【正文】 至1000ml。 接種及培養(yǎng)在超凈工作臺(tái)中，從純化后的斜面菌種中，無(wú)菌操作，取黃豆粒大小的菌種塊，無(wú)菌操作，接于活化菌種所用平板中，置25℃恒溫培養(yǎng)箱中，避光倒置培養(yǎng)10天，作為實(shí)驗(yàn)菌種。將用于培養(yǎng)用的培養(yǎng)皿用報(bào)紙包好，干熱滅菌。選擇生長(zhǎng)良好，生物特征明顯，無(wú)雜菌的菌種用于接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)[12]。擱置斜面：當(dāng)培養(yǎng)基冷卻至50℃左右,使培養(yǎng)基形成的斜面的長(zhǎng)度不超過(guò)試管總長(zhǎng)的一半,冷卻待用。接通電源加熱,同時(shí)打開(kāi)排氣閥,幾分鐘后排氣閥內(nèi)有冷空氣排出,待冷空氣完全排盡后, 關(guān)閉排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。高壓蒸汽滅菌：首先將內(nèi)層鍋取出,再向外層鍋內(nèi)加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。 2 實(shí)驗(yàn)部分 主要儀器與試劑 主要儀器 立式壓力蒸汽滅菌器 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠 ,220V 無(wú)菌操作工作臺(tái) 上海亞榮生化儀器廠電子萬(wàn)用爐 北京市永光明醫(yī)療儀器廠 DL1型,1000W,220V電子分析天平 中國(guó)輕工業(yè)機(jī)器總公司常熟衡天 DF110型干燥箱 上海市實(shí)驗(yàn)儀器總廠 2022型,220V,300℃ 恒溫生化培養(yǎng)箱 上海綠宇生物科技有限公司 RXZ300D型 220V 0～50℃ 基本試劑和藥品 氯化鐵 分析純,含量大于99% 北京化學(xué)試劑公司 無(wú)水氯化鈣 分析純，含量大于99% 北京化工廠 葡萄糖 分析純 ，% 天津市永大化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心瓊脂 上?；瘜W(xué)試劑站分裝廠 馬鈴薯 郴州市場(chǎng)購(gòu)買 主要的玻璃儀器及其他實(shí)驗(yàn)用具 燒杯,試管,玻璃棒,容量瓶（1000ml，100ml）,錐形瓶,移液管（100ml，10ml）,漏斗,紗布,接種針,酒精燈,標(biāo)簽紙,培養(yǎng)皿,棉花塞,牛皮紙。國(guó)內(nèi)外對(duì)杏鮑菇的研究雖有很多，但金屬離子對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)量的影響尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道[10]。鈣對(duì)植株挺立和莖桿硬度起作用, 也影響籽粒形成, 許多種子中有肌醇六磷酸鈣鎂。鈣可促進(jìn)硝態(tài)氮吸收, 與氮代謝有關(guān), 它有助于減少植物中的硝酸鹽, 中和植物中的有機(jī)酸, 對(duì)代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有機(jī)酸有解毒作用。鈣與環(huán)狀多肽結(jié)合而成的化學(xué)物質(zhì)鈣調(diào)素, 在控制植物細(xì)胞膜的功能和酶的活性方面起重要作用。鈣是細(xì)胞伸長(zhǎng)所必需。 鈣元素在生物體中的作用鈣是植物結(jié)構(gòu)組分元素。鐵是鉬2鐵蛋白和鐵蛋白的組分,固氮酶缺鐵就沒(méi)有固氮活性。細(xì)胞中約75 %的鐵與葉綠體結(jié)合,葉片中高達(dá)90 %的鐵與葉綠體和線粒體膜的脂蛋白結(jié)合。呼吸作用中鐵化合物將氧還原為水[6]。鐵氧化還原蛋白具有很高的負(fù)氧化還原電位,能還原多種物質(zhì),如NADP+、O2，亞硝酸、硫酸鹽和血紅蛋白[6]。此外，還含有銅、鋅、錳、鐵、鉀、磷等元素，膳食中多食用杏鮑菇可提高人體免疫功能，有抗癌、降血脂、潤(rùn)腸胃、美容等功效，亦可促進(jìn)人體對(duì)脂類物質(zhì)的消化吸收和膽固醇的溶解，是老年人和心血管疾病下肥胖癥患者理想的營(yíng)養(yǎng)保健品[5]。