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2025-02-09 09:59本頁面
【正文】 oli DNA連接酶 T4 DNA連接酶 連接兩條鏈缺口上的 磷酸二酯鍵 DNA連接酶 可把黏性末端 之間的縫隙 “ 縫合 ”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個重組的 DNA分子就形成了。 （ 2） DNA聚合酶是以 一條 DNA鏈為模板 ， 形成一條與模板鏈互補的 DNA鏈 ；而 DNA連接酶是將 DNA雙鏈上的 兩個缺口同時連接起來 。 （ 3）二者雖然都是由蛋白質(zhì)構(gòu)成的酶，但組成和性質(zhì) 各不相同。coli DNA 連接酶和 T4 DNA連接酶 T4 DNA連接酶 外源基因 (如抗蟲基因 )怎樣才能導(dǎo)入受體細胞 (如棉花細胞 )？ 導(dǎo)入過程需要運輸工具 ——運載體 。 2）具多個 限制酶切點 ，以便 與外源基因連接 。 （如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。 作為載體必須具備的條件： ? 常用的載體： 質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細菌染色體之外，能夠進行 自我復(fù)制 的雙鏈環(huán)狀 DNA分子。質(zhì)粒的 存在與否對宿主細胞生存沒有決定性作用 ，但 復(fù)制只能在宿主細胞內(nèi)成 。 ②說明質(zhì)粒有切割位點的是 ── “目的基因的插入位點 ” 。 其他載體： λ 噬菌體的衍生物 動植物病毒等 常用載體： 細菌質(zhì)粒 具備條件： ① 能自我復(fù)制； ② 有切割位點； ③ 有遺傳標(biāo)記基因 ④ 對受體細胞無害、易分離。 模擬制作 綠色紙板 粉色紙板 剪刀 透明膠 材料用具： —— 目的基因 —— 載體 —— EcoRⅠ —— DNA連接酶 4種堿基序列（目的基因或載體上的堿基序列） 膠水（用來貼基因或載體上的堿基序列） 重組 DNA 分子的模擬制作 模擬制作 （ 1） 在藍色 、 橙色紙板上依次貼上有關(guān)的堿基序列 。 從兩塊硬紙板中找出 GAATT序列，找到GA切口，進行切割。 用透明膠將橙色紙板 DNA連接到藍色紙板上。因為一般基因有上千個堿基對。 DNA重組技術(shù)的基本工具 本節(jié)知識小結(jié) 167。coli DNA連接酶 T4 DNA連接酶 T 磷酸二酯鍵 1 2 3 4 5 1 2 3
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