【正文】 便是在這樣的過(guò)程中，我更好地理解了實(shí)驗(yàn)中各個(gè)試劑與步驟的作用，鞏固了專業(yè)知識(shí)。在初期的討論階段，我們一共提出了 3 種結(jié)晶方案。不論怎樣的避免，塞子的膨脹都是在所難免的，涂抹凡士林可以有效地防止在滴定過(guò)程中塞子不能旋轉(zhuǎn)的問(wèn)題。這樣嚴(yán)格的規(guī)定要求操作人員對(duì)實(shí)驗(yàn)十分熟練，而且對(duì)電爐火候把 握十分精準(zhǔn)，這無(wú)疑需要很多次的嘗試。其次，實(shí)驗(yàn)樣品中有許多還原端成分并不 是以還原糖的形式存在， DNS比色分析的方法也不再適合。組內(nèi)有同學(xué)提議使用 DNS比色的方法，實(shí)驗(yàn)同樣可以測(cè)得還原糖的含量，而且在操作上更為可行而且簡(jiǎn)便，于是我們便事先嘗試了 DNS 比色法的可行性。 在晶體的烘干環(huán)節(jié)，可以看到烘箱內(nèi)的晶體在升溫 過(guò)程中伴隨著結(jié)晶水的重新析出，致使晶體潮濕，并不能達(dá)到完全烘干的效果。 實(shí)驗(yàn)中采取的容器規(guī)格對(duì)實(shí)驗(yàn)有一定的影響，廣口容器可能引起料液較大程度的揮發(fā)，從而影響到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的精確度。 實(shí)驗(yàn)擬在烘箱中實(shí)現(xiàn)葡萄糖晶體的干燥，而事實(shí)表明在密閉烘箱中升溫將會(huì)使葡萄糖重新濕潤(rùn)發(fā)潮。糖化酶的加量是在相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上結(jié)合實(shí)驗(yàn)所用糖化酶的活力計(jì)算得出；糖化時(shí)間是間歇測(cè)定糖化液的 DE值直至 DE 值達(dá)到 96而得出的。 R 由以上數(shù)據(jù)，可以得出在實(shí)驗(yàn)研 究范圍內(nèi)，溫度、液化時(shí)間以及酶添加量對(duì) DE 值影響作用的大小表示如下： 液化時(shí)間 溫度 酶添加量 可以明顯的看出，在液化的正交實(shí)驗(yàn)中，條件 4，即溫度 65℃、時(shí)間 20min、酶添加量 (50g 淀粉）能夠較好地使液化后 DE落在 15~20 的范圍內(nèi)。 表 4：費(fèi)林混合溶液標(biāo)定記錄表 故 而，V1= 最優(yōu)液化條件的正交實(shí)驗(yàn) 液化過(guò)程中，淀粉漿液從最開(kāi)始的白色均勻液體在 75℃水浴鍋中慢慢變稠糊化，白色純度進(jìn)一步提高。 配制實(shí)驗(yàn)試劑如下： ① 2%可溶性淀粉：稱取絕干可溶性淀粉 2g，以少許蒸餾水調(diào)勻，傾入 80mL左 右的沸水中，繼續(xù)煮沸至透明狀。 2H2O ,用蒸餾水溶解并定容至 1L； 取 A液 55mL與 B液 145mL混勻，即為 酸鈉緩沖液； ④ 2%淀粉溶液：稱取 2g淀粉溶于 酸鈉緩沖液中； 實(shí)驗(yàn)步驟如下 ： ①葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 取 7 只干凈的試管，編號(hào)，按表二加入試劑，做兩份平行。再降至 33℃保溫 12h，最后降至 27℃保溫 12h，取出。攪拌混勻之后分別置于 60℃、 65℃、 70℃的水浴搖床中，震蕩反應(yīng)16h,取出，測(cè)定其 DE 值，以 DE 值接近 96為好。 液化最優(yōu)條件的正交實(shí)驗(yàn) 按步驟 1 繼續(xù)配制淀粉漿液 6 瓶。用純堿調(diào) pH 值至 ，再加入耐高溫的α 淀粉酶，攪拌均勻。糖化酶活力 pH 范圍為 ， 最佳溫度 范圍 5860℃。這些非碳水化合物與淀粉的化學(xué)結(jié)構(gòu)沒(méi)有什么關(guān)系，淀粉是純粹的碳水化合物。 ? 【 2】 水分含量： 淀粉含有相當(dāng)高的水分，如玉米淀粉在 一般情況下，含水約為 12%，其他淀粉含水有 20%。 2．畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）任務(wù)內(nèi)容和要求 關(guān)于雙酶法制取葡萄糖的 實(shí)踐實(shí)驗(yàn)和理論應(yīng)用，要求通過(guò)理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)基本掌握 雙酶法制取葡萄糖的生產(chǎn)方法。 