光度測(cè)定法bet檢查技術(shù)(已修改)
2025-02-28 03:55 本頁面
【正文】 光度測(cè)定法 BET檢查技術(shù)湛江安度斯生物有限公司2023年 3月? 光度測(cè)定法方法學(xué)分類? 光度測(cè)定法原理? 動(dòng)態(tài)比濁法 BET? 終點(diǎn)比色法 BET2023/1/282光度測(cè)定法方法學(xué)分類光度測(cè)定法 （定量法檢測(cè)）濁度法顯色法動(dòng)態(tài)濁度法終點(diǎn)濁度法動(dòng)態(tài)顯色法終點(diǎn)顯色法(比濁法 )(比色法 )2023/1/283光度測(cè)定法原理? 光電轉(zhuǎn)換原理– 光度測(cè)定法是利用鱟試劑與內(nèi)毒素的混合物在反應(yīng)過程的透光度變化與內(nèi)毒素濃度的關(guān)系來定量檢測(cè)內(nèi)毒素的一種方法。– 當(dāng)一束光線進(jìn)入如下光電轉(zhuǎn)換裝置時(shí)，該裝置將產(chǎn)生電流 I，我們稱 I為透光強(qiáng)度。入射光反應(yīng)混合物透射光光電池I透光容器2023/1/284? 設(shè)：初始時(shí)的透光強(qiáng)度為 Is，某時(shí)刻的透光強(qiáng)度為 It定義 1：透光度（ Rt）： Rt=It/Is(%) 初始時(shí) It=Is， Rt=100%， Rt曲線變化趨勢(shì)是由高至低。 定義 2： 吸光度 (OD)： OD= lg(It/Is) 初始時(shí) It=Is， OD=0， OD曲線變化趨勢(shì)是由低至升高。? 選擇不同的參數(shù) (Rt或 OD)將得到不同變化趨勢(shì)的動(dòng)態(tài)曲線。T(分)IsItIeI2023/1/285TAL與內(nèi)毒素反應(yīng)的動(dòng)態(tài)曲線 (RtT曲線 )? 以透光度（ Rt）為縱座標(biāo)，時(shí)間（ T）為橫座標(biāo)，把 TAL與內(nèi)毒素反應(yīng)引起反應(yīng)混合液透光度的變化連續(xù)地描繪在座標(biāo)系中，便得到該反應(yīng)的動(dòng)態(tài)曲線如圖：Rt（ %）T（分）動(dòng)態(tài)曲線100孕育期 反應(yīng)期 結(jié)束2023/1/286TAL與內(nèi)毒素反應(yīng)的動(dòng)態(tài)曲線 (ODT曲線 )? 以吸光度（ OD）為縱座標(biāo)，時(shí)間（ T）為橫座標(biāo)，把 TAL與內(nèi)毒素反應(yīng)引起反應(yīng)混合液吸光度的變化連續(xù)地描繪在座標(biāo)系中，便得到該反應(yīng)的動(dòng)態(tài)曲線如圖：ODT（分）動(dòng)態(tài)曲線0孕育期 反應(yīng)期 結(jié)束2023/1/287動(dòng)態(tài)曲線的特點(diǎn)? 把標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素制備成三個(gè)濃度 C C C3（ C1C2C3 ），分別與 TAL反應(yīng)，描繪出反應(yīng)的動(dòng)態(tài)曲線如下圖：C3Rt（ %）T（分）C2C1分析動(dòng)態(tài)曲線可看出：1. 內(nèi)毒素濃度越高，孕育期越短；2. 內(nèi)毒素濃度越高，反應(yīng)期曲線越陡；3. 內(nèi)毒素濃度越高，進(jìn)入結(jié)束期越快。2023/1/288光度測(cè)定法 BET試驗(yàn)的相關(guān)變量C3100Rt（ %）T（分）C2C1相關(guān)變量：? 內(nèi)毒素濃度 (C)? 透光度 (Rt或 OD)? 反應(yīng)時(shí)間 (T)2023/1/2891）動(dòng)態(tài)法原理? 固定透光度 (Rt)，建立內(nèi)毒素濃度與反應(yīng)時(shí)間關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線（ CT曲線），用供試品的反應(yīng)時(shí)間比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出供試品的內(nèi)毒素濃度。這里的反應(yīng)時(shí)間是指反應(yīng)混合液的透光度到達(dá)預(yù)設(shè)透光度值（ Rt）的時(shí)間?；貧w分析Rt%預(yù)設(shè)透光度值 R0T1 T2 T392100T(分 )C1C2 C3LgT=bkLgCLgTT3T2T1C3 C2 C1 LgC（ 1）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線2023/1/2810（ 2）測(cè)定樣品內(nèi)毒素濃度（ Cs）? 用鱟試劑與未知內(nèi)毒素含量的供試品 (S)反應(yīng)，得到反應(yīng)時(shí)間 Ts，比對(duì) CT關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可得出供試品的內(nèi)毒素含量 Cs。比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線Ts T(分 )Rt(%)R0CsLgT=bkLgCLgCCsTsLgT922023/1/28112）終點(diǎn)法原理? 固定反應(yīng)時(shí)間（ T），建立內(nèi)毒素濃度與透光度關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線（ CRt曲線），用供試品的透光度比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出供試品的內(nèi)毒素濃度。Rt(%)T(分 )C1 C2C3100R1R2R3預(yù)設(shè)反應(yīng)終止時(shí)間 T0 RtR3R2R1C3 C2 C1Rt=bKC回歸分析（ 1）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線2023/1/2812（ 2）測(cè)定樣品內(nèi)毒素濃度（ Cx）? 用鱟試劑與未知內(nèi)毒素含量的供試品（ X）反應(yīng)，得到透光度值Rx，比對(duì) CRt關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可得出供試品的內(nèi)毒素含量 Cx。CxTo T(分 )Rx100Rt(%)
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