實(shí)驗(yàn)五離子交換柱層析法分離氨基酸-閱讀頁(yè)
2025-06-01 06:48本頁(yè)面
【正文】 50 ?2mol/L NaOH ? ?樣品液：氨基酸混合液 ?茚三酮混合液 實(shí)驗(yàn)步驟 1． 樹脂的處理 將干的強(qiáng)酸型樹脂用蒸餾水浸泡過(guò)夜 ， 使之充分溶脹 。 再用 2mol/L的氫氧化鈉處理 ， 做法同上 。 2． 裝柱 取直徑 1cm,長(zhǎng)度 10－ 12cm的層析柱 。 自頂部注入上述經(jīng)處理的樹脂懸浮液 ， 關(guān)閉層析柱出口 ， 待樹脂沉降后 ，放出過(guò)量溶液 ， 再加入一些樹脂 ， 至樹脂沉降至 8 ~ 10cm的高度即可 。液面不低于樹脂。 4. 加樣 揭去層析柱上口蓋子 ， 待柱內(nèi)液面至樹脂表面 1－ 2mm關(guān)閉出口 ， 沿管壁四周小心加入 ， 慢慢打開出口 ， 同時(shí)開始收集流出液 。 5. 洗脫 以緩沖液洗脫 ， 開始用試管收集洗脫液 ， 每管收集 1mL， 共收集 60— 80管 。 混勻 ， 以收集液第 2管為空白 ， 測(cè)定 A570波長(zhǎng)的光吸收值 ， 以光吸收值為縱坐標(biāo) ， 以洗脫液體積為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線 。 Separation of amino acids on a cation exchange column 注意事項(xiàng) 在裝柱時(shí)必須防止氣泡 、 分層及柱子液 面在樹脂表面以下等現(xiàn)象發(fā)
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