生產(chǎn)葡萄糖所用原料和一些主要輔助材料 ? 一、玉米淀粉 ： ? 淀粉的物理性狀 ? 【 1】顆粒：淀粉呈白色粉末狀，但在顯微鏡下觀察， 卻 是些形狀和大小都不同的透明小顆粒； 一斤玉米淀粉據(jù)估計(jì)約有8500億個(gè)顆粒。若將淀粉乳加熱到一定溫度，淀粉顆粒開(kāi)始膨脹，溫度繼續(xù)上升，顆粒繼續(xù)膨脹，可達(dá)原體積的幾倍到幾十倍。 液化酶的 PH 范圍 為 ；有效溫度范圍在噴射液化工藝中瞬間溫度可達(dá) 105℃ 145℃ 仍能有效水解淀粉乳。 本實(shí)驗(yàn)在前人工作的基礎(chǔ)上，有針對(duì)地對(duì)雙酶法制取葡萄糖晶體這一工藝進(jìn)行了研究，主要進(jìn)行了液化條件的優(yōu)化選擇。最后，通過(guò)階梯式降溫的方法使晶體析出。冷卻后測(cè)定其 DE 值（本實(shí)驗(yàn)采取的 DE 測(cè)定為費(fèi)林滴定參考自“ GB/T ：淀粉水解產(chǎn)品 還原力和葡萄糖當(dāng)量測(cè)定”，這里便不再贅述），以 DE落在 1520內(nèi)為佳。 濃縮 將糖液置于間歇沸騰的水浴鍋蒸發(fā)濃縮，至干物質(zhì)含量達(dá) 70%，取出。若溶液渾濁可過(guò)濾后使用。 ②酶活力的測(cè)定 取干凈的試管，編號(hào)，按表三進(jìn)行操作。記錄 以及空白滴定所消耗的硫代硫酸鈉的毫升數(shù) B； ⑤計(jì)算酶活力。 按以上步驟，整理數(shù)據(jù)，得到如下結(jié)果： 表 6：最優(yōu)液化條件正交實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理表 列號(hào) 試驗(yàn)號(hào) 溫度 /℃ 液化時(shí)間/min 酶添加量/(g/50g 淀粉 ) DE 值 A B C D 1 1（ 55） 1（ 20） 1（ ） 1 2 1 2（ 30） 2（ ） 2 3 1 3（ 40） 3（ ） 3 4 2（ 65） 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3（ 75） 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 K1 K 總 = K2 K3 K139。 表 7：最優(yōu)條件驗(yàn)證試驗(yàn)記錄表 糖化實(shí)驗(yàn)記錄 經(jīng)過(guò) 16h 的糖化，料液由粘稠膠體逐漸變稀，最終得到含少許沉淀的淡黃色溶 液。 糖化酶活力的測(cè)定 按照實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定糖化酶的活力，得到數(shù)據(jù)如下： 表 12：糖化酶活力測(cè)定數(shù)據(jù)記錄表 空白 1 2 Na2S2O3滴定消耗體積 /mL 試管號(hào) 空白 1 2 樣品平均 A540（稀釋兩倍） 0 由以上數(shù)據(jù)，有以下的數(shù)據(jù)處理： 表 13：糖化酶活力測(cè)定數(shù)據(jù)處理表 1 2 A/mL A /mL B/mL (BA )/mL 1%酶液酶活力 U/mL 固體酶酶活力 U/g 34838 葡萄糖結(jié)晶 本次實(shí)驗(yàn)中我組采用沸水浴蒸發(fā)濃縮的 方法，由于時(shí)間安排不當(dāng)以及實(shí)驗(yàn)限制，未能將糖液干物質(zhì)濃度濃縮至 70%。確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。因此可以判斷，實(shí)驗(yàn)得到的晶體仍然不夠純。我意識(shí)到，這個(gè)實(shí)驗(yàn)的整體流程并不難，繁雜的步驟在于實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)的 測(cè)定，尤其是 DE 值的確定。 首先，實(shí)驗(yàn)處理得到的樣品為偏黃色的膠體，在 DNS 處理后，溶液渾濁。其次，實(shí)驗(yàn)對(duì)各個(gè)時(shí)間段的把握十分嚴(yán)格。第一，盡量不要使滴定管一直處于三角瓶正上方，只在滴定時(shí)從蝴蝶夾上取下，用手移過(guò)去。于是我很擔(dān)心我組在