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堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定-3學(xué)時-閱讀頁

2025-01-21 06:38本頁面

　　

【正文】酸酶為例，測定不同底物濃度的反應(yīng)速度，再根據(jù) LineweaverBurk法作圖，計算其 Km值。本實驗以磷酸苯二鈉為底物，由堿性磷酸酶催化水解，生成游離酚和磷酸鹽。吸光度的大小可以表示反應(yīng)速度的大小。 (3)保溫結(jié)束，立即加堿性溶液。 (5)以各管基質(zhì)濃度的倒數(shù) 1/[S]為橫坐標(biāo)，以各管吸光度的倒數(shù)作為 1/V作縱坐標(biāo)，作圖求出 Km值。（一） Km值測定的意義， Vm = 1/2 Vmax， Km = [S] Km是指底物的濃度，含義： Km值等于酶促反應(yīng)速度為最大速度一半時的底物濃度。 Km值愈小，酶與底物的親和力愈大；表示不需要很高的底物濃度便可容易地達(dá)到最大反應(yīng)速度。各種酶的 Km值范圍很廣。 ?思考題： 1. Km值的意義是什么？

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