光度測定法bet檢查技術(shù)-在線瀏覽
2025-03-24 03:55本頁面
【正文】 態(tài)曲線的特點? 把標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素制備成三個濃度 C C C3（ C1C2C3 ），分別與 TAL反應(yīng)，描繪出反應(yīng)的動態(tài)曲線如下圖：C3Rt（ %）T（分）C2C1分析動態(tài)曲線可看出：1. 內(nèi)毒素濃度越高，孕育期越短；2. 內(nèi)毒素濃度越高，反應(yīng)期曲線越陡；3. 內(nèi)毒素濃度越高，進(jìn)入結(jié)束期越快。這里的反應(yīng)時間是指反應(yīng)混合液的透光度到達(dá)預(yù)設(shè)透光度值（ Rt）的時間。比對標(biāo)準(zhǔn)曲線Ts T(分 )Rt(%)R0CsLgT=bkLgCLgCCsTsLgT922023/1/28112）終點法原理? 固定反應(yīng)時間（ T），建立內(nèi)毒素濃度與透光度關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線（ CRt曲線），用供試品的透光度比對標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出供試品的內(nèi)毒素濃度。C回歸分析（ 1）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線2023/1/2812（ 2）測定樣品內(nèi)毒素濃度（ Cx）? 用鱟試劑與未知內(nèi)毒素含量的供試品（ X）反應(yīng)，得到透光度值Rx，比對 CRt關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可得出供試品的內(nèi)毒素含量 Cx。CRxCx比對標(biāo)準(zhǔn)曲線2023/1/2813動態(tài)比濁法? 試驗儀器及器具– 動態(tài)微孔平板儀或試管儀– BET軟件– 微孔平板、反應(yīng)試管等2023/1/2814英國 Lab Kiics公司ATi動態(tài)試管儀 , 96孔湛江安度斯公司開發(fā)的 BET專用軟件“生物探針 2023” 2023/1/2815美國 Charles River Endosafe 便攜式檢測系統(tǒng)（ PTS）美國 BioTek公司超級酶標(biāo)儀，ELx808IU,使用 96孔微孔板2023/1/2816? LKM細(xì)菌內(nèi)毒素動態(tài)試管儀– 制造商：英國萊伯金耐特公司（ Lab Kiics Ltd.）– 世界上第一臺動態(tài)試管儀的生產(chǎn)商– 目前世界上銷量最大的動態(tài)試管儀– 已經(jīng)取得醫(yī)療器械許可證– 完善的售后服務(wù)儀器特點：儀器特點：體積小巧，占用空間?。缓銣匦阅?、光學(xué)性能精密， 各孔溫度均在 37177。配有專業(yè)的、操作簡單的軟 件系統(tǒng)。通常玻璃器具需經(jīng) 250 ℃ 、 60分鐘的干烤處理2023/1/28202）標(biāo)準(zhǔn)曲線的可靠性試驗? 試驗?zāi)康抹C 驗證實驗室的條件是否滿足 BET試驗的要求– 驗證實驗人員的實驗技能是否滿足 BET試驗的要求– 驗證實驗所用試劑（包括鱟試劑、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品、 BET水等）是否滿足 BET試驗要求2023/1/2821 試劑2023/1/28Page 22試劑名稱 廠家 裝量 規(guī)格動態(tài)濁度法 TAL 安度斯 ~內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品（ CSE） 安度斯 10ng/支 10EU/ng（ CoA）BET水（ W） 安度斯 25ml/瓶 內(nèi)毒素 反應(yīng)項目? 將標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素制備成至少 3個濃度的稀釋液，相鄰濃度間稀釋倍數(shù)不得大于 10，最低濃度不得低于所用鱟試劑的標(biāo)示檢測限? 實驗前，先預(yù)熱動態(tài)儀，使其達(dá)到反應(yīng)溫度項 目 平行管陰性對照溶液 (D) O OO O OO O OO O O內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液（ C）(EU/mL)2023/1/2823溶液 C的制備E100 WE10 WE2 W W30s30s30s 30sBET水 CSE混合 5分鐘E10 E2 E CSE/E1002023/1/2824鱟試劑的準(zhǔn)備? ① 取 TAL 1支，用砂輪在 安瓿頸 劃痕，擦拭后從安瓿頸處折斷（避免玻璃屑落入安瓿內(nèi)）； ② 用刻度吸管或移液器準(zhǔn)確吸取 BET水 ，輕輕搖勻，使內(nèi)容物全部溶解（避免產(chǎn)生氣泡）；③ 取反應(yīng)試管 11支，按 EU/ml、 EU/ml、 ， NC平行 2管標(biāo)記；2023/1/2825軟件系統(tǒng)的設(shè)置? 進(jìn)入動態(tài)儀系統(tǒng)軟件，根據(jù)試驗要求，設(shè)置相關(guān)參數(shù)，如反應(yīng)時間、預(yù)設(shè)透光度值等。? 2023/1/2828結(jié)果判斷? 藥典要求– 陰性對照的反應(yīng)時間應(yīng)大于標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度的反應(yīng)時間– 標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù) |r|≥? 廠家建議值– 變異系數(shù) CV%10%? 關(guān)于相關(guān)系數(shù)– 當(dāng)對一組數(shù)據(jù)作線性回歸分析時，以相關(guān)系數(shù) r表示其標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性狀況，即該組數(shù)據(jù)的相關(guān)狀況。當(dāng) r值的絕對值 |r|=1時，其標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性最好
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