20xx年醫(yī)學(xué)專題—第五篇：流式細胞儀結(jié)果分析-在線瀏覽
2024-11-13 18:02本頁面
【正文】 折射等有關(guān)，主要分為前向散射光和側(cè)向散射光。d236。,第二十一頁，共七十七頁。)(0.5176。)向前方散射的訊號用于檢測細胞等粒子的表面屬性，信號強弱與細胞體積大小成正比。,前向散射光示意圖,第二十三頁，共七十七頁。osh232。角散射的訊號，用于檢測細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)屬性。,側(cè)向(c232。nɡ)散射光示意圖,第二十五頁，共七十七頁。nx237。 此為血細胞分類的基本原理，但不能分析表面分子。ng)粒細胞,光散射測量最有效(yǒuxi224。,熒光信號由被檢細胞上標記的特異性熒光染料受激發(fā)后產(chǎn)生，發(fā)射的熒光波長與激發(fā)光波長不同。 選擇不同的單抗及染料就可同時測定一個細胞上的多個不同特征。ngguāng)測量,第二十七頁，共七十七頁。o)的特性,激發(fā)(jīfā)波長(EXCITING) 發(fā)射波長(EMISSION),第二十八頁，共七十七頁。,熒光(y237。,通過流式細胞儀進行細胞分選主要(zhǔy224。,四、細胞(x236。,壓電晶體(jīngtǐ),產(chǎn)生(chǎnshēng)機械振動,不充電(chōng di224。,分選速度(s249。)：單位時間內(nèi)分選的細胞數(shù)量。 分選純度：分選出的目的細胞占所有收獲細胞的百分率。與純度成反比。與分選速度成反比。sh249。,參數(shù)：FS,SS,FL 數(shù)據(jù)(sh249。)顯示方式 （單參數(shù)直方圖 、雙參數(shù)散點圖 、二維等高圖 、假三維等高圖 、三參數(shù)散點圖 ） 設(shè)門分析技術(shù),第二節(jié) 數(shù)據(jù)(sh249。)的顯示與分析,第三十四頁，共七十七頁。li224。),第三十五頁，共七十七頁。)直方圖 雙參數(shù)直方圖:點圖 二維等高圖 假三維等高圖 三參數(shù)直方圖 多參數(shù)分析,直分析(fēnxī)方圖,設(shè)門分析(fēnxī):REGION和GATE設(shè)置,二、數(shù)據(jù)顯示方式,第三十六頁，共七十七頁。ngguāng))與顆粒計數(shù)(COUNT)構(gòu)成，反映同樣散射光或熒光強度的顆粒數(shù)量的多少。)直方圖,第三十七頁，共七十七頁。)直方圖,第三十八頁，共七十七頁。d236。 雙參數(shù)信號通常采用對數(shù)信號，最常用的是點密圖，在圖中，每個點代表一個細胞，點圖利用顆粒密度反映同樣散射光或熒光強度的顆粒數(shù)量的多少。)直方圖,第三十九頁，共七十七頁。)直方圖點圖,第四十頁，共七十七頁。)直方圖點圖,第四十一頁，共七十七頁。 等高圖上每一條連續(xù)曲線上具有相同的細胞相對或絕對數(shù)，即“等高”。ngc236。 等高線越密集則表示細胞數(shù)變化率越大。,二維等高圖,第四十三頁，共七十七頁。,（三）三參數(shù)(cānsh249。,多參數(shù)(cānsh249。,（四）流式細胞儀的多參數(shù)(cānsh249。,Gate設(shè)置：指在某一張選定參數(shù)的直方圖上，根據(jù)該圖的細胞(x236。bāo)群，并要求該樣本所有其他參數(shù)組合的直方圖只體現(xiàn)這群細胞(x236。,根據(jù)門的形狀又分為(fēn w233。,三、設(shè)門分析(fēnxī)技術(shù),第四十七頁，共七十七頁。ng)粒細胞,A、B、C均為任意(r232。)門,第四十八頁，共七十七頁。,Region設(shè)置: 區(qū)閾（region, R）與門(gate, G ) 是兩個相關(guān)(xiāngguān)的概念，區(qū)閾可與門對應(yīng)，但是也可以包含于門。,D1 CD4+/CD3 D2 CD4+/CD3+ D3 CD4 /CD3 D4 CD4 /CD3+,如十字門分析(fēnxī)時，起就可以由四個區(qū)域構(gòu)成，即G=D1+D2+D3+D4。,樣本制備 標記染色(rǎns232。sh249。,外周血淋巴細胞樣品的制備 分離單個核細胞(x236。ngpǐn)制備,第五十三頁，共七十七頁。b232。,適用條件: 有較高的量子產(chǎn)額和消光系數(shù) 對488nm的激發(fā)光波長有較強的吸收 發(fā)射(fāsh232。ngg
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