【正文】 ：（1）含糖培養(yǎng)基：113℃， 20~30min（2）一般培養(yǎng)基：121℃，15~30min濕熱比干熱滅菌好的原因：1 細菌蛋白質在有水的情況下易于凝固變性 2 濕熱穿透力強3 濕熱蒸氣有潛熱存在，水蒸氣凝固成水釋放潛熱，迅速提高被滅菌物體的溫度(三) 化學方法抗微生物劑抗性強弱的指標（minimum inhibitory concentration（MIC））：評定某化學藥物藥效強弱的指標，指在一定條件下，某化學藥劑抑制特定微生物的最低濃度。（50% lethal dose,LD50)：評定某化學藥物毒性強弱的指標，指在一定條件下，某化學藥劑殺死50%試驗動物的劑量。第六章 微生物的遺傳與變異 [基本要求]1．了解：DNA損傷的修復；突變株的類型及實際應用。2．掌握：遺傳、變異的概念；遺傳物質在微生物中的存在形式；基因符號及有關術語；轉座因子概念。3．重點掌握：質粒的概念、基本特性及重要質粒；基因突變的概念，特性，分子機制；轉化、接合、轉導的概念、條件和過程；營養(yǎng)缺陷突變株及應用。遺傳：親代與子代相似親代將自身的一整套遺傳物質穩(wěn)定地傳遞給子代的功能。變異：生物體在外因或內因的作用下，引起遺傳物質結構或數(shù)量的改變，亦即遺傳型的改變。遺傳型（genotype）：又稱基因型，生物個體含有的全部遺傳基因所攜帶的遺傳信息。表型（phenotype）：又稱表現(xiàn)型，指生物體所具有的外表特征和內在特性的總和，是其遺傳型在合適環(huán)境下通過代謝和發(fā)育而得到的具體表現(xiàn)。表型由遺傳型所決定，但也和環(huán)境有關。遺傳性變異（基因型變異）：微生物的基因型發(fā)生改變，可遺傳。表型飾變：相同基因型的微生物在不同環(huán)境下表現(xiàn)不同的表型，是暫時的、非遺傳性的改變。通常表現(xiàn)為全部個體的行為。(橘生淮南則為橘，生于淮北則為枳。)；粘質沙雷氏菌，25℃培養(yǎng)時產生深紅色的靈桿菌素。 第一節(jié)遺傳變異的物質基礎一、核物質——染色質、染色體真核生物的遺傳物質：DNA→核小體→纖絲→螺線管→超螺旋體→染色體①核小體由約200bp DNA（2nm）和5種組蛋白構成；②核小體排列成串珠狀染色質纖絲（10nm）；③染色質纖絲形成30nm的螺線管（solennoid）；④螺線管組成伸展的大環(huán)狀結構（300nm）；⑤大環(huán)狀結構構成復雜的染色質形態(tài)。染色質：纖維狀結構，也叫染色絲，由最基本的單位（核小體）成串排列而成。真核細胞染色體在細胞生活周期中，大部分時間是以染色質的形式存在。二、原核生物的質粒1.定義和特點質粒：一種獨立于染色體外，能進行自主復制的細胞質遺傳因子，主要存在于各種微生物細胞中。特點如下：A 共價，閉合，環(huán)狀，雙鏈cccdsDNA，常見的有超螺旋、開環(huán)兩種存在形式； B 自我復制（嚴緊型質粒，松弛型質粒）； C 不相容性（干擾近緣質粒）；D 非細胞生長所必需；E 質?？勺孕邢Щ蛉斯とコ籉 可轉移性，質?？蓮囊粋€細菌轉移到另一個細菌。（接合型質粒）2.質粒的主要類型（1）致育因子（Fertility factor，F(xiàn)因子）：又稱F質粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象（接合作用）有關的質粒。攜帶F質粒的菌株稱為F+菌株（相當于雄性），無F質粒的菌株稱為F菌株（相當于雌性）。F因子能以游離狀態(tài)(F+)和以與染色體相結合的狀態(tài)(Hfr)存在于細胞中，所以又稱之為附加體(episome)。（2）抗性因子（Resistance factor，R因子）：包括抗藥性和抗重金屬二大類?？剐再|粒在細菌間的傳遞（接合型抗藥質粒）是細菌產生抗藥性的重要原因之一。（3）Col質粒：該質粒含有編碼大腸菌素的基因，大腸菌素是一種細菌蛋白，只殺死近緣且不含Col質粒的菌株（抑制近親），而宿主不受其產生的細菌素的影響。 （4）代謝質粒： 攜帶有能降解某些基質的酶的基因，尤其對一些有毒化合物進行降解，在環(huán)保方面有重要意義。因此這類質粒也常被稱為降解質粒。三、轉座因子（transposable element）又稱跳躍基因，位于染色體或質粒上的一段能改變自身位置的DNA序列，廣泛分布于原核和真核細胞中。包括插入序列IS，Tn轉座子，轉座噬菌體。第二節(jié)基因突變和誘變育種1.營養(yǎng)缺陷型（auxotroph）某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長因子(堿基或氨基酸)的能力，只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營養(yǎng)或其前體物（precursor）才能正常生長繁殖的變異類型，稱為營養(yǎng)缺陷型。