù) 。 ● 電泳運行液應(yīng)新鮮配制 ， 儲備液儲存在 5℃ 冰箱中 。 EDTA較難溶于純水中而易溶于堿性溶液中 ， 因此可將 Tris和 EDTA混合配制 。 ● Cl、 NO SO42是常見陰離子 ， 樣品極易污染 ， 為消除干擾 ，宜增做 “ 空白 ” 試驗步驟 : 先用空白水樣 （ 超純水 ） 進(jìn)行測定 ， 在確定無干擾后 ， 再在其基礎(chǔ)上加入 100 mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液 。 ● 實驗室的濕度必須保持在不大于 75%(75%)的環(huán)境條件下 。 毛細(xì)管柱用超純水沖洗干凈后保存 。 了解毛細(xì)管電泳中電滲流的產(chǎn)生和控制的方法及其在分析中的重要作用。 了解有哪些檢測器可供選擇，其優(yōu)缺點各是什么？ 學(xué)習(xí)和了解影響分析結(jié)果（靈敏度，分離度）的主要因素。 了解本實驗的原理，采用的試劑和實驗裝置。 本實驗的網(wǎng)上預(yù)習(xí)，請您訪問： : //謝天堯 副教授，聯(lián)系方式： Email: Tel.: 33191163， 84110505 歡迎同學(xué)們對 《 現(xiàn)代化學(xué)實驗與技術(shù) 》 課程 的教學(xué)組織、教學(xué)過程、實驗準(zhǔn)備、實驗指導(dǎo)教 師等提出意見、建議和批評，以便我們不斷改進(jìn) 教學(xué)工作，提高教學(xué)質(zhì)量
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