【正文】 的密度， g/mL； DMC — 樣品的干物質(zhì)含量， %。 K239。 R 由以上數(shù)據(jù)，可以得出在實(shí)驗(yàn)研 究范圍內(nèi)，溫度、液化時(shí)間以及酶添加量對(duì) DE 值影響作用的大小表示如下： 液化時(shí)間 溫度 酶添加量 可以明顯的看出，在液化的正交實(shí)驗(yàn)中，條件 4，即溫度 65℃、時(shí)間 20min、酶添加量 (50g 淀粉）能夠較好地使液化后 DE落在 15~20 的范圍內(nèi)。 在最佳條件下重復(fù)淀粉漿液的液化過(guò)程，即重復(fù)步驟 1，調(diào)漿后在溫度 65℃、時(shí)間 20min、酶添加量 (50g 淀粉）的條件下反應(yīng)，驗(yàn)證最優(yōu)條件的重現(xiàn)性（滴定用樣品同樣稀釋 8 倍）。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，最優(yōu)條件下進(jìn)行 的液化可以得到較好的重現(xiàn)，最終得到的料液 DE 值皆能落在 1520 的范圍內(nèi)。 本次實(shí)驗(yàn)研究了 3 種不同溫度對(duì)糖化的影響。糖化酶的加量是在相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上結(jié)合實(shí)驗(yàn)所用糖化酶的活力計(jì)算得出；糖化時(shí)間是間歇測(cè)定糖化液的 DE值直至 DE 值達(dá)到 96而得出的。因此可以推斷實(shí)驗(yàn)控制的糖化時(shí)間應(yīng)該在 16h 左右。 60℃ 65℃ 70℃ 干物質(zhì) /% 5mL 質(zhì)量 /g 滴定體積 /mL 管號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 /mL 0 A540 0 圖 1：葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線 對(duì)實(shí)驗(yàn)所用的α 淀粉酶進(jìn)行活力測(cè)定，得到數(shù)據(jù)如下： 表 11：α 淀粉酶活力測(cè)定數(shù)據(jù)記錄表 注 ：表中數(shù)據(jù)為樣品稀釋 2倍后得到數(shù)值 由以上數(shù)據(jù)，可以得出 %α 淀粉酶在實(shí)驗(yàn)條件下催化生成的葡萄糖的物質(zhì)的量： n 葡萄糖 = 2/180 1000= 可推算出實(shí)驗(yàn)用α 淀粉酶的活力如下： E= 1000=1926U/g 式中，酶活力 U的定義：在 70℃下， 1min轉(zhuǎn)化生成 1mol葡萄糖為 1U。為達(dá)到濃度對(duì)比的效果，實(shí)驗(yàn)中將第二個(gè)燒瓶進(jìn)行了較為劇烈的直接加熱蒸發(fā)，最終干物質(zhì)濃度達(dá)到了 70%。 實(shí)驗(yàn)擬在烘箱中實(shí)現(xiàn)葡萄糖晶體的干燥，而事實(shí)表明在密閉烘箱中升溫將會(huì)使葡萄糖重新濕潤(rùn)發(fā)潮。對(duì)烘箱處理后的晶體稱量，得到其質(zhì)量為 。 六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論 費(fèi)林混合溶液當(dāng)天現(xiàn)配現(xiàn)用，對(duì)每次重新配制的費(fèi)林溶液，應(yīng)該重新對(duì)其混合液濃度進(jìn)行標(biāo)定。 本實(shí)驗(yàn)研究討論得到的最優(yōu)糖化條件的前提是在本實(shí)驗(yàn)設(shè)備以及流程中操作。 實(shí)驗(yàn)中采取的容器規(guī)格對(duì)實(shí)驗(yàn)有一定的影響，廣口容器可能引起料液較大程度的揮發(fā)，從而影響到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的精確度。研磨過(guò)程中局部高溫可能會(huì)對(duì)酶的活性有一定的影響，因此實(shí)驗(yàn)中測(cè)定的糖化酶活力是研磨后的酶活。通過(guò)對(duì)晶體性狀的比對(duì)，白色顆粒應(yīng)為結(jié)晶葡萄糖，棱形晶體則可能是某種鹽的結(jié)晶。在結(jié)晶操作前應(yīng)進(jìn)行葡萄糖液的離子交換，從而去除糖液中的離子成分。 在晶體的烘干環(huán)節(jié)，可以看到烘箱內(nèi)的晶體在升溫 過(guò)程中伴隨著結(jié)晶水的重新析出，致使晶體潮濕，并不能達(dá)到完全烘干的效果。 七、實(shí)驗(yàn)心得 本次的綜合實(shí)驗(yàn)是我大學(xué)以來(lái)為期最長(zhǎng)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)，也是我投入精力最多的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。 