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第十三章發(fā)酵產(chǎn)物的提取與精制方法-在線瀏覽

2024-09-11 13:30本頁(yè)面
  

【正文】 物質(zhì)分配平衡的因素 ? ( 1)聚合物及其分子量的影響 ? 不同聚合物的水相系統(tǒng)顯示出不同的疏水性,水溶液中聚合物的疏水性按下列次序遞增 : ? 葡萄糖硫酸鹽 甲基葡萄糖 葡萄糖 羥丙基葡聚糖 甲基纖維素 聚乙烯醇 聚乙二醇 聚丙三醇 同一聚合物的疏水性隨分子量增加而增加, 其大小的選擇依賴于萃取過(guò)程的目的和方向,在 PEG/DEX系統(tǒng)中,蛋白質(zhì)的分配系數(shù)隨著 DEX相對(duì)分子量的增加而增加。 ? ? ( 2) pH 值的影響 ? 改變兩相的電位差 ? 如體系 pH 值與蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)相差越大,則蛋白質(zhì)在兩相中分配越不均勻。 ? ( 3)離子環(huán)境對(duì)蛋白質(zhì)在兩相體系分配的影響 ? 在雙水相聚合物系統(tǒng)中,加入電解質(zhì)時(shí),其陰陽(yáng)離子在兩相間會(huì)有不同的分配。同樣,對(duì)于粒子遷移也有相似的影響,粒子因遷移而在界面上積累。 ? ( 4)溫度的影響 ? 分配系數(shù)對(duì)溫度的變化不敏感 ? 成相聚合物對(duì)蛋白質(zhì)有穩(wěn)定化作用 ,所以室溫操作活性收率依然很高 ,而且室溫時(shí)粘度較冷卻時(shí) (4 ℃ ) 低 ,有助于相的分離并節(jié)省了能源開支。m 1) ,有助于保持生物活性和強(qiáng)化相際間的質(zhì)量傳遞 ? (2) 分相時(shí)間短 (特別是聚合物 / 鹽系統(tǒng) ) ,自然分相時(shí)間一般只有 5~ 15min。 ? (4) 目標(biāo)產(chǎn)物的分配系數(shù)一般大于 3 ,大多數(shù)情況下 ,目標(biāo)產(chǎn)物有較高的收率。 ? (6) 設(shè)備投資費(fèi)用少 ,操作簡(jiǎn)單 ,不存在有機(jī)溶劑殘留問題。 PEG的循環(huán) 。 ? 雙水相的應(yīng)用舉例 ? 分離和提純各種蛋白質(zhì) (酶) ? 用 PEG/ (NH4) 2SO4 雙水相體系 ,經(jīng)一次萃取從 α 淀粉酶發(fā)酵液中分離提取 α 淀粉酶和蛋白酶 , 萃取最適宜條件為 PEG1000 ( 15 %) (NH4) 2SO4 (20 %) ,pH = 8 ,α 淀粉酶收率為 90 % ,分配系數(shù)為 19. 6 ,蛋白酶的分離系數(shù)高達(dá)15. 1。 ? 提取抗生素和分離生物粒子 ? 采用 PEG/ Na2HPO4 體系提取丙酰螺旋霉素,最佳萃取條件是 pH= 8. 0~ 8. 5 , PEG2022 (14 %) / Na2HPO4 (18 %) ,小試收率達(dá) 69. 2 % ,對(duì)照的乙酸丁酯萃取工藝的收率為 53. 4 % ? 雙水相和其他方法的集成 ? A、與溫度誘導(dǎo)相分離的集成 ? B、磁場(chǎng)增強(qiáng)雙水相 ? C、超
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