營養(yǎng)缺陷型的表示方法：167。 基因型：所需營養(yǎng)物的前三個英文小寫斜體字母表示：hisC（組氨酸缺陷型，其中的大寫字母C同一表型中不同基因的突變）167。 表型：所需營養(yǎng)物的前三個英文字母，但第1個字母大寫，且不用斜體：HisC在具體使用時多用hisC和hisC+ ，分別表示缺陷型和野生型。缺陷型在選擇培養(yǎng)基（一般為基本培養(yǎng)基）上不生長,為負選擇標記。2.抗性突變型（resistant mutant）指野生型菌株因發(fā)生基因突變，對某化學藥物或致死物理因子，產生抗性的變異類型。表示方法：strr：“r”的上標表示抗性；strs：“s”的上標表示對鏈霉素敏感。3.條件致死突變型（conditional lethal mutant）某菌株或病毒經基因突變后，在某種條件下可正常地生長、繁殖并呈現(xiàn)其固有的表型，而在另一種條件下卻無法生長、繁殖，這種突變類型稱為條件致死突變型。Ts突變株即溫度敏感突變株（temperature sensitive mutant，Ts mutant）是一類典型的條件致死突變株。4.形態(tài)突變型（morphological mutant）指由于突變而引起的個體或菌落形態(tài)的變異。5.產量突變型（metabolite quantitative mutant）基因突變后，在代謝產物產量上明顯有別于原始菌株的突變株，稱為產量突變型。誘變劑與致癌物質——Ames試驗具體操作：檢測鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhmurium)組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株(his)的回復突變率，his菌株在不含組氨酸的培養(yǎng)基中不能生長，或只有極少數(shù)的自發(fā)回復突變子生長，如果回復突變率因某種化學誘變劑(或待測物)的作用而增加，那么這種化學藥物可判斷為具有致癌性。 第三節(jié)基因重組凡把兩個不同性狀個體內的遺傳基因轉移到一起，經過遺傳分子間的重新組合，形成新遺傳型個體的方式，稱為基因重組（gene rebination）或遺傳重組（genetic rebination），簡稱重組。一、原核生物的基因重組（一）轉化（transformation）受體菌（recipient cell）直接吸收供體菌（donor cell）的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為轉化。通過轉化方式而形成的雜種后代，稱轉化子（transformant）。感受態(tài)（petence）：指受體細胞最易接受外源DNA片段并能實現(xiàn)轉化的一種生理狀態(tài)。感受態(tài)細胞（petent cell）具有攝取外源DNA能力的細胞。Ca2＋、Mg2＋。調節(jié)感受態(tài)的一類特異蛋白稱感受態(tài)因子。（二）轉染（transfection）指用提純的病毒核酸（DNA或RNA）去感染其宿主細胞或其原生質體，可增殖出一群正常病毒后代的現(xiàn)象。噬菌體DNA被感受態(tài)細胞攝取，而非感染途徑，產生有活性的病毒顆粒，現(xiàn)在把DNA轉移至動物細胞的過程也稱轉染。（三）接合（conjugation，mating）供體菌和受體菌通過細胞直接接觸，遺傳物質自供體菌轉移入受體菌，使后者獲得前者的部分遺傳性狀，這種基因轉移方式稱為接合。F因子的四種細胞形式252。F菌株，不含F(xiàn)因子，沒有性菌毛，但可以通過接合作用接收F因子而變成雄性菌株（F+）；252。F+菌株，F(xiàn)因子獨立存在，細胞表面有性菌毛。252。Hfr菌株，F(xiàn)因子插入到染色體DNA上，細胞表面有性菌毛。252。F′菌株，Hfr菌株內的F因子因不正常切割而脫離染色體時，形成游離的但攜帶一小段染色體基因的F因子，特稱為F′因細胞表面同樣有性菌毛。（四）轉導（transduction）以噬菌體為媒介，將供體菌的DNA片段攜帶到受體細胞，通過交換與整合，從而使受體菌獲得供體菌的部分遺傳性狀。能將一個細菌宿主的部分染色體或質粒DNA帶到另一個細菌的噬菌體稱為轉導噬菌體。細菌轉導的二種類型：普遍轉導：通過極少數(shù)完全缺陷噬菌體對供體菌任何小片段DNA進行“誤包”，而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象，稱為普遍轉導。局限轉導：局限性轉導顆粒攜帶特定的染色體片段并將固定的個別基因導入受體，故稱為局限性轉導。溶源轉變：一個與轉導相似又不同的現(xiàn)象。溫和噬菌體感染細胞后使之發(fā)生溶源化，因噬菌體的基因整合到宿主染色體上，而使后者獲得了新性狀的現(xiàn)象。溶源轉變與轉導的不同？a）不攜帶任何供體菌的基因；b）這種噬菌體是完整的，而不是缺陷的；