【正文】 enic phage）。把帶有前噬菌體的細菌叫做溶源菌(1ysogenic bacteria)。167。167。167。167。噬菌體轉(zhuǎn)換為前噬菌體，細菌細胞則溶源化。4．溫和性噬菌體與宿主細胞生活周期λ噬菌體感染宿主細胞后既可以進行溶解性循環(huán)(1ytic cycle)，也可以進行溶源性循環(huán)(1ysogenic cycle)溶解循環(huán)中，以雙鏈環(huán)狀閉合DNA為模板復(fù)制核酸和生物合成蛋白質(zhì)，然后自身裝配起來，產(chǎn)生完整的病毒顆粒，最后細胞破裂，成熟的噬菌體釋放出來。反向的剪切過程可以自發(fā)發(fā)生，自發(fā)消除頻率很低，約102~105。溶源性細菌對同源的或其本身的噬菌體不敏感，這種特性稱為“免疫性”，即這些噬菌體進入溶源性細胞后，既不能增殖，也不導(dǎo)致細胞裂解。三、噬菌體的應(yīng)用252。噬菌體可用于細菌的鑒定和分型。252。噬菌體表達的產(chǎn)物存在于噬菌體表面，將噬菌體用于基因工程抗體庫的建立。252。噬菌體還可供作抗病毒藥物和抗腫瘤抗生素篩選的實驗?zāi)Ｐ汀５诹?jié) 病毒與人類疾?。ㄒ唬?流行性感冒病毒球形或絲狀，有包膜(脂雙層)，單負鏈RNA病毒血凝素（HA）、神經(jīng)氨酸酶（NA）【分型】根據(jù)RNP和M蛋白（基質(zhì)蛋白）的不同，可分為甲（A），乙（B），丙（C）型。且HA，NA易變異，而引起大流行。（二）肝炎病毒乙型肝炎病毒（HBV）—嗜肝DNA病毒科（1）抗原組成：HbsAg：HBV感染的主要標志，存在于外衣殼上。HBeAg：可溶性蛋白，MW大約19000 Da，游離于血清中?？蓪?dǎo)致原發(fā)性肝癌。表為HBV抗原抗體檢測結(jié)果的臨床分析HBsAgHBeAg抗HBs抗HBe抗HBc臨床判斷+感染HBV，結(jié)合肝功能判斷病情++急慢性乙肝或無癥狀攜帶者，傳染性強+++同上（大三陽）+++乙肝恢復(fù)期（小三陽）++（1）形態(tài)與結(jié)構(gòu)球形，直徑100～120nm，內(nèi)含病毒RNA和酶，外層囊膜嵌有刺突gp120和gp41。熱不穩(wěn)定，對消毒劑和去污劑敏感。T4細胞 微生物的營養(yǎng)與代謝營養(yǎng)（nutrition）：指生物體從外部環(huán)境中攝取對其生命活動必需的能量和物質(zhì)，通過吸收利用以滿足正常生長和繁殖需要的一種最基本的生理功能。以碳、氫、氧、氮、硫、磷6種元素為主。 吸收營養(yǎng)物質(zhì)的方式：一、 簡單擴散 ( simple diffusion) eg：H2O，O2，CO2，甘油，乙醇，脂肪酸等。 微生物的營養(yǎng)類型腐生型(metatrophy)：可利用無生命的有機物(如動植物尸體和殘體)作為碳源；寄生型(paratrophy)：寄生在活的寄主機體內(nèi)吸取營養(yǎng)物質(zhì),離開寄主就不能生存；252?？刂葡鄳?yīng)營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例、pH、滅菌處理、滲透壓、水活度和氧化還原電勢等物理化學(xué)條件較為適宜。（1）專性需氧菌：枯草芽胞桿菌。（3）耐氧菌：生長不需氧，氧氣存在與否對其生長影響不大，缺乏過氧化氫酶，如乳酸菌。（5）兼性厭氧菌：有氧無氧均能生長，但有氧時生長較好，大多數(shù)病原性細菌屬于此類。繁殖（reproduction）：生物個體生長到一定階段，通過特定方式產(chǎn)生新的生命個體，即引起生命個體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。 在細菌個體生長里，每個細菌分裂繁殖一代所需的時間為代時（Generation time），代時通常以G表示。 在群體生長里細菌數(shù)量增加一倍所需的時間稱為倍增時間（Doubling time）。 生長曲線：少量菌種接種到恒定容積的液體培養(yǎng)基中，提供最適培養(yǎng)條件培養(yǎng)，定時測定培養(yǎng)液中的細胞數(shù)，以培養(yǎng)時間為橫座標，以細胞數(shù)的對數(shù)或生長速率為縱座標作圖。 Ⅰ 延滯期（Lag phase）167。）芽胞于對數(shù)生長期末期開始形成、穩(wěn)定期大量形成、衰亡期釋放，有利于菌種保藏。 Ⅲ 穩(wěn)定期（167。decline phase或death phase）有的物質(zhì)可直接被利用（）——稱為遲效碳源（或氮源）。(二) 培養(yǎng)方法：固體、半固體培養(yǎng)法、液體培養(yǎng)法（靜置培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng)）167。167。：分批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)、同步培養(yǎng)、厭氧培養(yǎng)167。167。特征為：[恒濁：菌液濃度恒定，恒化（恒組成）：營養(yǎng)物濃度恒定。 同步生長：一個細胞群體中各個細胞都在同一時間進行分裂的狀態(tài)，稱為同步生長（synchronous growth），進行同步分裂的細胞稱為同步細胞。缺點：不能區(qū)分死、活菌；不適于運動細菌的計數(shù)；需要相對高的細菌濃度；個體小難觀察。測定結(jié)果為總菌數(shù)。4. 膜過濾法：當樣品中菌數(shù)很低時，可以將一定體積的液體樣品通過膜過濾器，然后將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，對形成的菌落進行統(tǒng)計。 