【正文】 化學(xué)與生命科學(xué)系微生物實驗室提供 實驗方法 菌種的純化 斜面培養(yǎng)基制作配制PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯（去皮）200g加水1000ml煮沸15～20min后，用4層紗布過濾將濾液煮沸加入瓊脂20g，葡萄糖20g，補(bǔ)足無菌水至1000ml，調(diào)節(jié)PH至5～，趁熱分裝至試管中，每管10ml，進(jìn)行加塞包扎。放回內(nèi)層鍋,并裝入待滅菌物品，旋緊滅菌鍋上的螺栓,使螺栓松緊一致,勿使漏氣。, 約為121℃,控制熱源,維持壓力25min. 切斷電源使溫度自然下降,當(dāng)壓力表的壓力降至0時,打開排氣閥,排氣完畢后,旋松螺栓,打開蓋子,取出滅菌物品。（斜面培養(yǎng)基最好提前幾天制作，防止水蒸氣過重影響菌絲生長）無菌接種及培養(yǎng)無菌條件下，在超凈工作臺上從斜面母種中取黃豆粒大小的菌種塊（帶原培養(yǎng)基），在酒精燈下接種于用PDA培養(yǎng)基制作的斜面培養(yǎng)基中，置25℃恒溫培養(yǎng)箱中，避光靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)2天后菌絲萌發(fā)，約15天后試管內(nèi)長滿菌絲，檢查有無雜菌[11]。 菌種的活化活化菌種培養(yǎng)皿的制作配制PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯（去皮）200g加水1000ml煮沸15～20min后，用4層紗布過濾將濾液煮沸加入瓊脂20g，葡萄糖20g，補(bǔ)足無菌水至1000ml，調(diào)節(jié)PH至5～，趁熱分裝至試管中，每管15ml，進(jìn)行加塞包扎,高壓蒸汽滅菌。在無菌操作下，在超凈工作臺內(nèi)將滅好菌的試管冷卻至50～60℃時倒入冷卻后的培養(yǎng)皿內(nèi)（實驗所用平板采用直徑9cm的培養(yǎng)皿，裝量15ml/皿），冷卻靜置待用。 鐵元素對杏鮑菇菌絲生長的影響配制鐵元素母液：精確稱量氯化鐵1g，用熱水溶解，然后倒入1000ml容量瓶中，定容至1000ml為1mg/ml的鐵元素母液；不同濃度鐵元素溶液的的配制：用移液管從1mg/ml的氯化鐵水溶液中分別取11ml,12ml,13ml于貼好標(biāo)簽的100ml的容量瓶中，分別定容至100ml，得到1100ug/ml ，1150ug/ml，1200ug/ml，1250ug/ml，1300ug/ml[13] 5個濃度的鐵元素溶液。不同濃度鐵元素培養(yǎng)基的制作：分別用移液管取1ml各濃度的氯化鐵溶液和蒸餾水于貼好標(biāo)簽的燒杯中，加培養(yǎng)基至50ml,調(diào)pH值5～。試管分別貼好標(biāo)簽，高壓蒸汽滅菌。接種：在超凈工作臺內(nèi)，無菌操作，[14]，用接種鏟定量接種于實驗所用培養(yǎng)基平板中央。觀察記錄， 定時觀測菌絲體的生長情況，記錄菌落直徑累計長度，并填寫下列表格，同時觀察菌絲濃密和菌落形態(tài)。由測得的數(shù)據(jù)可以分別求出每組培養(yǎng)皿在不同培養(yǎng)時期時的平均直徑，并填入表內(nèi)，可以看出：在一定范圍內(nèi)，不同濃度的鐵離子加入PDA培養(yǎng)基內(nèi)都可以使杏鮑菇菌絲菌落直徑增大，當(dāng)鐵離子濃度為1150ug/ml時，這種作用效果最明顯，當(dāng)超過這個濃度時作用效果變?nèi)酢Ｅ渲芇DA培養(yǎng)基：馬鈴薯（去皮）200g加水1000ml煮沸15～20min后，用4層紗布過濾將濾液煮沸加入瓊脂20g，葡萄糖20g，補(bǔ)足無菌水至1000ml。