接觸課題伊始，我查閱了許多相關(guān)的文獻(xiàn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)有了比較大概的了解。文獻(xiàn)中提及較多的方法是費(fèi)林滴定，該法需要在使用時(shí)當(dāng)天混合試劑，并且要在沸騰情況下進(jìn)行滴定操作。組內(nèi)有同學(xué)提議使用 DNS比色的方法，實(shí)驗(yàn)同樣可以測(cè)得還原糖的含量，而且在操作上更為可行而且簡(jiǎn)便，于是我們便事先嘗試了 DNS 比色法的可行性。通過(guò)實(shí)驗(yàn)的比較，可以得出在葡 萄糖溶液的比對(duì)上， DNS比色的實(shí)驗(yàn)方案數(shù)據(jù)較為可信。在文獻(xiàn)推薦的操作條件下，我組的 DNS 比色法測(cè)得的 DE 值數(shù)值非常小，這不禁使我懷疑這種方法在處理樣品時(shí)存在原理上的問(wèn)題。根據(jù)朗伯比爾（ LambertBeer）定律：當(dāng)一束平行單色光通過(guò)均勻的非散射樣品時(shí)，樣品對(duì)光的吸光度與樣品的濃度及厚度成正比。其次，實(shí)驗(yàn)樣品中有許多還原端成分并不 是以還原糖的形式存在， DNS比色分析的方法也不再適合。滴定的步驟由我操作。首先，滴定在沸騰的溶液上進(jìn)行，高溫的蒸汽要求操作人員盡快進(jìn)行操作，否則會(huì)有燙傷之虞。在費(fèi)林混合溶液預(yù)加樣品之后，要求在 2min177。這樣嚴(yán)格的規(guī)定要求操作人員對(duì)實(shí)驗(yàn)十分熟練，而且對(duì)電爐火候把 握十分精準(zhǔn)，這無(wú)疑需要很多次的嘗試。出于實(shí)驗(yàn)精確度的考慮，必須使樣品滴定的體積控制在 1520mL的范圍內(nèi)，因此，需要對(duì)樣品以不同倍數(shù)稀釋反覆測(cè)定其滴定體積以確定最佳的稀釋度。 經(jīng)過(guò)多次的實(shí)踐，我現(xiàn)在已經(jīng)基本掌握了費(fèi)林滴定的操作要領(lǐng)，也有了一些個(gè)人的切身體會(huì)。這樣可以避免由于蒸汽在滴定管壁的傳熱引起溶液體積的改變以及塞子膨脹導(dǎo)致無(wú)法順暢轉(zhuǎn)動(dòng)。不論怎樣的避免，塞子的膨脹都是在所難免的，涂抹凡士林可以有效地防止在滴定過(guò)程中塞子不能旋轉(zhuǎn)的問(wèn)題。這時(shí)除了要調(diào)整好火候之外，還可以在錐形瓶口豎直架設(shè)一把鑷子，可有效使泡沫破裂。 在以前老師的授課內(nèi)容中，曾經(jīng)有談到結(jié)晶是一個(gè)十分難以把握的環(huán)節(jié)。組內(nèi)的同學(xué)也表示出同樣的擔(dān)心。在初期的討論階段，我們一共提出了 3 種結(jié)晶方案。在比對(duì)了各個(gè)方案之后，我們一致認(rèn)為采用階段降溫可以較好地實(shí)現(xiàn)晶體的析出，而不致使溶液太少。 在實(shí)驗(yàn)中，我也經(jīng)由一次次的失敗，對(duì)實(shí)驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)加深了理解。經(jīng)過(guò)反復(fù)核查，發(fā)現(xiàn)是調(diào)漿時(shí)未加入 CaCl2。便是在這樣的過(guò)程中，我更好地理解了實(shí)驗(yàn)中各個(gè)試劑與步驟的作用，鞏固了專業(yè)知識(shí)。感謝朱老師在實(shí)驗(yàn)中給予我們的指導(dǎo)，也感謝組內(nèi)一起合作的同學(xué)！ 參考文獻(xiàn)： 淀粉水解產(chǎn)品 還原力和葡萄糖當(dāng)量測(cè)定 (GB/T 5377:1981)，中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局， 202110； 張劍幸 田輝 周婷 王麗 張開誠(chéng) ,Ca2+對(duì)雙酶法水解玉米淀粉的 影響 ,中國(guó)釀造， 2021 年 11 期； 李平凡 邱玉美 吳海峰， 雙酶法生產(chǎn)葡萄糖工藝優(yōu)化研究 ，現(xiàn)代食品科技，2021 年 24 期； 張劍 易華鋒 張開誠(chéng) 林庭龍， 雙酶法水解玉米淀粉的工藝研究 ，釀酒科技，2021 年 3 卷； 權(quán)伍榮 張健 李森， 結(jié)晶葡萄糖的生產(chǎn)工藝、用途及其發(fā)展前景 ，延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)報(bào)， 2021 年 26 卷 4 期； 孫鵬， 玉米制取葡萄糖的酶法工藝研究 ，現(xiàn)代食品科技， 2021 年 22 期。 5．畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）進(jìn)度要求 2021 年 05 月 25 日 2021 年 03 月 30 日