杏鮑菇子實(shí)體的氨基酸已知含有17種，﹪。同時(shí),它含有大量的寡糖, 是灰樹(shù)花的15倍、金針菇的315倍、真姬菇的2倍, 它與胃腸中的雙岐菌一起作用, 具有很好的促進(jìn)消化、[4]。前蘇聯(lián)的瓦西爾柯夫(1955) 稱它為“草原的美味牛肝菌”, 可見(jiàn)味道鮮美之極,目前在國(guó)際市場(chǎng)上是人工栽培的食用菌中數(shù)量稀少, 價(jià)格最高的菇類。近年, 泰國(guó)、美國(guó)、日本、我國(guó)的臺(tái)灣省采用調(diào)溫、調(diào)濕的自動(dòng)化生產(chǎn)工藝進(jìn)行試驗(yàn)性栽培, 取得成功[3]。 Ferri (1977) 首先進(jìn)行商業(yè)化栽培, 但只得到有限的成功。V essey (1971) 分離到杏鮑菇的菌株。Kalmar (1958) 第一次進(jìn)行栽培實(shí)驗(yàn)[]。菌褶延生，密集，乳白色。該菌隸屬于真菌門(mén)、真擔(dān)子菌綱、傘菌目、側(cè)耳屬。鈣離子；PDA培養(yǎng)基，杏鮑菇IABSTRACTThrough the preparation of a series of different Fe, Ca medium of elements in Pleurotus solid culture medium to observe the growth, derived trace elements on growth of Pleurotus optimal concentration. The results showed that: when the concentration of iron ions 1150ug/ml, the mushroom mycelium fastest increasing trend in the diameter of colony。通過(guò)研究Fe、Ca兩種金屬元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響，為進(jìn)一步優(yōu)化杏鮑菇菌絲培養(yǎng)基的研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。屆 別 2011 學(xué) 號(hào) 200714250126 畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）鐵離子和鈣離子對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響研究 目 錄摘 要 IABSTRACT II1 引言 1 杏鮑菇 1 金屬元素 1 鐵元素在生物體中的作用 2 鈣元素在生物體中的作用 2 選題的意義 22 實(shí)驗(yàn)部分 2 主要儀器與試劑 3 主要儀器 3 基本試劑和藥品 3 主要的玻璃儀器及其他實(shí)驗(yàn)用具 3 菌種 3 實(shí)驗(yàn)方法 3 菌種的純化 3 菌種的活化 4 鐵元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響 4 鈣元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響 63. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 9 9 9 討論 10參考文獻(xiàn) 12致謝 13摘 要通過(guò)配制一系列不同F(xiàn)e，Ca離子濃度的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)杏鮑菇菌絲，觀察其生長(zhǎng)情況，得出微量元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的最適濃度。結(jié)果表明：當(dāng)鐵離子的濃度在1150ug/ml時(shí)，杏鮑菇的菌絲菌落的直徑最大；當(dāng)鈣離子的濃度350ug/ml時(shí)，杏鮑菇的菌絲菌落的直徑最大。關(guān)鍵詞：鐵離子。 