然后趁熱分裝入試管，每管大約15ml，每個濃度裝3支試管。在無菌操作下，在超凈工作臺內(nèi)將滅好菌的試管冷卻至50～60℃時倒入干熱滅菌冷卻后的培養(yǎng)皿內(nèi)，貼好標(biāo)簽，冷卻靜置待用。將接種后的平板置25℃恒溫培養(yǎng)箱中，避光靜置培養(yǎng)10天。培養(yǎng)20天后，結(jié)束培養(yǎng)。表組2鈣離子對杏鮑菇菌絲生長的影響① 對照組 ② 300ug/ml 培養(yǎng)皿編號菌落直徑長度（cm）3d 6d 9d 12d 15d1 2 3 平均 培養(yǎng)皿編號菌落直徑長度（cm）3d 6d 9d 12d 15d4 5 6 平均 3 ③ 350ug/ml培養(yǎng)皿編號菌落直徑長度（cm）3d 6d 9d 12d 15d7 8 9 平均 ④ 400ug/ml⑤ 450ug/ml培養(yǎng)皿編號菌落直徑長度（cm）3d 6d 9d 12d 15d10 11 12 平均 培養(yǎng)皿編號菌落直徑長度（cm）3d 6d 9d 12d 15d13 14 15 平均 ⑥ 500ug/ml 培養(yǎng)皿編號菌落直徑長度（cm）3d 6d 9d 12d 15d16 17 18 平均 3. 實驗結(jié)果與分析 不同濃度鐵離子對杏鮑菇菌絲的生長速度和長勢有不同的影響。 不同濃度鈣離子對杏鮑菇菌絲生長的影響不同濃度鈣離子對杏鮑菇菌絲的生長速度和長勢有不同的影響。但是本文還有以下問題值得更進(jìn)一步深入研究。其次，本文只是在PDA培養(yǎng)基中研究不同濃度的金屬離子對杏鮑菇菌絲的生長影響，而對于袋裝工業(yè)化子實體生長過程中添加鐵，鈣離子是否有相同的影響，也有待于更深一步實驗。所以更值得我們進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)[1]宮志遠(yuǎn), 于淑芳, 曲玲. 碳、氮營養(yǎng)對杏鮑菇菌絲生長的影響[J]. 中國食用菌 , 2002,(03)，2425[2][N].廣西輕工業(yè)，,106(9),2021[3]宮志遠(yuǎn), 于淑芳, 曲玲. 營養(yǎng)和環(huán)境條件對杏鮑菇菌絲生長的影響[J]. 食用菌學(xué)報 , 2002,(03),1317[4]郭美英. 珍稀食用菌杏鮑菇生物學(xué)特性的研究[J]. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報 , 1998,(03)，4449 [5]李小平, 李鳴雷, 呼有賢等. 杏鮑菇生物學(xué)特性及栽培技術(shù)[J]. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué) , 2000,(07),3536[6] 曹恭, 梁鳴早. 鐵——平衡栽培體系中植物必需的微量元素[J]. 土壤肥料 , 2003,(04),4647 [7]曹恭, 梁鳴早. 鈣—平衡栽培體系中植物必需的中量元素[J]. 土壤肥料 , 2003,(02)，4849[8]朱建華，[N].（2）．103105[9] 楊德俊，馮紀(jì)南，[J].食用菌，2007（5）,910[10]肖輝. 杏鮑菇的特征特性及其制種栽培[J]. 農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技 , 2001,(02)，21[11]王德源, 劉可春, 黨立等. 杏鮑菇液體菌種制作及應(yīng)用[J]. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué) ,2006,(03)，4849 [12] 梁建