【正文】 聯(lián)性。6．初步闡明人結(jié)核分枝桿菌對牛的致病特征；鑒定豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌及結(jié)核分枝桿菌的新的毒力相關(guān)基因20個以上，完成8－10個毒力因子與宿主細(xì)胞的相互作用及其信號傳導(dǎo)通路研究，初步闡明豬鏈球菌與副豬嗜血桿菌的協(xié)同致病作用和機制。8．發(fā)表SCI收錄論文50－60篇，申請/獲得專利15－20項，培養(yǎng)5－6名左右中青年學(xué)術(shù)骨干，培養(yǎng)研究生100－150名。本工程從病原菌的分離鑒定和收集及流行規(guī)律、生態(tài)分布和基因組序列變異等研究入手，揭示病原菌的流行與傳播機制、流行血清型和致病性的動態(tài)變化及毒力多樣性和抗原多樣性的遺傳基礎(chǔ)；進而以代表性的菌株為研究對象，構(gòu)建病原菌的蛋白質(zhì)互作與基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，研究病原菌表面多糖的合成機制與功能，揭示病原菌生長、代謝、毒力調(diào)控和耐藥機制，預(yù)測和鑒定新的功能基因、蛋白質(zhì)和表面多糖；深入研究病原菌及其蛋白質(zhì)和表面多糖與宿主的相互作用，揭示病原菌的感染、致病、免疫應(yīng)答和免疫逃避的機制，為這三種傳染病的防控提供必要的科學(xué)理論依據(jù)。已結(jié)題的973計劃工程在科學(xué)研究、人才培養(yǎng)、平臺建設(shè)、重要成果等方面均超額完成了計劃任務(wù)，并被評為“優(yōu)秀”。因此，本工程有非常堅實的工作基礎(chǔ)。工程組絕大多數(shù)人員參與了上一個973計劃工程的研究，具有良好的團隊合作基礎(chǔ)和前期研究工作基礎(chǔ)。因此，本工程有優(yōu)秀的人才隊伍保障。支撐條件：本工程涉及的七個單位擁有與該申請工程研究領(lǐng)域相關(guān)的4個國家重點實驗室、3個省部級重點實驗室和1個中科院重點實驗室；四家單位擁有資質(zhì)認(rèn)可、運行良好的生物安全III級實驗室。二）工程的創(chuàng)新點與特色1．在我國，結(jié)核病在動物特別是牛）和人間相互傳播有增加的趨勢，豬鏈球菌不僅在動物中感染率高，而且已成為成人腦膜腦炎的重要病原菌之一，副豬嗜血桿菌病是養(yǎng)豬業(yè)最重要的新發(fā)細(xì)菌性傳染病。2．從結(jié)核分枝桿菌和豬鏈球菌的全局性蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)和基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析與驗證入手，揭示病原菌生長、代謝、毒力調(diào)控和耐藥機制，不僅為病原菌致病與免疫機制研究奠定基礎(chǔ)，而且是發(fā)現(xiàn)新的藥物靶標(biāo)和防治策略的重要途徑。4．從病原菌及其重要組分蛋白質(zhì)、表面多糖）與宿主相互作用及其信號傳導(dǎo)通路分析入手，深入研究病原菌的感染、致病、免疫應(yīng)答和免疫逃避的機制，為揭示三種細(xì)菌性傳染病的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸機制提供科學(xué)數(shù)據(jù)。2．主要研究內(nèi)容1）結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群在動物和人間的流行現(xiàn)狀與傳播規(guī)律：進一步研究人結(jié)核分枝桿菌在牛等動物中的流行情況與致病性及牛分枝桿菌在人間的流行情況；通過流行環(huán)節(jié)和溯源研究，揭示結(jié)核在牛－人間的傳播規(guī)律與機制。3）細(xì)菌分離鑒定和保藏：從動物和/或人中分離鑒定一批結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群、豬鏈球菌和副豬嗜血桿菌的地方流行菌株，建立菌種資源庫；鑒定新的細(xì)菌基因分型標(biāo)記，建立新的基因或血清分型方法；進行種、基因型和血清型鑒定，為基因變異和分子流行病學(xué)研究積累材料與資料。3．承擔(dān)單位、課題負(fù)責(zé)人和主要學(xué)術(shù)骨干1）承擔(dān)單位：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所、寧夏大學(xué)2）課題負(fù)責(zé)人：郭愛珍3）主要學(xué)術(shù)骨干：劉思國、王玉炯、蔡旭旺4．經(jīng)費比例：22％課題病原菌的蛋白質(zhì)互作與基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)1．