when the concentration of calcium ions 350ug/ml, the mushroom mycelium fastest increasing trend in the diameter of colony. Through the research Fe, Ca two metal elements of Pleurotus, the influence of hypha growth for further optimization Pleurotus hyphae medium research provides reliable experimental data.Key words: Iron ion, Calcium ions, PDA medium，PleurotuseryngiiII1 引言17 杏鮑菇杏鮑菇(Pleurotus eryngii) 是歐洲南部、非洲北部以及中亞地區(qū)高山、沙漠地帶的一種品質(zhì)優(yōu)良的大型肉質(zhì)傘菌, 屬于傘形花科、刺芹屬、刺芹枯死的植株上，所以又稱為刺芹側(cè)耳。杏鮑菇子實(shí)體單生或群生，菌蓋初球形、半球形，后漸平展，淺黃白色。菌柄偏生至側(cè)生，中實(shí)，棒狀到球莖狀，表面平滑，淺黃白色，無(wú)菌環(huán)，孢子橢圓至紡錘形法國(guó)、意大利、印度都先后進(jìn)行過(guò)杏鮑菇的栽培研究。 Henda (1970) 在印巴交界的克什米爾高山上發(fā)現(xiàn)杏鮑菇, 并首次在段木上進(jìn)行栽培。 Cailleux (1974) 用菌褶分離到杏鮑菇的菌株, 并試驗(yàn)栽培成功。長(zhǎng)期以來(lái), 杏鮑菇在全世界鮮有商業(yè)化栽培。 杏鮑菇的肉質(zhì)肥厚, 質(zhì)地脆嫩, 特別是菌柄色澤雪白, 粗長(zhǎng), 組織極其致密, 結(jié)實(shí), 脆感強(qiáng), 其口感獨(dú)具一格, 是味道最好的菇類之一, 被稱為“平菇王”、“干貝菇”。杏鮑菇的營(yíng)養(yǎng)十分豐富, 植物蛋白含量高達(dá)25% , 含18 種氨基酸和具有提高人體免疫力、防癌抗癌的多糖。杏鮑菇營(yíng)養(yǎng)豐富，符合高蛋白低脂肪的營(yíng)養(yǎng)食品要求。礦物元素也很豐富，人體必需的微量元素鈣和鎂的含量特別高。 金屬元素 鐵元素在生物體中的作用鐵氧化還原蛋白屬于穩(wěn)定的鐵 硫蛋白,存在于葉綠體中,是光合電子傳遞鏈中第一個(gè)穩(wěn)定氧化還原化合物,是最初的電子受體。鐵是卟啉分子的結(jié)構(gòu)組分,諸如細(xì)胞色素、鐵血紅素、羥高鐵血紅素和豆血紅蛋白均參與葉綠體中光合作用和線粒體中呼吸作用兩個(gè)代謝過(guò)程中的氧化還原反應(yīng)。植物中大部分鐵是以鐵磷蛋白的形式儲(chǔ)存,稱為植物鐵蛋白。葉子中植物鐵蛋白儲(chǔ)存作為形成質(zhì)體用,是進(jìn)行光合作用所必需的[6]。固氮酶在固氮微生物中處于N2固定過(guò)程中心，在大豆中,鐵也能部分取代鉬作硝酸還原酶的金屬輔助因子[6]。主要構(gòu)成果膠酸鈣、鈣調(diào)素蛋白、肌醇六磷酸鈣鎂等, 在液泡中有大量的有機(jī)酸鈣, 如草酸鈣、檸檬酸鈣、蘋(píng)果酸鈣等[7]。鈣離子能降低原生膠體的分散度, 調(diào)節(jié)原生質(zhì)的膠體狀態(tài), 使細(xì)胞充水度、粘滯性、彈性以及滲透性等適合于正常作物生長(zhǎng)。鈣是一些重要酶類的活化劑[7]。如鈣可與產(chǎn)生的草酸形成草酸鈣結(jié)晶, 避免草酸過(guò)多的不良影響[7]。固氮細(xì)菌大量需要鈣[8]. 選題的意義杏鮑菇是一種珍稀食用菌, 雖然人工栽培已獲得成功, 但其菌絲生長(zhǎng)緩慢, 生物轉(zhuǎn)化率偏低[9]。通過(guò)研究Fe、Ca兩種金屬元素對(duì)杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的影響，得到最適合杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)的含F(xiàn)e、Ca金屬元素濃度的培養(yǎng)基對(duì)提高杏鮑菇的產(chǎn)量具有重要意義，另外將為進(jìn)一步優(yōu)化杏鮑菇菌絲培養(yǎng)基的研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 菌種 杏鮑菇母種 湘南學(xué)院