槐米中蘆丁的提取及含量測定-在線瀏覽
2024-08-02 17:15本頁面
【正文】 C27H30O16)不少于 15%[3]。其中蕓香糖（Rutinose）為葡萄糖（glucose,glc）與鼠李糖(Rhamnose,rham)經(jīng)1，6苷鍵連接而成的雙糖。槲皮素具有降低血壓、增強毛細血管抵抗力、減少毛細血管脆性、降血脂、擴張冠狀動脈，增加冠脈血流量等作用。對冠心病及高血壓患者也有輔助治療作用。：Lambda35型紫外可見分光光度計(PE公司)、KQ500E型超聲波清洗器、FA 2004N電子天平（上海天平儀器廠）、JB202電熱恒溫干燥箱(上海忠技儀器有限公司制造)、實驗室真空抽濾儀YH23(青島儀航有限公司)、乳缽、燒杯（1000ml、500ml）、布氏漏斗、表面皿、量瓶（100ml、50ml、10ml）、10ml移液管、吸量管（1ml、5ml）。2 實驗原理及實驗條件 蘆丁是黃酮類化合物，其基本母核為2苯基色原酮類化合物即C6C3C6結(jié)構(gòu)。淡黃色小針狀結(jié)晶，熔點為174~178℃（含三分子結(jié)晶水），188℃(無水物)。易溶于堿液中，呈黃色。稀溶液遇三氯化鐵呈綠色。查閱資料可知，UV λmaxEtOH nm：259，299（sh），359。HNMR（DMSOd6）δ：（1H，dd,J=、）；（1H,d,J=）；（1H,d，J=）；（1H,d,J=）；（1H,d,J=）；（1H,d，J=）；（1H,d,J=）；（10H,m）；（3H,d，J=）。黃色結(jié)晶，熔點為313314176。C（無水物）。其乙醇溶液味道極其苦澀，可作為藥品，具有較好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。蘆丁分子中含有多個酚羥基，而且7位處于C=O的對位，4/位處于C=C的對位，在PΠ共軛效應(yīng)的影響下，使酸性較強,易溶于堿液（飽和石灰水）中，酸化后溶解度降低復(fù)析出，從而可以用于蘆丁的提取和精制。蘆丁為黃酮苷，能與三價的鋁生成黃色配合物，在NaNO2的堿性溶液中呈紅色，在510nm波長處有最大吸收。 實驗條件的選擇最大波長的選擇：將蘆丁對照品加硝酸鈉、氫氧化鈉、硝酸鋁處理后的溶液，用紫外分光光度計在200～600nm進行掃描，標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液均在510nm處有最大吸收，故檢測波長選擇為510[67]。（2）殘渣再加200ml飽和石灰水，保持PH 78之間，并不斷攪拌，同時煮沸10min，趁熱過濾，合并兩次濾液，放冷。（4）次日傾出上清液（不要振搖），抽濾沉淀（布氏漏斗中墊兩層濾紙）并用蒸餾水洗至pH 56，將濾得物置于表面皿上，得粗蘆丁。 蘆丁的鑒定 呈色反應(yīng)：取上述蘆丁提取物34mg，加甲醇810ml使其溶解，分成3份做以下實驗。在本實驗中觀察到顏色變化：黃→紫→紅；說明有蘆丁或者槲皮素存在。因蘆丁溶液加ZOCl2后顏色加深（5OH存在），加入檸檬酸后顏色變淺；槲皮素加ZOCl2后顏色加深（5OH、3OHC存在），加入檸檬酸后顏色變化不明顯，由于顏色掩蓋效應(yīng)，不可排除兩同時存在。 薄層色譜檢識樣品溶液的處理：稱取蘆丁提取物20mg，加入甲醇10ml使配制成溶液；對照品溶液的處理：取蘆丁對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,作為對照品溶液。在本實驗中，觀察到供試品色譜上的熒光斑點與對照品色譜的熒光斑點出現(xiàn)的位置相一致。 蘆丁的含量測定 對照品溶液的制備精密秤取在120176。精密量取25ml至 50毫升容量瓶中，加60%乙醇至刻度，搖勻，即得（）。（2）各精密加入10%，充分搖勻，放置6分鐘。（4）以相應(yīng)的試劑為空白對照，在510nm最大波長處測定吸光度。標(biāo)準(zhǔn)溶液在紫外分光光度計下測得的吸光度溶液濃度C（mg/ml）吸光度A 標(biāo)準(zhǔn)曲線以吸光度為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線后求線性回歸方程，得回歸方程：A=+,R=。 樣品測定 精密稱取槐米提取液()，放在25ml容量瓶中，各加入30%，各精密加入5%，充分混勻，放置6分鐘；精密加入10%，充分搖勻，放置6分鐘；加入1mol /dm3氫氧化鈉溶液10ml，加30%乙醇至刻度，搖勻，放置15分鐘；于分光光度計上。 則無水蘆?。ǎィ?標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出的濃度(mg/ml)*25ml／取樣量（ml）*樣品的標(biāo)識濃度（mg/ml）=21％ 樣品穩(wěn)定性試驗 精密量取上述配制成的蘆丁甲醇溶液（）,即刻在510nm處測定吸光度，在常溫避免陽光直接照射條件下，每間隔一個小時測量一次，依次為1h、2h、3h、4h、5h……8h再次測定；結(jié)果表明，吸光度值在8h內(nèi)保持穩(wěn)定(如下圖)。（6），加30%，加入5%，混勻，放置6分鐘。（8）加入1mol /dm3氫氧化鈉溶液10ml，加30%乙醇至刻度，搖勻，放置15min。加標(biāo)量100%.=()\10=96%，符合加樣回收率范圍。本實驗采用紫外分光光度法，重現(xiàn)性好，精密度高，操作簡便，易于實踐。測得槐米中蘆丁
教學(xué)教案相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1