【正文】
具有 標記基因 ,便于進行篩選 如 抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。 其中 質(zhì)粒 存在于許多細菌和酵母菌等生物中 ,是細胞染色體外能夠自主復(fù)制的 很小的環(huán)狀 DNA分子 . ( 4)它們的共同特點是 都有侵染或進入宿主細胞的能力 從細胞中分離出 DNA 從大腸桿菌中提取質(zhì)粒 限制 酶 提取目的基因 限制酶 目的基因與運載體結(jié)合 DNA連 接酶 目的基因?qū)胧荏w細胞 目的基因的表達與檢測 三、基因工程操作的基本步驟 第一步: 獲取目的基因 直接分離基因 —— 鳥槍法 該法最大的缺點是 帶有很大的盲目性,工作量大,成功率低。 有兩種方法: ① 逆轉(zhuǎn)錄法 :以信使 RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下利用脫氧核苷酸合成DNA(基因 )。用游離脫氧核苷酸直接合成相應(yīng)的基因。 基因的針線: DNA連接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶切割 第三步: 將目的基因?qū)胧荏w細胞 常用的受體細胞: 大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌、動植物細胞等 常用微生物作受體細胞的原因: 微生物增殖快、代謝快、目的產(chǎn)物多 (1)檢測的意義:鑒別目的基因是否真正導(dǎo)入受體細胞。 (3)目的基因的表達:受體細胞表現(xiàn)出特定性狀,說明目的基因?qū)牒屯瓿杀磉_過程。受材料來源限制產(chǎn)量有限,其價格往往十分昂貴。若 將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因 導(dǎo)入微生物細胞內(nèi),讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物,不但能解決產(chǎn)量問題,還能大大降低生產(chǎn)成本。 將合成的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌,每2022L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素!使其價格降低了 30%50%! 干擾素治療病毒感染簡直是“萬能靈藥”!過去從人血中提取,300L血才提取 1mg!其“珍貴”程度自不用多說。 人造血液及其生產(chǎn) 乙肝疫苗 我國生產(chǎn)的部分基因工程藥物和疫苗 我國生產(chǎn)的部分胰島素產(chǎn)品 ? 拓展題: ? ,為什么通過基因重組后,細菌能夠合成人體的某些蛋白質(zhì)呢?