主要研究目標(biāo)構(gòu)建或完善結(jié)核分枝桿菌和豬鏈球菌的蛋白質(zhì)相互作用與基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，發(fā)掘與細(xì)菌生長、代謝和耐藥相關(guān)的新關(guān)鍵因子和藥物靶標(biāo)；鑒定牛分枝桿菌的乙?；鞍鬃V及Sir2蛋白的底物蛋白譜，揭示Sir2蛋白與病原菌致病性之間的關(guān)系。2）豬鏈球菌的蛋白質(zhì)互作與基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究：利用生物信息學(xué)和雙雜交技術(shù)構(gòu)建豬鏈球菌2型的全菌蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)，預(yù)測和鑒定與生長、代謝、毒力調(diào)控相關(guān)的新功能基因和蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)藥物新靶標(biāo)。3．承擔(dān)單位、課題負(fù)責(zé)人和主要學(xué)術(shù)骨干1）承擔(dān)單位：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國科學(xué)院武漢病毒研究所2）課題負(fù)責(zé)人：周銳3）主要學(xué)術(shù)骨干：張華、谷晶、徐卓菲、金卉4．經(jīng)費比例：26％課題病原菌表面多糖的結(jié)構(gòu)與功能1．主要研究目標(biāo)以結(jié)核分枝桿菌、豬鏈球菌等病原菌的表面多糖為對象，通過對參與其生物合成的糖基供體合成酶及糖基轉(zhuǎn)移酶的基因組學(xué)分析、結(jié)構(gòu)與功能分析、多糖結(jié)構(gòu)分析等，闡明病原菌表面多糖合成途徑，為基于多糖抗原和毒力因子的診斷、疫苗及藥物開發(fā)奠定基礎(chǔ)。3．承擔(dān)單位、課題負(fù)責(zé)人和主要學(xué)術(shù)骨干1）承擔(dān)單位：中國科學(xué)院微生物研究所、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、大連醫(yī)科大學(xué)2）課題負(fù)責(zé)人：李學(xué)兵3）主要學(xué)術(shù)骨干：馬郁芳、譚臣4．經(jīng)費比例：16％課題病原菌感染與分子致病機制1．主要研究目標(biāo)初步闡明人結(jié)核分枝桿菌在牛群中的感染與致病特征；闡明豬鏈球菌和副豬嗜血桿菌與其它呼吸道病原的混合感染與協(xié)同致病機制；研究病原菌毒力因子與宿主的相互作用及其信號傳導(dǎo)途徑，揭示病原菌對細(xì)胞、組織和器官導(dǎo)致的病理損傷及其機制。2）病原菌感染、發(fā)病、發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)歸的機制：以結(jié)核分枝桿菌為重點，通過實驗動物模型研究病原菌感染的病程經(jīng)過與轉(zhuǎn)歸機制。4）病原菌與宿主的相互作用研究：研究病原菌重要毒力因子與宿主的相互作用及其信號傳導(dǎo)途徑，初步闡明豬鏈球菌和副豬嗜血桿菌突破血腦屏障的機制。3．承擔(dān)單位、課題負(fù)責(zé)人和主要學(xué)術(shù)骨干1）承擔(dān)單位：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所2）課題負(fù)責(zé)人：陸承平3）主要學(xué)術(shù)骨干：范紅結(jié)、姜永強4．經(jīng)費比例：16％課題病原菌的免疫應(yīng)答與免疫逃避機制1．主要研究目標(biāo)鑒定結(jié)核病發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸過程的分子標(biāo)識；初步闡明自噬在牛分枝桿菌感染的先天性免疫和獲得性免疫中的作用及其機制，揭示牛分枝桿菌免疫逃避以及引起慢性炎癥的機制；闡明豬鏈球菌引起急性炎癥和導(dǎo)致炎癥紊亂的機制。2）牛分枝桿菌免疫逃避以及引起慢性炎癥的機制研究：比較研究牛分枝桿菌強弱菌株對小鼠樹突狀細(xì)胞成熟分化的影響，探討病原菌在樹突狀細(xì)胞內(nèi)存活的調(diào)節(jié)機制；研究病原菌相關(guān)分子在逃避吞噬、抑制活性氧ROS）/活性氮RNS）產(chǎn)生、阻斷補體活化通路、抑制免疫應(yīng)答等中的作用，揭示病原菌拮抗免疫應(yīng)答的分子機制；探索自噬在天然免疫和獲得性免疫中與細(xì)菌的相互作用以及這些過程中的信號和信號旁路，揭示