無菌（asepsis）：不含活菌； 無菌技術(shù)（aseptic technique）：在進行外科手術(shù)或分離轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)時防止其它微生物污染實驗材料或?qū)嶒灢牧衔廴经h(huán)境的操作方法?？刮⑸飫┛剐詮娙醯闹笜耍╩inimum inhibitory concentration（50% lethal dose,LD50)：評定某化學(xué)藥物毒性強弱的指標，指在一定條件下，某化學(xué)藥劑殺死50%試驗動物的劑量。第六章 微生物的遺傳與變異 [基本要求]1．了解：DNA損傷的修復(fù)；突變株的類型及實際應(yīng)用。3．重點掌握：質(zhì)粒的概念、基本特性及重要質(zhì)粒；基因突變的概念，特性，分子機制；轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)的概念、條件和過程；營養(yǎng)缺陷突變株及應(yīng)用。遺傳：親代與子代相似親代將自身的一整套遺傳物質(zhì)穩(wěn)定地傳遞給子代的功能。遺傳型（genotype）：又稱基因型，生物個體含有的全部遺傳基因所攜帶的遺傳信息。表型由遺傳型所決定，但也和環(huán)境有關(guān)。表型飾變：相同基因型的微生物在不同環(huán)境下表現(xiàn)不同的表型，是暫時的、非遺傳性的改變。(橘生淮南則為橘，生于淮北則為枳。 遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)一、核物質(zhì)——染色質(zhì)、染色體真核生物的遺傳物質(zhì)：DNA→核小體→纖絲→螺線管→超螺旋體→染色體①核小體由約200bp DNA（2nm）和5種組蛋白構(gòu)成；②核小體排列成串珠狀染色質(zhì)纖絲（10nm）；③染色質(zhì)纖絲形成30nm的螺線管（solennoid）；④螺線管組成伸展的大環(huán)狀結(jié)構(gòu)（300nm）；⑤大環(huán)狀結(jié)構(gòu)構(gòu)成復(fù)雜的染色質(zhì)形態(tài)。真核細胞染色體在細胞生活周期中，大部分時間是以染色質(zhì)的形式存在。定義和特點質(zhì)粒：一種獨立于染色體外，能進行自主復(fù)制的細胞質(zhì)遺傳因子，主要存在于各種微生物細胞中。（接合型質(zhì)粒）2.攜帶F質(zhì)粒的菌株稱為F+菌株（相當于雄性），無F質(zhì)粒的菌株稱為F菌株（相當于雌性）。（2）抗性因子（Resistance factor，R因子）：包括抗藥性和抗重金屬二大類。（3）Col質(zhì)粒：該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因，大腸菌素是一種細菌蛋白，只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株（抑制近親），而宿主不受其產(chǎn)生的細菌素的影響。因此這類質(zhì)粒也常被稱為降解質(zhì)粒。包括插入序列IS，Tn轉(zhuǎn)座子，轉(zhuǎn)座噬菌體?；蛲蛔兒驼T變育種1.營養(yǎng)缺陷型的表示方法：167。 表型：所需營養(yǎng)物的前三個英文字母，但第1個字母大寫，且不用斜體：HisC在具體使用時多用hisC和hisC+ ，分別表示缺陷型和野生型。2.表示方法：strr：“s”的上標表示對鏈霉素敏感。條件致死突變型（conditional lethal mutant）某菌株或病毒經(jīng)基因突變后，在某種條件下可正常地生長、繁殖并呈現(xiàn)其固有的表型，而在另一種條件下卻無法生長、繁殖，這種突變類型稱為條件致死突變型。4.5. 第三節(jié)一、原核生物的基因重組（一）轉(zhuǎn)化（transformation）受體菌（recipient cell）直接吸收供體菌（donor cell）的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為轉(zhuǎn)化。感受態(tài)（petence）：指受體細胞最易接受外源DNA片段并能實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)。Ca2＋、Mg2＋。（二）轉(zhuǎn)染（transfection）指用提純的病毒核酸（DNA或RNA）去感染其宿主細胞或其原生質(zhì)體，可增殖出一群正常病毒后代的現(xiàn)象。（三）接合（conjugation，mating）供體菌和受體菌通過細胞直接接觸，遺傳物質(zhì)自供體菌轉(zhuǎn)移入受體菌，使后者獲得前者的部分遺傳性狀，這種基因轉(zhuǎn)移方式稱為接合。不含F(xiàn)因子，沒有性菌毛，但可以通過F因子獨立存在，細胞表面有性菌毛。252。F′菌株，Hfr菌株內(nèi)的F因子因不正常切割而脫離染色體時，形成游離的但攜帶一小段染色體基因的F因子，特稱為F′因細胞表面同樣有性菌毛。能將一個細菌宿主的部分染色體或質(zhì)粒DNA帶到另一個細菌的噬菌體稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。局限轉(zhuǎn)導(dǎo)：局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒攜帶特定的染色體片段并將固定的個別基因?qū)胧荏w，故稱為局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)。溫和噬菌體感染細胞后使之發(fā)生溶源化，因噬菌體的基因整合到宿主染色體上，而使后者獲得了新性狀的現(xiàn)象